RIA法β-HCG定量的非线性样本测定

RIA法β-HCG定量的非线性样本测定

王立明

王立明（广西柳州钢铁（集团）公司医院广西柳州545001）

【中图分类号】R446.1【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2011）8-0058-02

【摘要】线性是反映实验方法性能的重要指标，也是保证临床检测结果准确性的重要砝码。随着检验医学的飞速发展、大量的分析和系统方法已用于线性评价，检测结果的偏差与线性密切相关。用RIA法定量β-HCG在与临床密切结合上存在较大差异，分析方法与待测物浓度常呈非线性关系，出现非线性偏差，导致准确性不高和实用性不强，测定值与真值有较大的偏倚。通过确立实验检测方案回归线性检测可报告范围，达到回归检测结果的可靠性、准确性。

【关键词】RIA可报告范围线性评价

线性范围（Linerityrange）是分析方法的重要技术指标，它能判断某一分析方法（仪器或试剂）测得浓度或活性值与设定的浓度或活性值之间的比例关系范围，如分析方法与待测物浓度与吸光度不成线性关系则出现线性误差，不符合朗伯—比尔定律，称化学偏离。

1RIA（放射免疫）法β-HCG（β-绒毛膜促性腺激素）试剂盒通过线性评估和选择其线性检测最大浓度为160mIU/ml，正常人群<8mIU/ml，按Westgard提出的可报告范围评价方案以及方法有效线性试验，以吸光度浓度作曲线图进行线性分析，选择尽可能多的点过直线来建立临床可报告范围。按RIA方法检测，符合线性检测范围，可得出可靠的检测结果。

2非线性关系指分析方法与待测物浓度呈非线性关系或浓度超过检测系统设定的最低或最高范围，而无法确定其真值，并出现与临床密切结合上的较大差异。β-HCG检测：正常人群<8mIU/ml、正常妊娠随着孕周的增加浓度范围5-220000mIU/ml[1]、宫外孕可达到500mIU/ml、葡萄胎高达4270000mIU/ml[2]。可见，试剂盒的线性方案浓度选择只适合正常人群与低浓度偏高人群检测，而呈非线性关系的样本必须确定其检测方案，以符合线性检测关系。

3检测样本浓度的预估计

3.1定性检测用金标早孕试纸做定性试验，可以大致估计受检样本的浓度范围，即通过阴性或阳性强弱程度判断；强阳性并可通过对受检样本进行梯度浓度定性估计。

3.2半定量检测采用β-HCG金标专用检测仪，半定量检测。

3.3根据临床资料估计。临床疾病诊断、孕周等。

4非线性关系样本检测方案的确立。通过对检测样本浓度的预估计，可以确立如下检测方案：（1）阴性和弱阳性直接按原倍血清量检测；（2）强阳性结果按梯度倍比稀释，取连续三管结果范围在0-160mIU/ml线性范围内，且浓度呈梯度降低的最低稀释倍数结果×稀释倍数报告结果。（3）根据半定量检测结果范围估计，做3管不同倍数的稀释，使其浓度落在线性范围内，且浓度呈梯度降低，以最低稀释倍数结果×稀释倍数报告结果。

5β-HCGRIA检测属窄带试验，受抗体浓度限制，在实验中，当样本浓度超线性时，其原倍血清检测浓度，无法高浓度表达，与实际值偏差过大，差异可达100倍以上，通过梯度稀释试验剔除线性外数据，在线性可取值范围求取最符合临床的值。在线性内的取值应根据临床检验学的取值原则，取稀释倍数最小以减少稀释误差。

6如按梯度倍比稀释，需要做若干份样本检测，并较易取得确定值，缺点是工作繁琐，浪费试剂；如检测样本份样过少，又可能达不到预期目的。如果是根据半定量检测结果范围估计，做3管不同倍数的稀释，要求3份样本中最低稀释倍数的测定值浓度接近线性上限，且3份样本测定值浓度接近为理想。

7β-HCG是胎盘类激素，在受精着床后即可高水平表现，除正常妊娠外、葡萄胎、绒癌和生殖细胞瘤均可分泌大量HCG。HCG定量是临床常用于对正常妊娠和宫外孕、葡萄胎、绒癌和生殖细胞瘤的诊断和疗效观察指标，目前定量的主要方法有：TrFIA法、CLIA法、ECLIA法和RIA法[3]。无论上述哪种方法都存在非线性现象，均须确立样本实验检测方案以建立临床可报告范围，确保检测结果的准确性。

参考文献

[1]李继俊主编.妇产科内分泌治疗学.第1版.北京:人民军医出版社,2005:134.

[2]陈道雄综述.胎盘类激素和甲状腺激素相关性.医学综述,2004,10(11):681.

[3]叶应妩，王毓三，申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第3版.南京:东南大学出版社,2006,519-521.