5-ALA-PDT治疗宫颈HPV病毒的疗效观察

5-ALA-PDT治疗宫颈HPV病毒的疗效观察

李丽王会民陈慧荣

（山西省晋中市第一人民医院皮肤科山西晋中030600）

【摘要】目的：观察5-ALA-PDT对宫颈HPV病毒感染的疗效。方法：（1）选择32例晋中市第一民医院皮肤科就诊的32例女性尖锐湿疣患者。其宫颈分泌物HPV病毒DNA检测均为阳性。（2）采用5-ALA-PDT对患者宫颈进行治疗，每周1次，连续3周。观察治疗前与治疗后3个月、6个月的宫颈HPV含量及分型变化。结果：治疗3个月HPV病毒含量高危下降幅度73.2%,低危下降幅度68.5%。其中13例患者宫颈HPVDNA出现转阴现象，其阴转率为40.6%（13/32），治疗6个月后HPV病毒含量高危下降幅度86.4%,低危下降幅度86.3%，又有15例患者由三个月时的阳性转化为阴性。故总的阴转率为87.5%(28/32)；6个月的转阴率明显高于3个月(χ2=4.51，P<0.05),且治疗后HPV的定量明显低于治疗前，前后比较差异具有统计学意义，（χ2=6.54，P<0.01)。结论：5-ALA-PDT可以有效清除女性患者宫颈上皮细胞中的HPV病毒，且安全、有效、无明显副作用。

【关键词】宫颈HPV病毒；5-ALA-PDT

【中图分类号】R776.1【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2017）31-0162-02

宫颈癌是指发生在妇女子宫阴道部和宫颈管的恶性肿瘤，是我国和其他发展中国家最常见的恶性肿瘤之一，目前其发病呈年轻化趋势，已经严重威胁到中青年女性的健康和生命。大量的流行病学调查表明人乳头瘤病毒（HPV）与宫颈癌高度相关,是宫颈癌发生的首要病因。5-ALA-PDT是目前国内治疗HPV病毒感染的一种新方法，已经取得满意效果，且方法成熟。

1.资料与方法

1.1临床资料

①选2014年3月至2016年8月晋中市第一人民医院皮肤性病科就诊的32例女性，年龄在18～65岁，平均年龄（34.3±1.2）岁。②外阴和/或肛周通过醋酸白实验或组织病理确诊为外阴和/或肛周尖锐湿疣，且感染时间大于1年。③宫颈分泌物HPV-DNA（6、11、16、18型）阳性。④术前阴道镜下宫颈多点活检，均为宫颈粘膜慢性炎症，⑤所有患者治疗前均签署知情同意书。

1.2方法

1.2.1颈分泌物HPV标本收集：治疗前、治疗后3个月、6个月3次取样。在阴道窥器下，用一次性无菌棉拭子在宫颈口处顺时针转动5圈，收集宫颈分泌物。将棉拭子置入无菌塑料试管，密闭送检。标本可立即用于测试，也可保存于-20℃待测，保存期为月。

1.2.2宫颈HPV检测方法：采用基因芯片技术检测HPV，选用人乳头瘤病毒（6、11型）、（16、18型）核酸检测试剂盒（PCR-荧光法）中山大学达安基因股份有限公司，达安DA-7600PCR仪。

1.2.3治疗方法：5-ALA-PDT首次治疗均在月经干净后3-7天，检查无急性生殖器炎症，治疗期间禁止性生活。操作在暗室进行。采用光敏剂为5-氨基酮戊酸散（ALA,上海复旦张江生物医药股份有限公司生产，批号为国药准字H20070027）。光动力激光治疗仪（武汉亚格光动力治疗仪器有限公司，型号：LED-IB型照射），输出波长（635.0±3.0）nm。采取截石位，将ALA按根据受损面积用温凝胶配制成20%浓度，用长棉球将配置好的药液均匀敷于宫颈管及宫颈口，用保鲜膜封闭药物3h。3h后去除保鲜膜并用棉球去除宫颈分泌物，进行照光治疗。辐照能量根据患者疼痛情况选择，一般能量输出为85～100J/cm2，时间为30min。每7日重复治疗一次，连续治疗3次为一疗程。在治疗过程中所有患者均出现的不同程度的疼痛、刺痒、灼热，绝大部分患者能耐受，2～3日左右症状全部消退，无需特殊处理。

1.3结果判定

临床捡验报告以低危型（6、11）＜500copy和（或）高危型（16、18）＜500copy判断为阴性，低危型（6、11）＞500copy和（或）高危型（16、18）＞500为阳性。Copy值越大，表明标本中HPV-DNA含量越高。

1.4统计学分析

采用SPSS13.0统计学软件进行分析，计数资料采用率（%）表示，计量资料采用（x-±s）表示，组间比较采用χ2和t检验，P＜0.05有差异有统计学意义。

2.结果

2.1治疗前与治疗后3个月、6个月宫颈宫颈HPV-DNA分型的变化

①治疗前高危、低危均阳性14例；高危阳性10例；低危阳性8例；高危低危均阴性0例。②治疗3个月复诊检测时高危、低危均阳性7例；高危阳性6例；低危阳性6例；高危、低危均阴性13例；其中13例者宫颈HPVDNA出现转阴现象，其阴转率为40.6%（13/32）。③治疗6个月后复诊检测高危、低危均阳性0例；高危阳性2例；低危均阳性2例；高危、低危均阴性28例，有15例患者由三个月时的阳性转化为阴性。故总的阴转率为87.5%(28/32)；6个月的转阴率明显高于3个月（χ2=4.51，P<0.05）。

2.2治疗前与治疗后3个月、6个月宫颈宫颈HPV-DNA含量的变化

治疗后3个月HPV病毒含量高危下降幅度73.2%,低危下降幅度68.5%，治疗6个月后HPV病毒含量高危下降幅度86.4%,低危下降幅度86.3%，前后比较差异具有统计学意义，（χ2=6.54，P<0.01)。见表1。

3.讨论

宫颈癌是指发生在妇女子宫部位的恶性肿瘤，我国每年约有15万新发宫颈癌病例。占世界总数的1/5，甘肃和山西省为高发地区可达36.0/10万。目前子宫颈癌发病呈年轻化趋势，三四十岁的宫颈癌患者越来越多。目前宫颈癌的发病机理尚不清楚，几乎所有的流行病学调查和实验室研究数据均表明,HPV与宫颈癌高度相关,是宫颈癌发生的首要病因。

人乳头瘤病毒（HPV）是一种封闭的双链环状DNA病毒，约8×103kb,其DNA有8个开放阅读框架。E1、E2、E4、E5、E6、E7，L1、L2。最新的研究证明E1、E2与DNA复制有关。在上皮细胞中，E5可引起感染初期免疫逃逸[1，2]。E6、E7为癌基因蛋白类，大量表达时会抑制了抑癌基因p53和pRb的正常表达。从而抑制细胞凋亡的进行，使宫颈上皮细胞增殖加快，成为CIN向宫颈癌转化的重要因素。此外HPV病毒的负荷量与子宫颈病变程度存在明显计量关系。李淑敏等[3]的研究显示子宫颈癌的HPV的负荷量显著高于子宫颈癌前病变和慢性宫颈炎。说明高水平的HPV的负荷量可促使宫颈从慢性宫炎症状态逐步发展到癌前病变，进而演变为子宫颈癌。

5-ALA-PDT是近年兴起的一种治疗HPV病毒的新方法，可通过体外给予ALA参与血红素合成，形成对内生ALA的反馈调节。当病毒感染的增殖细胞选择性吸收后，可引起病毒感染细胞的内原卟啉Ⅸ积聚，经光照射后产生活性单线态氧，通过氧依赖性的细胞毒性反应和病毒核酸链断裂或碱基位点消失，以凋亡和坏死两种途径选择性杀伤细胞，阻止病毒复制。同时5-ALA-PDT还可诱导IL-1β、IL-2、TNF-α、G-CSF产生。增强全身和局部免疫反应[4]。可将临床、亚临床及潜伏期感染的HPV病毒一并清除。由于ALA转化为原卟啉Ix主要定位于宫颈黏膜表皮全层，真皮层几乎没有，使得5-ALA-PDT治疗宫颈HPV感染有效且安全。根据这一特性，对我科2014.03-2016.08的32例尖锐湿疣患者宫颈HPV病毒感染阳性的患者，进行5-ALA-PDT治疗，并对治疗后3个月、6个月进行观察比较结果发现，患者宫颈HR-HPVDNA含量明显降低，出现转阴现象，治疗后3个月HPV病毒含量高危下降幅度73.2%,低危下降幅度68.5%。其阴转率为40.6%（13/32），治疗后6个月HPV病毒含量高危下降幅度86.4%,低危下降幅度86.3%，阴转率为87.5%（28/32）；6个月的HPV的含量及转阴率明显高于3个月，前后比较差异（P<0.05）具有统计学意义。由此可见时间越长，阴转率越高，表明5-ALA-PDT治疗的后期效应越明显。综上所述，5-ALA-PDT可以有效清除宫颈上皮细胞中的HPV病毒，减少女性尖锐湿疣患者宫颈癌的发生，起到治未病的效果。

【参考文献】

[1]VenutiA,PaoliniF,NasirL,etal,PapillomavirsE5:thesmallestoncoproteinwithmanyfunctions[J].MolCancer,2012,10(1):140.

[2]zurHausenH,Papillomavirusesandcancer:frombasicstudiestoclinicalapplication[J].NatRevCancer,2002,2(5):342-350.

[3]李淑敏，章文华，吴令英,等.人乳头瘤病毒负荷量与子宫颈癌及其癌前病变关系的初步研究[J].中华妇产科杂志,2004,39（6）:400-402。

[4]缪飞，王秀丽，王宏伟，张玲琳，过明霞，张海卿等.5-氨基酮戊酸光动力治疗宫颈高危型HPV感染[J].中国皮肤性病学杂志2012,26(1):049-052。

基金项目：晋中市自然科学基金(S1402).