呼吸内科凝血因子突变与肺栓塞的关系

呼吸内科凝血因子突变与肺栓塞的关系

谢中志洪永青

谢中志洪永青

涟水县第三人民医院江苏淮安

【摘要】本文主要讲述在呼吸内科中凝血因子VLeiden（FLV）发生突变与出现易栓症症状的肺血栓之间的关系。在这些患者中，取得经过临床资料确诊的、均符合易栓症条件的、年龄在35—49岁之间的肺血栓男女患者组20例，另外选择性别、年龄对等的健康对照组20例。通过分析结果得出患者组和对照组在出现易栓症症状方面均不存在凝血因子VLeiden（FLV）突变。从而得出在我国，凝血因子VLeiden（FLV）突变发生的频率相对较低，它可能不是我国公民患肺血栓的因素。

【关键词】肺血栓；凝血因子VLeiden（FLV）；突变

【Abstract】ThisarticlefocusesonthecoagulationfactorVLeiden(FLV)mutationsandrelationshipthrombophiliasymptomsappearbetweenpulmonarythromboembolisminrespiratorymedicine.Inthesepatients,getdiagnosedthroughclinicaldataareconsistentwiththrombophiliaconditions,theagegroupof20casesofpulmonarythromboembolisminpatientsbetweentheagesof35-49menandwomen,inadditiontosexselection,20casesofageonthehealthycontrolgroup,etc..ByanalyzingtheresultsobtainedinpatientsandcontrolgroupsdonotexistintheeventoffactorVLeidenthrombophiliasymptoms(FLV)mutation.Toarriveinourcountry,coagulationfactorVLeiden(FLV)isrelativelylowmutationfrequencyofoccurrence,itmaynotbeourcitizenssufferingfrompulmonarythromboembolismfactors.

【Keywords】pulmonarythromboembolism;coagulationfactorVLeiden（FLV）;mutation

易栓症症状肺栓塞是有多种病症综合作用导致的临床病理，也有部分人属于先天性肺栓塞患者，这些患者若是在50岁之前发生肺栓塞事件或具有易栓症倾向，就有发生原发性危险因素的可能。在这一因素中，以活化蛋白C抵抗(APC-R)现象最为常见，并且90%以上的APC-R是由于凝血因子VLeiden(FVL)发生基因突变造成，FVL基因突变的实质是在凝血因子中V基因上第1691位点的鸟嘌呤(G)在没有任何征兆的前提下突变成腺嘌呤(A)。

1.对象与方法

1.1研究对象

在某医院选择20例患有肺栓塞的患者，其中男性患者12例，女性患者8例，年龄一般在35至49岁之间，平均年龄40岁。这些患者来自我国北方地区且是常住居民，且属于同一民族。在这一人群当中有3例患者病情反复无常，有2例患者患有肺栓塞家族病史，有4例患者被诊断为大面积肺栓塞。这些患者均未受到外界例如激烈运动、口服避孕药或者近期创伤等因素的干扰。并选择性别、年龄、籍贯等均具有可比性的健康者20名作为对照组。

1.2实验方法

患者组和对照组每人用EDTA管取外周静脉血2ml,按DNA提取试剂盒说明提取基因组DNA，采用PCR技术扩增凝血因子相关片段进行效果试验。其中PCR技术的引物为5'—TGCCCAGTGCITAACAAGACCA—3’(正义)和5'—TGTTATCACACTGGTGCTAA—3'(反义)。5’端和3’端可注入引物剂量。经过试验后，在琼脂糖凝胶中进行恒压电泳，透过紫外线观看DNAPCR条带的变化，再利用双脱氧末端终止法进行排列测序。

1.3统计学处理

在实验过程中，采用SPSS13.0软件包进行研究，并采用X2检验，若P值小于0.05，则说明凝血因子VLeiden（FLV）发生突变的可能性较大。

2.结果

2.1PCR扩增结果

在理想中的PCR目标产物要求实物有1691突变位点，经过测量其在DNA片段大约267bp处。而得到的DNAPCR条带上显示PCR产物在200bp至300bp之间，且和300bp更加接近。利用取舍法进行估计大约与PCR目标产物所标出的测量点十分接近，在整个过程中，无杂质干扰，表明PCR扩增相当成功。

2.2测定结果

在受检者体内，检验VcDNA的部分碱基排序方式，并把样品的测序结果与受检者体内的VcDNA进行对照，结果发现碱基排序方式与VcDNA中因子高度一致，故可信度较高。而受检者体内凝血因子中V基因上第1691位点的鸟嘌呤(G)并没有突变为腺嘌呤(A)。

2.3凝血因子V基因1691G及1691A基因频率

分组例数1691G/1691G1691A/1691G或1691A1691A

基因频率

实验组202000

对照组202000

凝血因子V在人体内是不可或缺的，在凝血反应中起辅助作用，以非活性形式存在。并与活化蛋白抵抗C(APC)同时共存，二者处于平衡状态。凝血因子V具有保守性，一旦发生基因突变，后果较为严重，这也成为人类活动中最大的威胁。FVL基因突变的实质是在凝血因子中V基因上第1691位点的鸟嘌呤(G)在没有任何征兆的前提下突变成腺嘌呤(A)，也就是说V蛋白第506位精氨酸被谷氨酞胺取代。引起活化蛋白抵抗C(APC)产生变异，抵抗能力降低，血液凝聚性增强，从而引起静脉血栓。

人们都一直致力于常发病的研究，而忽视了罕见病，比如肺栓塞。以20名肺栓塞患者作为研究对象，由于实验对象较小，也都属于易栓症群体。在50岁之前发生肺栓塞事件或具有易栓症倾向，也有具有家族史的肺栓塞阳性患者，遗传因素都必须考虑在内。

经过国内专业人士及国外学者的研究得出相关结论推测：（1）在种族分布中FVL基因存在很大的差异，在亚、非、大洋洲等地极为少见。在日本，有报道称对22例肺栓塞患者检验分析，具有APC-R的患者共有4例，但是没有发现FVL突变；香港、澳门、台湾也没有FVL突变的相关报道。同时对50例患者和50位正常人进行研究，发现患者中1691A基因发生率为0.0566，而正常人仅为0.0083，因此认为FVL突变不是我国患者发生的危险因素。（2）由于我国发生FVL突变的患者较少，不能得到明确的结论是否与肺栓塞的形成有关，因此我国在研究关于肺栓塞病症是否与FVL发生突变方面问题重重，有待进一步探讨。

参考文献

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