脉动真空灭菌柜验证及灭菌效果监测

脉动真空灭菌柜验证及灭菌效果监测

李侯，唐志坤

云南白药集团股份有限公司，云南昆明 650500

摘要：进入无菌区的物品均应无菌化，目前行业内，多采用湿热灭菌法（脉动真空灭菌柜）对无菌区洁净服、工器具、器皿、灌注器、清洁工具等进行灭菌。湿热灭菌法是指物品在灭菌器内利用高压蒸汽杀灭微生物，具有穿透能力强、传导快、无残留、灭菌能力强等优点。本文主要介绍脉动真空灭菌柜的验证方法及灭菌效果监测。

关键词：脉动真空灭菌柜，湿热灭菌，灭菌效果；

最终灭菌物品中的微生物存活概率（即无菌保证水平，SAL）不得高于 ，根据物品的微生物污染水平和耐受湿热的能力不同，湿热灭菌程序通常分为过度杀灭法和残存概率 ，需灭菌物品（B级区洁净服、工器具、灌注器、清洁工具）热稳定性较好，故采用过度杀灭法进行灭菌（灭菌程序：121℃、30min），脉动真空灭菌柜在投入使用前或验证到期时，必须进行设备验证（对各灭菌物品进行连续3锅次的空载热分布、负载热分布、热穿透测试），同步采用生物指示剂进行挑战测试。

1 目的

保证脉动真空灭菌柜温度分布均匀性及灭菌效果符合法规要求。

1.1温度分布均匀性验证

1.1.1灭菌温度允许范围：设定温度+0℃~+3℃

1.1.2温度极差：灭菌阶段同一时刻温度最大值与最小值的差值≤2.0℃；

1.2灭菌效果监测

1.2.1累积杀死率F0＞12

1.2.2生物指示剂挑战测试合格；

2 材料

2.1 生物指示剂：自含式生物指示剂，生产企业：TERRAGENE，含菌量＞ CFU。2.2 仪器仪表：恒温培养箱经过验证、相关仪器仪表经过校验，符合使用要求。

3 温度分布均匀性验证

3.1 验证温度探头、指示剂布点数量、位置

（1）至少选择10个点（较大的灭菌器可以选择15~20个点）；

（2）几何中心和角落应有代表性点，冷凝水排水口（低温点）；

（3）热穿透测试时，应放置在最难穿透点的灭菌物品中，多种灭菌物品混装时，放置点应具有代表性；

3.2 灭菌物品装载确

（1）灭菌物品类型：尽可能选择同一类型物品进行灭菌，如：织物（洁净服、毛巾、拖布）、器械（灌注器、清洁工具）等；

（2）装载数量：根据灭菌柜的大小，灭菌物品的形状、种类、生产需求等合理确定灭菌物品的数量，温度验证时需要对最大装载量进行验证；

（3）装载方式：织物采用悬挂式，器械采用平放式、倒置式，各物品之间应留有一定间隙，倒置式便于排出冷凝水；

3.3 测试方法

使用无线温度探头进行温度热分布测试。按温度探头布点数量、位置将温度探头放置于灭菌柜内的相应位置，放置过程中，温度探头不能与灭菌柜腔内金属表面接触，并避免碰撞。完成连续3次空载热分布、负载热分布、热穿透测试（负载、热穿透测试可同时进行，部分温度探头放置于灭菌柜腔室内做负载热分布测试，部分探头放置于灭菌物品内做热穿透测试）。

3.4 测试数据统计

表1 温度分布均匀性测试结果记录表单

4 生物指示剂挑战测试

4.1 测试方法：随负载、热穿透测试过程同步进行，每次放1支阳性对照样品。

4.2 生物指示剂挑战测试结果均合格：灭菌完毕后放于55~62℃培养箱内培养24后观察，指示管不变色（呈紫色），表示灭菌合格；指示管变黄色，表示灭菌不合格。

5 结论

5.1 根据实际灭菌工艺和灭菌物品的受热稳定性不同，可以选择过度杀灭法和残存概率法两种湿热灭菌程

。

5.2 脉动真空灭菌柜在投入使用前或验证到期（验证有效期为1年，设备发生重大变更、改造时），必须进行设备验证，验证合格后方能正常使用。

5.3 温度分布均匀性可接受标准：①灭菌温度允许范围：设定温度+0℃~3℃；

②温度极差：灭菌阶段同一时刻温度最大值与最小值的差值≤2.0℃；当灭菌柜在验证周期内，发生验证状态偏移、改变时，如：设备的控制温度超过允许范围时，应该采取相应的控制措施，并再次进行验证合格后方能使用。

5.4 灭菌效果监测可以采用物理、化学、生物指示剂方法进行监测，判定脉动真空灭菌柜灭菌效果的方 有：①累积杀死率F0＞12；②生物指示剂挑战测试合格（含菌量＞ CFU均可）。

5.5 验证温度探头及生物指示剂的数量、布点位置选择方 ：①通过空载热分布测试确定灭菌柜腔室内不同位置的温差状况，确定可能存在的冷点，对该位置应增加温度探头、生物指示剂布点数量；②热穿透测试时，温度探头、生物指示剂应放置在最难穿透点的灭菌物品中。

参考文献

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