多糖定量方法研究的进展

多糖定量方法研究的进展

邢玉峰

邢玉峰（辽宁省铁岭市银州区医院112000）

【中图分类号】R914【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）34-0088-02

多糖是由多个单糖基以糖苷键连接而成的高聚物，广泛存在于动物细胞膜和植物微生物的细胞壁中，是构成生命的三大基本物质之一。过去多糖类在物体内主要作为能量资源或结构材料，而对多糖的研究开始于20世纪60年代，近20年来，开始逐渐发现多糖具有许多药理作用，主要具有增强免疫、抗肿瘤、降血压、降血糖、抗衰老、防止动脉粥样硬化等作用。能够治疗一些免疫系统受到严重损伤的疾病。在中药方面，到目前为止已有300多种多糖类化合物从天然产物中提取出来，还有发现100多种中药中多糖具有免疫促进作用。

近些年来，许多学者对多糖含量测定进行了研究，现就多糖定量方法状况概述如下，以便为多糖的更为深入地研究奠定基础。

1、苯酚—硫酸法

1.1基本原理：苯酚—硫酸试剂可与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸（或甲苯衍生物）起颜色反应，己糖在490nm处（戊糖及糖醛酸在480nm）有最大吸收，吸收值与糖含量呈线性关系。该方法优点是操作简单，快速，灵敏，对每种糖仅需要制作一条标准曲线，颜色持久。缺点是苯酚容易被氧化，临用前需对试剂进行纯化处理，否则影响测定结果的准确度。

1.2研究进展：仅引以下几篇代表性文章。甘璐等人[2]测定了不同品种枸杞药材中枸杞多糖4个级分的含量。结果表明，不同品种枸杞药材的相应级分的含量差异较大；王卫国等人[1]通过测定香菇多糖的含量，确定了多糖最佳提取工艺和最佳原料；张进东等人[3]测定了当归多糖提取物中多糖的含量，并为制成冲剂提供定量依据；王宇环[1]等人测定了扶正抑瘤颗粒中有效成分多糖的含量，为该制剂的质量控制提供了定量指标；朱英等人[4]测定了金蝉花中多糖的含最，为金蝉花药材的质量控制提供了依据；石娟等人[5]用该法测定了中华灵芝宝中多糖的含量；靳风云[6]等人测定了生当归及不同方法炮制当归中多糖的含量；结果表明，因酒炒后糖类有效成分的溶出增加，使多糖的含量高于生当归，其它方式炮制的当归中多糖含量均有不同程度的降低，可能是高温使部分糖类成分炭化损失所致；张靖贤等人测定了龙眼参中多糖的含量，为药理作用以及其它方面的深入研究提供了依据；曾明等人测定了不同来源葛根及同属植物根中多糖的含量，为葛根的质量评价和资源利用奠定了基础。

2、蒽酮—硫酸法

2.1基本原理：糖类遇浓硫酸脱水生成糠醛式衍生物，可与蒽酮试剂缩合产生颜色物质，反应后溶液呈蓝绿色，于620nm处有最大吸收，显色与多糖含量呈线性关系，该法也是主要应用的多糖定量方法之一。缺点是蒽酮试剂不稳定，溶液需临用前配制，相比之下，本法优于苯酚硫—酸法。

2.2周晶等人[7]对不同生长期的马齿苋多糖进行了含量测定，认为马齿苋中有效成分多糖的含量与生长期有关；赵骏等人[8]测定了桑叶多糖中多糖的含量；石俊英等人[9]测定了不同产地加工及不同储藏期的19种北沙参样品以及北沙参栓皮中多糖的含量。结果表明，不同来源北沙参中多糖含量的差异不大，但北沙参栓皮中多糖分布较多，提示在北沙参的产地加工中省去去皮的加工过程；李遐方等人[10]测定了黄精根茎及须根中多糖的含量并进行了比较研究。

3、HPLC法

陈晓梅等人[11]提取和纯化了灵芝子实体、菌丝体和发酵液中的多糖，并用HPLC法和凯氏定氮法对多糖含量、单糖组成及糖蛋白含量进行了测定和比较；商澎等人[12]用HPLC法和苯酚一硫酸法，建立了测定多糖重均相对分子质量和电荷特性的分析方法，并对当归多糖的4个组分进行测定。郭顺星等人[13]用HPLC法测定了猪苓菌核与蜜环菌共生过程中不同部位糖类成分的含量，明确了蜜环菌对猪苓菌核糖类成分的含量有显著的升高作用。

4、HPCE法

丁侃等人[14]对HPCE法近20年在多糖分离和定量分析中的应用进行了综述。

5、结语

目前，对多糖定量方法的研究不断的加快令人惊叹，使得多糖的含量测定越来越精确，这就为多糖的研究奠定的基础，随着科学技术的发展，越来越多的多糖将被发现，并且证明它们的生物活性机理和功能，经过深入的研究，多糖的生物活性机理，功效因子会更加明确，

它的应用领域也更加多了，这样多糖就能更好的为人类的健康服务。

参考文献

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[2]甘璐，张声华.不同品种枸杞多糖四个级分的含量测定[J].中药材，2001，24(2)：107—108．

[3]张进东，尹端端，罗国庆．当归多糖的提取及冲剂的制备[J]．中国医院药学杂志，1998，18(5)：220—221．

[4]朱英，宋捷民.忻家础分光光度法测定金蝉花中多糖的含量[J]．中国现代应用药学杂志，2001，18(6)：441—442．

[5]石娟，王利，王云霞.中华灵芝宝中多糖的含量测定[J]．中成药，2002，24(5)：388—389.

[6]靳风云，田源红，杨文洵．炮制对当归多糖含量的影响[J].中国中药杂志，2000，25(8)：474—475.

[7]周晶，刘景文，符敬伟等．马齿苋中多糖的提取与含量测定[J]．中草药，2001，32(2)：124—125.

[8]赵骏，钟蓉，王洪章等．桑叶多糖提取工艺优选[J].中草药，2000，31(5)：347—348．

[9]石俊英，李保国，牟彩萍．山东地产药材北沙参多糖含量测定[J].山东中医药大学学报，2002，26(2)：139—142．

[10]李遐方，费建红，王曙东．黄精根茎及须根中多糖含量的比较[J]．中成药，2002，24(5)：394—396.

[11]陈晓梅，郭顺星，文强等.3种灵芝多糖的研究[J].中国药学杂志，2001，36(4)：237—239．

[12]商澎，梅其炳，曹之宪等.当归多糖组分的高效液相色谱分析[J]．中国药学杂志，2000，35(5)：332-335.

[13]郭顺星，曹文琴，王秋颖等.与蜜环菌共生过程中猪苓菌核不同部位糖类成分的含量研究[J]．中国药学杂志，2002，37(7)：493—495．

[14]丁侃.方积年多糖类药物的毛细管电泳分析方法及其应用[J]．色谱，1999，17(4)：346—350．