简介：摘要目的探究人体中与结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis，Mtb)Rv1705c蛋白相互作用的蛋白质。方法原核表达Rv1705c蛋白基因，收集包涵体，裂解后透析纯化Rv1705c并测定其浓度，ELISA法检测细菌Rv1705c刺激巨噬细胞后细胞因子IFN-γ的分泌量，使用纯化并带有生物素标记的Rv1705c孵育人蛋白质组芯片HuProt™，筛选与Rv1705c相互作用的人类蛋白质，使用GenePix Pro 6.0软件对蛋白质芯片的信号图像进行数据提取，使用GO、KEGG等多个数据库进行生物信息学分析，GST pulldown验证Rv1705c与PSMA3、RSAD2的相互作用。结果纯化结果显示，Rv1705c在包涵体中表达，Rv1705c刺激巨噬细胞后IFN-γ分泌量显著上升。芯片结果显示共筛选出了29个与Rv1705c相互作用的潜在阳性蛋白质，其中PSMA3、NLN、THOP1、UPF3A、RSAD2、OMG、PNKD、STEAP3、MED8共9个蛋白质的信噪比(signal-to-noise ratio，SNR)>1.6。进一步的生物信息学分析发现候选蛋白PSMA3、RSAD2、C1QBP参与固有免疫应答激活信号转导，并且PSMA3、RSAD2与干扰素存在交互作用，GST pulldown验证PSMA3、RSAD2与Rv1705c确有相互作用。结论发现并验证PSMA3、RSAD2与Rv1705c存在相互作用，为Mtb感染机制的研究提供参考。

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简介：摘要目的构建表达结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis，Mtb)潜伏期表达抗原Rv3133c，通过人群以及小鼠实验评价其免疫原性。方法构建重组质粒pPROEX-Rv3133c，诱导表达并纯化蛋白质，经Western blot鉴定后，用全血干扰素释放试验评价重组蛋白rRv3133c在Mtb感染人群中的免疫原性；联合佐剂DC免疫小鼠，检测小鼠血清中rRv3133c特异性抗体分泌水平、脾细胞中抗原特异性Th1型细胞因子分泌水平以及脾细胞中多功能T细胞免疫应答水平和肺脏组织细胞因子mRNA表达水平。结果成功构建表达rRv3133c。rRv3133c可刺激Mtb感染者尤其是潜伏感染者产生高水平的IFN-γ。免疫小鼠后，rRv3133c+DC组小鼠脾脏IFN-γ、TNF-α、IL-2水平，以及IFN-γ+TNF-α+CD4+T细胞数量和肺脏组织中抗原特异性IFN-γ、TNF-α、iNOS的mRNA表达水平均高于BCG组，但低于BCG+rRv3133c+DC组；rRv3133c+DC组和BCG+rRv3133c+DC组小鼠血清中IgG2a/IgG1比值均大于1，显著高于BCG组。结论rRv3133c具有良好的免疫原性，可以诱发机体产生较强的Th1型免疫应答，是结核病亚单位疫苗的潜在候选靶抗原。

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简介：摘要目的研究结核分枝杆菌Rv0446c的抗原表位及其免疫原性，为结核病的免疫诊断技术及疫苗研发提供候选抗原及表位。方法利用生物信息学软件TE-predict和IEDB的T细胞表位预测软件对结核分枝杆菌抗原Rv0446c进行T细胞表位预测，用ELISPOT实验检测表位在2019年1月到2020年12月期间来自佛山市第四人民医院和福州肺科医院的结核病患者（50例）、肺部疾病患者（39例）及健康志愿者（55例）中的免疫反应性。将60只6周龄BALB/c小鼠随机分成10组，每组6只，分别采用PBS、血蓝蛋白（KLH）、高剂量结核分枝杆菌抗原Ag85B（50 μg/只）、低剂量Ag85B（20 μg/只）、高计量P120、低剂量P120、高计量P121、低剂量P121、高剂量P123、低剂量P123（P120、P121、P123高剂量为100 μg/只、低剂量为50 μg/只）多肽对其皮下免疫，每只小鼠免疫3次，每次间隔2周，末次免疫后4周，应用ELISA方法检测各组小鼠脾细胞产生的IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10细胞因子水平。结果预测的7条表位多肽中，ELISPOT试验筛选出4条阳性T细胞表位多肽P120、P121、P122、P123，在结核病患者中检测灵敏度和特异度分别为30.0%、18.0%、6.0%、22.0%和96.8%、98.9%、100%、96.8%。与对照PBS组和KLH组比较，P120多肽能刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ、IL-4、IL-10，P121多肽刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ和IL-4（均P<0.05），P123多肽刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ（均P<0.05）。P120、P121、P123多肽刺激小鼠产生的IL-2的水平高于PBS组低于Ag85B-L组和Ag85B-H组（均P<0.05），但与KLH组差异无统计学意义（均P>0.05）。结论Rv0446c蛋白及其T细胞表位具有较好的免疫原性及免疫反应性，能刺激机体产生强烈的细胞免疫应答，可用于结核病的临床诊断技术研究和新型结核亚单位疫苗的构建。

简介：AbstractBackground:Differential diagnosis of active tuberculosis (ATB) and latent tuberculosis infection (LTBI) has been a challenge for clinicians in high TB burden countries. The purpose of this study was to improve the accuracy of differential diagnosis of ATB and LTBI by using fluorescent immunospot (FluoroSpot) assay to detect specific Th1 cell immune responses. The novel mycobacterium tuberculosis (MTB) latency-associated antigens Rv1733c and synthetic long peptides derived from Rv1733c (Rv1733c SLP) were used based on virulence factors early secreting antigen target-6 (ESAT-6) and culture filtrate protein-10 (CFP-10).Methods:Fifty-seven ATB cases, including 20 pathogen-confirmed ATB and 37 clinically diagnosed ATB, and 36 LTBI cases, were enrolled between January and December 2017. FluoroSpot assay was used to detect the interferon γ (IFN-γ) and interleukin 2 (IL-2) secreted by the specific T cells after being stimulated with MTB virulence factors ESAT-6 and CFP-10, MTB latency-associated antigens Rv1733c and Rv1733c SLP. The receiver operating characteristic (ROC) curve was used to define the best cutoff value of latency-associated antigens in the use of differentiating ATB and LTBI. The sensitivity, specificity, predictive value, and likelihood ratio of ESAT-6 and CFP-10-FluoroSpot combined with latency-associated antigen in the differential diagnosis of ATB and LTBI were also calculated.Results:Following the stimulation with Rv1733c and Rv1733c SLP, the frequency of single IL-2-secreting T cells stimulated by Rv1733c SLP had the largest area under the ROC curve, which was 0.766. With a cutoff value of 1 (spot-forming cells [SFCs]/2.5 × 105 peripheral blood mononuclear cells) for frequency, the sensitivity and specificity of distinguishing ATB from LTBI were 72.2% and 73.7%, respectively. ESAT-6 and CFP-10-FluoroSpot detected the frequency and proportion of single IFN-γ-secreting T cells; the sensitivity and specificity of distinguishing ATB from LTBI were 82.5% and 66.7%, respectively. Combined with the frequency of single IL-2-secreting T cells stimulated by Rv1733c SLP on the basis of ESAT-6 and CFP-10-FluoroSpot, the sensitivity and specificity increased to 84.2% and 83.3%, respectively.Conclusion:Rv1733c SLP, combined with ESAT-6 and CFP-10, might be used as a candidate antigen for T cell-based tuberculosis diagnostic tests to differentiate ATB from LTBI.

简介：MPV——MPV的全称是Multi—PurposeVehicle．即多用途汽车。、它集轿车、旅行车和厢式货车的功能于一身，车内每个座椅都可调整，并有多种组合的方式，例如可将中排座椅靠背翻下即可变为桌台，前排座椅可作180度旋转等。

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简介：目的：融合表达结核分枝杆菌Rv3881c突变子抗原，以便与其他已知的免疫显性抗原联合使用，有效增加结核分枝杆菌感染血清学检验的敏感性和特异性。方法：将克隆的来源干结核分枝杆菌H37Rv株的Rv3881c突变体基因插入原核表达载体pET24b，并在大肠杆菌BL21中获得高效表达；由于重组的Rv3881c突变子抗原片段同C端的6xHis标签融合表达，使用Ni-柱进行快速纯化。结果：Western印迹表明，重组的Rv3881c突变子抗原同选取的6例结核病阳性临床血清标本均能发生明显的反应。结论：重组Rv3881c突变体具有较好的特异性，提示该抗原可能成为检测结核的有效抗原之一。

简介：乐风RV徘徊在MPV与两厢车之间,用以满足那些热爱自驾郊游,又对经济实用与时尚舒适有要求的80、90后.由于其造型特殊,因此同级别车型的竞争对手并不多,严格来算的话,最相近的莫过于日产的骊威了,不过日产官方给出的定义为MPV,相信不少人听到MPV就会自然而然将其与笨重、操控不行联系到一起,而尺寸稍小一些的乐风RV就更为讨巧,价格也相对骊威更便宜,也更适合那些刚组建家庭的年轻人.

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简介：在美国入门级跑车市场，KawasakiNinja250的统治地位多年未曾受到挑战。尽管如此，小忍者还是得面对大排量对手的挤压。各大厂商似乎对大排量跑车或街车带来的高额利润感到很满意，直到摩托车市场出现动荡，超级跑车遭受了被束之高阁的命运。今天，摩托车市场逐渐稳定，厂商们也开始认识到为新一代的年轻人生产好玩又便宜的入门级机车才是最明智之举。

简介：摘要目的通过分子生物学技术对结核分枝杆菌Rv0350基因克隆、表达与纯化。方法以结核分枝杆菌标准菌株H37Rv为模板，经聚合酶链式反应(PCR)扩增，克隆Rv0350基因，与质粒pET-28a连接构建重组质粒，转入大肠杆菌BL21(DE3)，经异丙基半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过镍亲和层析获得纯化的重组蛋白。结果对扩增后的基因进行电泳试验，证实成功重组目的基因，对重组纯化后的蛋白进行考马斯亮染、Weston-blot验证已成功重组Rv0350。结论通过分子生物学技术可成功获得大量结核分枝杆菌Rv0350抗原，为后续功能与机理研究奠定基础。

简介：3G3RV—ZV1系列变频器采用欧姆龙最新矢量控制算法，结合高集成的制造技术，融入现代人性化的设计风格及安全规范，使本产品一问世就站在了时代的高端。

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简介：对RV减速器曲柄轴进行受力分析,提出曲柄轴弯曲应力分析的理论计算模型。基于有限元法,利用ANSYSAPDL建立RV减速器装配体有限元分析模型,模型中考虑了关键零部件之间的接触,行星轮、曲柄轴承以及摆线轮的变形和曲柄轴承间隙,使曲柄轴弯曲应力分析更符合工程实际。对比分析理论计算结果和有限元分析结果,总结出每个曲柄轴最大弯曲应力发生的位置及曲柄轴弯曲应力的影响因素,为曲柄轴结构参数优化提供理论依据。

简介：C2C的模式在中国完成了培养用户网络购物习惯的使命,而最终要盈利却不得不绕道B2C。4月17日,易趣网副总裁常琳的晚餐时间是和易趣新平台上的个人大卖家们一起度过的。席间,那些自eBay易趣时代就栖身此处的大卖家们不断地向常琳提出各种吸引卖家进驻的建议。

简介：以工业机器人普遍采用的RV减速器为研究对象,通过考虑RV减速器第一级传动中太阳轮和行星轮变形,第二级传动中针齿壳、针齿、摆线轮、曲柄轴承滚子和曲柄轴变形,针齿和针齿孔加工误差,曲柄轴承间隙及摆线轮与针齿间啮合侧隙,基于有限元法,利用ANSYSAPDL建立RV减速器参数化有限元装配模型。通过有限元仿真分析得出各因素综合作用下摆线轮齿受力分布及各齿受力大小,总结出摆线轮轮辐结构变形对摆线轮受力的影响规律,为RV减速器摆线轮结构参数优化提供依据。