简介:目的探索原代培养成年大型哺乳动物绵羊阴道平滑肌细胞(vaginalsmoothmusclecells,VSMC)改良方法。方法成年绵羊阴道平滑肌取材,利用预消化组织块法(将组织剪碎呈1mm3大小组织块,0.1%Ⅰ型胶原酶消化20min,0.1%胰酶-EDTA与0.1%Ⅰ型胶原酶混合溶液再次消化30min,将组织块种于培养瓶)原代培养VSMC,并与传统组织块法和酶消化法进行细胞萌出速度及增殖速度比较,提高VSMC原代培养效率;免疫荧光染色法和westernbloting法检测平滑肌细胞标志物calponin及a-SMA表达鉴定VSMC。结果预消化组织块法获得原代VSMC速度快于传统组织块法和酶消化法,3d可见细胞萌出,9d可达80%细胞融合,"峰谷"特征明显,而酶消化法至12d增殖至80%细胞汇合,传统组织块法约7d可见细胞萌出,14d可达80%细胞汇合;VSMC平滑肌标志物calponin和a-SMA均呈阳性表达(P〈0.05);VSMC可扩增代数有限,扩增7代后即表现出细胞形态改变,增殖缓慢,胞核内出现空泡,死亡细胞增加等表现。结论预消化组织块法可较快速多量获得绵羊VSMC。
简介:3月18日,北京长风拍卖有限公司2007年春季拍卖会在中国大饭店落槌。此次首场拍卖会设“上善草堂·收藏成扇专场”“中国当代篆刻专场”“八面来风·中国书画专场”共3个专场。共成交459件拍品,总成交额为9278.94万元。其中“上善草堂·收藏成扇专场”推出拍品137件,拍出88件精品成扇,成交总额为417.89万元。“中国当代篆刻专场”引起众多篆刻爱好者和收藏家的激烈竞拍,142件拍品成交122.32万元。“八面来风·中国书画专场”聚集了众多中国书画大师的精品力作,推出的229件书画作品成交金额高达8738.73万元。其中,范曾的巨幅作品《竹林七贤》以720.5万元的成交价成为全场之最,齐白石的《庚午山水册》也以660万元落槌,龚贤的《半山楼台图轴》以550万元成交。