简介:摘要目的探讨生长抑素(SS)对百草枯(PQ)中毒小鼠急性肾损伤(AKI)的保护作用及其机制。方法2017年12月至2018年4月,选择SPF级雄性BALB/C小鼠48只,随机分为4组每组12只,PQ组和PQ+SS组小鼠用60 mg/kg PQ灌胃,对照组和SS组以等剂量生理盐水灌胃,PQ+SS组和SS组小鼠在灌胃前1 h及灌胃后3 h各向腹腔注射1次SS(20 ml/kg)。对照组和PQ组在相同时间腹腔注射等剂量生理盐水。观察小鼠一般情况和行为学的影响。在造模24 h后处死小鼠,摘除眼球后取血,剖腹取出双肾,ELISA法分别测定血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和髓过氧化物酶(MPO)水平;光镜下观察中毒性肾小管损伤特征性病理改变并以此为评分;免疫印迹法(Western blot)检测核因子-κB(NF-κB)表达变化情况,化学比色法检测肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、丙二醛(MDA)等指标的变化。结果对照组和SS组小鼠一般情况和行为基本正常;与对照组比较,PQ组小鼠表现为进食、活动减少,皮毛干燥、倒毛,精神萎靡;与PQ组比较,PQ+SS组小鼠症状均减轻。光镜下PQ组小鼠肾组织结构明显紊乱,被严重破坏,肾病理学评分(6.14±0.72)分;与PQ组比较,PQ+SS组小鼠肾病理学评分[(4.36±0.42)分]下降(P<0.05)。与对照组比较,PQ组小鼠血清TNF-α(39.89±3.32)pg/ml、IL-6(77.29±4.77)pg/ml、NF-κB(2.29±0.10)、MPO(0.31±0.02)μg/ml、MDA(0.91±0.03)mmol/mg prot、Caspase-3(376.51±8.24)%水平测定明显升高,肾组织SOD表达明显下降[(2.36±0.73)U/mg prot](P<0.05)。与PQ组比较,PQ+SS组小鼠血清TNF-α(33.82±1.57)pg/ml、IL-6(58.49±5.89)pg/ml、肾组织NF-κB(0.84±0.05)、MPO(0.22±0.01)μg/ml、肾组织MDA(0.72±0.05)mmol/mg prot、Caspase-3(327.32±21.93)%水平下降明显,肾组织SOD表达明显上升[(4.90±0.81)U/mg prot](P<0.05)。结论PQ中毒可导致小鼠AKI,而SS能减轻PQ中毒引起的AKI,改善PQ中毒小鼠的一般生存状态,对PQ中毒所致的肾损伤起到一定的保护作用,可能是通过抑制中毒后导致的氧化应激反应、炎症反应及细胞凋亡实现。
简介:摘要目的探讨3-正丁基苯酞(DL-3-n-Butylphthalide,NBP)对慢性酒精中毒模型小鼠的情绪记忆的改善作用及可能机制。方法24只C57/BL6成年雄性小鼠,随机分为对照组(CON组,n=8),模型组(AT组,n=8),治疗组(AT+NBP组,n=8)。AT组及AT+NBP组小鼠采用酒精灌胃方法建立慢性酒精中毒小鼠模型。AT+NBP组在酒精造模期间每天一次给予40 mg/kg的NBP灌胃,AT组和CON组给予等剂量的玉米油灌胃,连续14 d。采用旷场实验评估小鼠焦虑样行为,悬尾实验评估抑郁样行为,Morris水迷宫和新物识别评估小鼠记忆能力,Tunel染色评估神经元凋亡数量。原代培养小鼠神经元,在细胞水平上给予酒精和NBP干预,采用荧光钙成像技术检测神经元内的钙离子浓度变化。采用SPSS 17.0进行描述性分析,t检验和方差分析。结果AT+NBP组小鼠在旷场中间区域探索时间较AT组长[(50.68±7.82)s,(38.50±13.93)s;t=-2.16,P<0.05)];空间记忆测试中,AT+NBP组在目标象限探索时间较AT组长[(28.02±7.13)s,(20.98±5.58)s;t=-2.20,P<0.05];AT+NBP组在短记忆测试中2 h时其认知系数RI(0.83±0.08)比AT组(0.68±0.10)高(t=-3.13,P<0.05)。与CON组比,AT组小鼠前额叶皮层神经元凋亡增加[(17.33±2.51)个,(115.67±6.50)个;t=-24.41,P<0.001],AT+NBP组较AT组减少[(45.00±5.57)个](t=14.29,P<0.001);AT组海马齿状回神经元凋亡[(13.75±4.79)个]也较AT+NBP组少[(5.75±3.30)个](t=2.75,P<0.05);神经细胞内钙离子浓度检测结果显示,3种浓度的酒精(100 mmol/L、200 mmol/L、300 mmol/L)均导致神经细胞内相对荧光单位(RFU)△F/F显著增加[(1.43±0.32),(2.31±1.39),(1.21±0.73);t=-7.67,-2.85,-2.86,均P<0.05],与之相对应地使用NBP干预的3组神经细胞内RFU变化相对稳定[(-0.04±0.01),(-0.03±0.01),(-0.04±0.02);t=7.96,2.96,2.92,均P<0.05]。结论3-正丁基苯酞可以改善慢性酒精中毒模型小鼠的学习记忆能力,这可能与抑制中毒模型小鼠神经元凋亡、影响神经元细胞内钙离子稳态有关。