不同营养条件对大肠埃希菌生物膜形成的影响

不同营养条件对大肠埃希菌生物膜形成的影响

张顺刘江鸿

（新疆生产建设兵团第二师焉耆医院新疆焉耆841100）

【摘要】目的：分析不同营养条件对大肠埃希菌生物膜形成的影响。方法：收集3株大肠埃希菌（25922），均对其实施血平板培养。在分别在复温30min、1h以及6h的营养条件下对其生长情况，尤其是生物膜形成情况进行观察和分析。结果：在复温30min后，大肠埃希菌菌落有所生长，在复温1h后的菌落数量最多，在复温6h后菌落数量有所下降。并且在使用瑞氏吉姆萨染色法检查后显示，在复温1h后的生物膜厚度明显高于复温30min以及复温6h，差异均显著（P＜0.05）。结论：在复温1h的营养条件下，更有利于大肠埃希菌生物膜形成。

【关键词】不同营养条件；大肠埃希菌；生物膜形成；影响

【中图分类号】R574【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2018）17-0180-02

大肠埃希菌是临床较常见的致病菌，诸多感染类疾病和大肠埃希菌均有较大关系[1]。因而对大肠埃希菌生物膜形成情况进行分析有着更加重要的意义。本研究分析了不同营养条件对大肠埃希菌生物膜形成的影响，具体报道如下。

1.对象和方法

1.1对象

大肠埃希菌选择为ATCC25922冻干菌株，生产厂家南京便诊生物科技公司。试剂选择为梅里埃诊断产品（上海）有限公司生产的革兰氏阴性细菌药敏卡片，珠海贝索生物技术有限公司生产的染液。培养基选择为郑州安图生产的血平板。比色仪器选择迈瑞2000生化仪。抗生素选择为美国Invivogen公司生产的zeocin，紫色结晶液生产厂家为北京路桥公司。

1.2方法

分别对不同的大肠埃希菌进行30min、1h以及6h的复温处理，其余培养方法相同。在培养24h后，需分析其生物膜的形成情况。在生物膜半定量检测中，本研究中使用免疫比浊法进行研究，在实际的检测过程中须严格按照迈瑞2000生化仪说明书中的步骤进行，使用生理盐水对有利细菌进行清洗处理，并实施瑞氏吉姆萨染色，在实施1min的染色后将吸出，使用生理盐水对其进行彻底冲洗，并放置1h，当完全干燥后加入二甲基亚砜200μl，检测A550值，结果取平均值。将只有培养基的孔设置为对照孔，若A550值大于对照孔，则表示为阳性。同时需使用共聚焦显微镜对其生物膜厚度进行检测和对比。

1.3观察指标

本研究需对三种营养条件下大肠埃希菌的菌落生长情况以及生物膜最大平均厚度进行测量和分析。

1.4统计学分析

本研究使用SPSS20.0软件对数据进行分析。

2.结果

2.1三种营养条件下的大肠埃希菌生物膜最大平均厚度

通过本研究显示，在复温1h后的生物膜厚度明显高于复温30min以及复温6h，如表所示。

2.2三种营养条件下大肠埃希菌生长菌落影响

在复温30min后，大肠埃希菌已经有一定生长，生物膜基本形成。但需要注意的是，之间仍有着较大间隙。这说明大肠埃希菌的生物膜并不厚。在复温1h后，大肠埃希菌菌落得到进一步生长。对其进行观察后可显示，菌落之间的间隙有明显缩小。这说明大肠埃希菌的生物膜也有明显增厚。在复温6h后，大肠埃希菌的生物膜变薄，其菌落之间的间隙相比复温1h后有明显增大。

3讨论

大肠埃希菌是临床上较常见的一类致病菌，也是尿路感染的最常见致病因素。有研究显示，在尿路感染等疾病发生时，和大肠埃希菌生物膜形成有着较大关系。而由于生物膜的存在，也会导致抗菌药物不易于渗透，因此需要对大肠埃希菌生物膜形成的情况进行着重分析[2]。而为了起到较好的研究效果，如何让大肠埃希菌形成符合要求的生物膜是前提条件[3]。

本研究也显示，在复温1h后的生物膜厚度明显高于复温30min以及复温6h。同时在对大肠埃希菌的菌落生长情况进行分析后也显示，复温1h后的大肠埃希菌菌落数量也明显高于复温30min和复温6h。这一结果也可说明，在复温1h后的营养状态下最有利于大肠埃希菌生物膜生长，在实际的实验过程中也在复温1h后进行研究。

综上所述，不同营养条件会对大肠埃希菌生物膜形成造成较大影响。尤其是在复温1h后，大肠埃希菌的生物膜形成情况最佳。

【参考文献】

[1]冯伟.hns基因对大肠埃希菌生物膜形成能力的影响[J].第三军医大学学报,2016,38(2):107-111.

[2]孙凤军.亚抑菌浓度环丙沙星对泌尿系统感染大肠埃希菌生物膜形成的影响[J].中国抗生素杂志,2016,41(3):237-240.

[3]孙艺璇.不同亚抑菌浓度头孢他啶抑制大肠埃希菌生物膜形成的量效分析[J].第三军医大学学报,2016,38(3):276-279.