三七中拟除虫菊酯类农药残留量分析方法研究

三七中拟除虫菊酯类农药残留量分析方法研究

高泽清

云南白药集团股份有限公司，云南 昆明 650500

摘要：目的：研究三七中拟除虫菊酯类农药残留量分析方法。方法 样品经装有净化材料的分散固相萃取净化管中净化，再经全自动凝胶净化浓缩仪净化浓缩处理；采用不分流进样，用GC-MS检测器同时定性、定量测定。结果 样品3水平加标的3种拟除虫菊酯农药回收率均在75.75%-104.09%，相对标准偏差在1.66%-4.67%，符合农药残留分析的要求。结论 本法净化处理效果好，重现性好，可用于三七中拟除虫菊酯类农药残留量的检测。

关键词：三七；GC-MS；GPC/EVA；拟除虫菊酯类农药残留量

拟除虫菊酯类农药是在天然除虫菊酯农药的化学结构基础上研究发展起来的仿生农药，具有杀虫广谱，作用快捷等特点，在中药材和农作物种植中广泛使用。拟除虫菊酯类农药中毒机理主要是通过影响神经轴突的传导而导致肌肉痉挛等。所以拟除虫菊酯类农药检测非常必要，目前全世界菊酯类农药在杀虫剂市场中约占20%，使用面积占整个杀虫剂面积的25%，已经商品化的品种有50多个。

1.仪器与试药

1.1仪器:岛津GC-2010气相色谱仪（配有GCMS-QP2010质谱仪、AOC-5000岛津自动进样器、柱温箱等）；色谱柱：安捷伦DB-5MS弹性石英毛细管柱（30m×0.25mm×0.25µm），全自动凝胶净化浓缩仪等。

1.2试药：氯氰菊酯lot:3118,Dr.；氰戊菊酯lot:00501, Dr.；溴氰菊酯lot:479-156B,CHEM SERVICE；乙酸乙酯：色谱级，Merck；环己烷：色谱级，Fisher；石墨化炭:lot:1/1182/G；DIKMA；十八烷基硅烷键合硅胶； Lot:13L0301；DIKMA；Ｎ－丙基乙二胺（PSA）：lot:14A0702；DIKMA；无水硫酸镁：分析纯；硅胶：薄层层析用；乙腈：色谱纯，Merck；甲苯：色谱纯， J.T.Baker；冰乙酸：分析纯。

2.方法与结果

2.1色谱条件与系统适应性试验：载气为高纯氦气；柱温：程序升温，起始温度100ºC，保持1分钟，以20ºC/min的升温速率升至150ºC，保持0分钟，以3ºC/min的升温速率升至200ºC，保持0分钟,以8ºC/min的升温速率升至280ºC，保持15分钟。进样口温度250ºC；离子源温度230ºC,不分流进样。精密取氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯混合对照品溶液1μl注入气相色谱仪 ，系统适应性试验良好结果图1：

图1 三种对照品各自出峰顺序图 图2 阴性样品溶液TIC图

2.2供试品溶液制备：取供试品细粉1.5g,精密称定，置50ml离心管中，精密加入乙酸乙酯-环己烷（1：1）15ml，用旋涡混匀器混匀，置于分液漏斗振荡器上振荡5min，离心5min（4000转/min），取上清液10ml，置已预先装有净化材料的分散固相萃取净化管[石墨化炭90mg，十八烷基硅烷键合硅胶300mg， PSA300mg，无水硫酸镁900mg，硅胶300mg]中，用旋涡混匀器混匀，置于分液漏斗振荡器上振荡5min，离心5min（4000转/min），取上清液用0.45μm滤头过滤，精密取5ml上全自动凝胶净化浓缩仪（色谱柱500mm×25mm，内装BIO-Beads S-X3填料；以乙酸乙酯-环己烷（1：1）混合溶液为流动性；流速为每分钟5.0ml）净化处理，收集18～36分钟的洗脱液，于50^oC减压浓缩至2ml，即得。此方法相对回收率好，除去大部分大分子基质对拟除虫菊酯类峰干扰小。此方法就被确定为供试品的制备方法。

2.3对照品溶液的制备：精密称取氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯对照品适量，用乙酸乙酯-环己烷（1：1）制成每1ml含氯氰菊酯10µg、氰戊菊酯2µg和溴氰菊酯10µg的混合溶液，即得。

2.4专属性试验：取不加对照品和供试品的空白溶液，照供试品溶液的制备方法制成阴性样品溶液，取对照品和空白溶液进行测定，结果在对照品峰相同的保留时间位置上无其他干扰峰出现，说明专属性良好。结果见图1和图2

2.5精密度试验：取混合对照品溶液，重复进样6次，测定峰面积值并计算得氯氰菊酯RSD为3.41%、氰戊菊酯RSD为4.30%、溴氰菊酯RSD为3.87%，相对标准偏差均小于5.0%，说明仪器精密度好。

2.6重复性试验：取6份供试品，按照2.2供试品制备方法，依法测定。分别计算出氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯的量，并求相对标准偏差分别为氯氰菊酯RSD为1.91%、氰戊菊酯RSD为6.91%、溴氰菊酯未检出，相对标准偏差均小于10.0%，说明本方法重复性好。

2.7

线性关系与线性范围：分别配制7个不同浓度梯度标准工作溶液，按上述色谱条件测定峰面积；以峰面积为纵坐标，以对照品浓度为横坐标，得线性回归方程：氯氰菊酯为y=289.83x-15930（R²=0.999）、氰戊菊酯为y=321.32x-1745.9（R²=0.999）、溴氰菊酯为y=171.22x-13719（R²=0.999），相关系数满足要求，说明氯氰菊酯在61.6ng/ml～3694.7ng/ml、氰戊菊酯、在9.6ng/ml～576.2ng/ml、溴氰菊酯在54.9ng/ml～3295.4ng/ml范围内线性关系良好。

2.8检测限和定量限：以噪音的3倍信噪比确定每种农药的检出限：氯氰菊酯为0.005mg/kg、氰戊菊酯为0.002mg/kg、溴氰菊酯为0.002mg/kg；以噪音的10倍信噪比确定定量限：氯氰菊酯为0.015mg/kg、氰戊菊酯为0.005mg/kg、溴氰菊酯为0.007mg/kg。

2.9准确度试验：取9份已知含量的供试品1.5g，精密称定，分成三组，每组精密加入混合对照品相当于含氰戊菊酯200ng/ml、300ng/ml和400

ng/ml，每个浓度制备3份，按2.2处理并进样1µL测定，并计算回收率分别为氯氰菊酯82.13 %，104.09 %，95.38 %， RSD分别为4.67%， 1.75%， 2.27%；氰戊菊酯75.75 %，98.34 %，95.10 %， RSD分别为1.94%， 2.50%， 1.66%；溴氰菊酯80.25%，98.04%，91.87%，RSD分别为3.32%， 2.00%， 1.97%回收率都在70%～120%范围内结果满意。

2.10稳定性试验：取同一个对照品溶液，精密取1µL，依法分别在0h、8h、16h、24h注入气相色谱仪测定，比较其峰面积值相对标准偏差。氯氰菊酯RSD为1.53%、氰戊菊酯RSD为1.37%、溴氰菊酯RSD为2.00%，相对标准偏差均小于5.0%，说明溶液稳定性好。

3结论：

3.1经过对10批样品进行检测，检测结果分别氯氰菊酯为0.226mg/kg～0.357mg/kg、氰戊菊酯为0.024mg/kg～0.056mg/kg、溴氰菊酯为未检出～0.370mg/kg，均小于5mg/kg,均符合标准规定。

3.2根据对三七中拟除虫菊酯类进行系统适用性试验、专属性试验、精密度试验、线性关系与线性范围考察、检测限、定量限、重复性试验、准确度试验（加样回收试验），各项试验测试结果均能满足要求，仪器性能稳定，质控结果满意。从以上数据可以看出用该方法检测三七中拟除虫菊酯类的含量，结果准确可靠，可以运用此方法进行质量控制。

参考文献

中国药典2015年版.一部和四部

高梦南, 王燕萍，唐红卫凝胶渗透色谱净化在土样有机氮测定中的应用) (环境科学与技术)2006,29(3):38

华纯拟除虫菊酯类农药的进展和剂型 (世界农药)2009:39