简介:目的探讨法舒地尔对于HK-2细胞氧化应激和内质网应激的影响。方法体外培养人肾近曲小管细胞,分为对照组、高糖组和法舒地尔组。对照组细胞采用正常浓度葡萄糖培养,高糖组采用高浓度葡萄糖培养,法舒地尔组细胞同时采用高糖和不同浓度法舒地尔处理。细胞活性和凋亡水平分别采用噻唑蓝(MTT)和DNA断端末端标记(TUNEL)试剂盒检测。采用活性氧(ROS)试剂盒,RealtimePCR和Westernblot检测ROS含量和基因表达水平。结果与对照组相比,高浓度葡萄糖可以引起HK-2细胞活力降低,凋亡率升高,而法舒地尔则可以促进细胞活力,降低凋亡率,呈现浓度梯度依赖性(P<0.05)。高浓度葡萄糖显著提升ROS含量,法舒地尔的浓度则与ROS的产量呈负相关(P<0.05)。高糖处理促进p47phox和Nox4表达水平升高,法舒地尔则能够逆转这一过程,且呈现浓度依赖性(P<0.05)。高糖组GRP78和Chop的表达水平均显著上升,而Bcl-2的表达水平显著下降(P<0.05)。法舒地尔能够抑制GRP78和Chop表达,并促进Bcl-2的表达水平,且有浓度依赖性(P<0.05)。结论法舒地尔可能通过参与调控细胞氧化应激和内质网应激发挥细胞保护作用。
简介:摘要目的探讨紫檀芪在草酸诱导人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)发生内质网应激和凋亡的作用。方法2019年1月至2020年1月,取HK-2细胞分为对照组(基础培养基培养)、草酸组(含4 mmol/L草酸的基础培养基培养)、紫檀芪干预组(含草酸4 mmol/L+紫檀芪5、10、20 μmol/L的混合培养基共同培养),3组细胞培养12 h后进行如下实验。CCK-8实验检测细胞活力,检测乳酸脱氢酶及抗氧化能力相关指标(还原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、丙二醛、过氧化氢酶、总抗氧能力);蛋白质印迹法检测细胞内ATF6、GRP78、DDIT3、caspase12和裂解的caspase3/9的蛋白表达情况。3组在进行下述实验时,紫檀芪干预组中仅用紫檀芪浓度10 μmol/L:检测线粒体膜电位、caspase3酶活性、细胞凋亡率、活性氧水平,实时荧光定量PCR检测细胞内ATF6、GRP78、DDIT3的mRNA表达情况。结果CCK-8实验和及乳酸脱氢酶检测结果显示,草酸组较对照组的细胞活力[(45.6±3.1)%与100.0%,P<0.001]明显下降,乳酸脱氢酶[(330.2±11.1)U/L与(92.6±6.7)U/L,P<0.001]明显上升;紫檀芪干预组(5、10、20 μmol/L)的细胞活力[(57.2±1.7)%、(67.2±3.4)%、(78.9±1.8)%]较草酸组均明显上升(均P<0.05),乳酸脱氢酶[(288.1±4.3)U/L、(260.9±5.5)U/L、(202.6±10.2)U/L]较草酸组均明显下降(均P<0.05)。丙二醛、还原型谷胱甘肽、总超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、总抗氧能力五项生化指标检测结果显示的细胞损伤状态与CCK-8和乳酸脱氢酶实验结果一致。活性氧检测结果显示,草酸组较对照组的活性氧水平(76.3±4.9与6.2±1.7,P<0.01)明显上升;紫檀芪干预组(10 μmol/L)的活性氧水平(39.5±5.4)较草酸组明显下降(P<0.01),流式细胞术和caspase3酶活性检测结果显示3组细胞凋亡率和caspase3活性的上升趋势与活性氧水平变化趋势一致。线粒体膜电位结果显示,草酸组较对照组的线粒体膜电位(0.76±0.15与7.84±0.26,P<0.01)明显下降,紫檀芪干预组(10 μmol/L)的线粒体膜电位(2.26±0.27)较草酸组明显上升(P<0.01)。蛋白质印迹法检测结果显示,草酸组较对照组的ATF6、DDIT3、GRP78、caspase12和裂解的caspase3/9的蛋白相对表达量显著上升(均P<0.05);紫檀芪干预组(5、10、20 μmol/L)较草酸组的ATF6、DDIT3、GRP78、caspase12、裂解的caspase3/9的蛋白相对表达量显著下降(均P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示3组ATF6、DDIT3和GRP78的mRNA表达趋势与蛋白质印迹法结果一致。结论紫檀芪可以有效抑制草酸诱导的HK-2细胞发生内质网应激和凋亡。
简介:目的:探讨三七总皂苷(PNS)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化的影响.方法:采用流式细胞仪(FCM)结合免疫荧光法(IF)检测PNS对TGF-β1诱导的HK-2细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性细胞百分率的影响;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PNS对TGF-β1诱导的HK-2细胞α-SMA信使核糖核酸(mRNA)表达.结果:流式细胞仪(FCM)结合免疫荧光法(IF)示:PNS200~800mg/L可使TGF-β1诱导的HK-2细胞增加的α-SMA阳性细胞百分率回降;RT-PCR示:PNS200~800mg/L剂量和时间依赖性地使TGF-β1诱导的HK-2细胞增加的α-SMAmRNA的基因表达回降.结论:PNS可通过抑制TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞表型转分化,从而参与延缓肾间质纤维化的进程.
简介:AbstractBackground:Patients carrying the HongKongαα (HKαα) allele and -α3.7/αααanti-4.2 could be misdiagnosed as -α3.7/αα by the current conventional thalassemia detection methods, leading to inaccurate genetic counseling and an incorrect prenatal diagnosis. This study was aimed to accurately analyze the genotypes of HKαα carriers and -α3.7/αααanti-4.2.Methods:Samples were collected in our hospital from July 2017 to October 2019. Twenty-four common types of Chinese thalassemia were screened by gap-polymerase chain reaction (Gap-PCR) and reverse dot blot (RDB). Anti-4.2 multiplex-PCR was used to confirm carriers of the αααanti-4.2 duplication with -α3.7 deletion. Two-round nested PCR and multiplex ligation-dependent probe amplification (MLPA) were applied to accurately identify and confirm their genotypes. For data analysis, we used descriptive statistics and Fisher’s exact tests.Results:Two thousand five hundred and forty-four cases were identified as thalassemia in 5488 peripheral blood samples. The results showed that α, β, and αβ compound thalassemia were identified in 1190 (46.78%), 1286 (50.55%), and 68 (2.67%) cases, respectively. A total of 227 samples from thalassemia patients were identified as -α3.7/αα by Gap-PCR, and the genotypes of two samples were uncertain. There was a difference between Gap-PCR and combined groups (Gap-PCR combined with nested PCR and MLPA) in detecting HKαα (P < 0.05). Among the 229 patients, 20 patients were identified as HKαα carriers and one was identified as -α3.7/αααanti-4.2 by two-round nested PCR and MLPA, including 15 patients with HKαα/αα, three with HKαα/αα and β-thalassemia coinheritance, one with HKαα/-SEA, one with HKαα/-α4.2 and β-thalassemia coinheritance, and one with -α3.7/αααanti-4.2 and β-thalassemia coinheritance.Conclusions:αααanti-4.2 and HKαα genotypes of patients carrying -α3.7 need to be detected to reduce the misdiagnosis rate of patients carrying HKαα and -α3.7/αααanti-4.2 alleles. More accurate genetic counseling can be provided in the clinic using nested PCR combined with MLPA.
简介:摘要:随着社会的发展和进步,现阶段社会各个行业越来越多的拓展了其发展规模,因此大型企业对供电量的需求也越来越高,但由于化工行业在内的多种大型企业自身的供电需求以及生产限制,使得在企业内部不方便进行架空线路的建设,由此厂区内的主要供电线路会使用电缆在桥架中进行敷设的方法,以此满足企业的生产用电需求。但对于类似 110kv单回路高压单芯电缆线路的使用来说,在正常情况下会由于电缆的长度增加而产生更多的问题。例如电缆金属护套的发热等问题。从而需要对这些实际存在的问题进行有效的解决和控制,以此确保企业的生产稳定和生产安全。
简介:摘要:斜拉索桥梁 HDPE护套在套管中仅靠减震体支撑,未与套管壁进行焊接,斜拉索桥梁在长期使用过程中,动荷载作用下减震体产生松动导致 HDPE套管下滑。如果不及时修复,外露的钢索在长期使用过程中会发生锈蚀,影响桥梁安全性能。此外大部分斜拉索桥梁主塔都在 100米以上,斜拉索护套维修非常困难,且维修过程中存在较大安全隐患。本文着重讲述斜拉索 HDPE护套管维修技术,利用桥面反力架与千斤顶将 HDPE护套管顶升还原,另外座板式单人吊具辅助作业,套管顶升中辅助对接。能够快速进行斜拉索套管修复,且能够取得良好效果。
简介:摘要分析了运行条件下单芯电缆感应电压及环流产生的原因,对单相和三相回路电缆金属护套的工频感应电压进行了推导计算和对比分析。提出针对不同运行条件,应采用不同的金属护套接线和接地方式来有效限制感应电压。结合一起变电站出线电缆接地线烧坏故障典型实例对电缆施工及运行维护提出合理建议,为35kV及以上高压单芯电缆安全隐患排查和检修提供有效参考。
简介:摘要:目前,我国 XLPE 电缆的用量及电压等级正在逐年上升,高压电缆外护套是电缆线路的重要组成部分,其绝缘状态的优劣直接影响着电缆的使用寿命和电网的安全可靠运行。但因在施工过程中,外护套被拖伤、压伤、石头或护联箱紧固螺栓顶穿;运行过程受白蚁破坏及外力破坏等造成电缆绝缘护套破损现,而电缆护套一旦破损,一方面会使电缆金属套(或金属屏蔽层)形成接地回路,产生环流,从而使电缆金属套发热,加大电缆损耗,降低电缆的带负载能力;另一方面由于破损处空气及水分的侵入,会加速电缆金属套腐蚀,而腐蚀处产生的电场集中,易于产生局部放电和引发电树枝,对电缆的短期运行安全造成威胁;此外破损处水分的侵入还会使主绝缘产生水树老化的几率增加,严重影响电缆寿命。通过对电缆外护套故障工作的查找,发现电缆外护套存在的缺陷隐患对运行安全带来一定的影响,及时进行处理,杜绝了安全事故发生的可能性。因此对护套破损处进行及时定位和修补非常重要。
简介:摘要:高压电缆外护套具有加强绝缘性能以及保护电缆不受机械损伤特点,对高压电缆长期安全稳定运行起着非常重要的作用,通过收集整理电缆护套的案例类型及原因分析,可知大多数的故障是由于施工过程控制不到位造成,因此提升施工质量,加强过程管控可以减少高压电缆护套的故障发生频次,保证电缆安全可靠运行。本文将以阿布扎比某项目高压电缆外护套耐压不合格进行原因分析并预防措施,为其他相似项目提供借鉴参考,以避免同样的问题再次发生。