简介:目的对西双版纳小耳猪的群体遗传结构进行RFLP分析。方法采用ECL核酸直接标记和检测系统,以HRP标记ɑ-珠蛋白-3’HVR多基因座小卫星探针,对西双版纳小耳猪的HinfⅠ或HaeⅢ酶切片段进行Southern杂交,以化学发光法进行检测,获得了清晰可辨的、具有高度多态性的DNA指纹图谱。结果2kb以上的谱带数在6~15条之间,HinfⅠ酶切产生的图带数低于HaeⅢ。JB亚系内805、807家系和JS亚系内111、121、121、151家系不同个体间的相似系数分别为0.94±0.09、0.85±0.08、0.84±1.7、0.78±1.6、0.83±0.42、0.87±0.07,显著高于各家系间的相似系数,JB亚系内的805家系和JS亚系内的151家系不同个体间相似系数较大,分别为0.94和0.87。结论西双版纳小耳猪近交程度较高,个体间差异较小,均一性较强。
简介:目的建立临床常见念珠菌的聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测技术。方法用真菌通用引物ITS1-ITS4分别扩增白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌和近平滑念珠菌5种菌株的ITS1-5.8SrDNA-ITS2区域,然后对扩增产物进行MspⅠ酶切分析。结果5种念珠菌标准菌株经PCR-RFLP分析后产生了5种不同的特异性条带,成功地将临床上常见的5种念珠菌区分开来。应用此方法鉴定了60株临床分离的念珠菌,其PCR-RFLP结果与标准菌株一致,测序结果进一步证实了此方法的可靠性。结论PCR-RFLP检测技术具有快速、稳定、特异、准确性高的特点,在常见致病念珠菌鉴定方面具有良好的临床应用前景。
简介:ToestablisharapididentificationmethodforcommonpathogenicbacteriaonthebasisofmolecularbiologyandtoconstructapreliminaryPolymeraseChainReaction-CapillaryElectrophoresis-RestrictionFragmentLengthPolymorphism(PCR-CE-RFLP)databaseofbacteriaisolatedfromclinicalspecimensfrequently,183strainscollectedfromclinicalsamplesbelongingto12generaand19specieswhosebiochemicalcharacterizationscorrespondedtothetypicaloneswereexamined.ThegenomicDNAswereamplifiedbytwopairsoffluorescencelabeledprimersaimingat16SrRNAgeneand16S-23SrRNAspacerregiongenerespectivelyatthesametime.PCRproductswerethendigestedbyrestrictionendonucleaseHaeⅢin-completelybeforetakingcapillaryelectrophoresis.TheresultswiththePCR-CE-RFLPpatternsof16SrRNAgeneswerejustalikewithinsomegenera,butwhenitcomesto16S-23SrRNAspacerregiongenes,eachbacteriumshowedauniquepattern,whichcanbedistinguishedfromeachothereasily.ItseemsthatPCR-CE-RFLPpatternsof16SrRNAgenecouldonlybeusedtoclassifythebacteriaintofamilylevel,whereasthedataof16S-23SrRNAspacerregiongenecouldbeutilizedtoidentifythewholemicroorganismsaspreciselyasthespecieslevel.Inspiteofthedataofthespacerregiongenealonecanbesufficientlytoverifythewholebacteria,weinsistthatthe16SrRNAgenecouldbeofsomeassistantincasethatthereshouldbelotsoffamiliesofbacteria,inwhichsomesimilarones,withthesameRFLPdataof16S-23SrRNAspacerregiongene,maycoexist.ThisstudyprovesthattheutilityofPCR-CE-RFLPisaconvenient,rapidmethodtoidentifypathogenicbacteria,andisalsoaquickdiagnosismeasureforapplicationtoclinicaluse.
简介:摘要目的监测伤寒沙门菌株对青霉素和其他抗生素的耐药情况。分析多重PCR基因扩增产物图谱与青霉素耐药性的相关性,分析血清型青霉素耐药菌株的脉冲电场凝胶电泳(PFGE)图型,初步了解耐药菌株分子流行病学上的特点。方法(1)抗生素药物敏感试验;(2)用聚合酶链反应(PCR)和限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)结果发现23株多重耐药鼠伤寒沙门菌,其中耐4~5种抗生素的9株(40%),耐6~9种抗生素的8株(35.13%),耐10种抗生素的6株(26.10%);可分为16个PFGE型,其中5个PFGE型的菌株数超过1株。结论伤寒沙门菌分离株的多重耐药性严重,PFGE分型方法对鼠伤寒沙门菌的分型能力较好。
简介:目的:建立一种高效的末端限制性片段长度多态性(T-RFLP)方法,检测工程土壤细菌。方法:以深圳和香港两地不同土层(0.5,10,20和30m)的工程土壤为研究对象,提取并纯化总DNA,利用细菌16SrDNA基因通用引物8f-FAM/1492r进行PCR扩增,扩增产物分别用HhaⅠ、HaeⅢ和MspⅠ限制性内切酶酶切,酶切产物经毛细管电泳测序,序列上传至数据库进行分析。结果:经过比对分析,香港段土壤中大约存在细菌141属,235种;深圳段大约存在132属,206种;32个细菌种属只在香港土壤中有分布,3个细菌种属只在深圳土壤中有分布;植物病原细菌有14个种属。结论:建立的T-RFLP方法能够高效、快速地分析工程土壤细菌。
简介:AftertheSeptember11events,AmericatimelytooktheopportunityofantiterrorismtospreaditsoffensivetoCentralAsia.Insodoing,itsintentiontopushforitspolicyof"managing"Eurasiahasbecomeprominent.Undoubtedly,America’sseriesofmeasuresignitedchangesofthesituationinChina’ssurroundingregions,bringingmanynegativeinflu
简介:本文分析了公路隧道ITS的现状;提出实现公路隧道ITS应对不同类型隧道研究交通控制模式、通风控制模式并开展关键设备的开发,当前应注重ITS市场的培养;应用现场总线控制技术对隧道进行监控。
简介:
简介:Thispaperproposesanewtectonicpatternofthedeep-seatedstructuresinChinaanditsadjacentareas(includingtheT-A-BsystemoftheRyukyuIslands).Thisisbasedonstudiesofthegravityfieldandgravityinversioncoupledwiththesummationofthemostrecentachievementsingeophysicalstudies.Fromaplate-tectonicpointofview,themetallogeniccharacteristicsandtheirindicationsatdepth,aswellasrelevantgeophysical-geologicalcharacteristicsoffourtectonicenvironmentsoftheChinesecontinentareanalysed,andaclassificationofcompositemetallogenicprovincesandbeltsandpredictionofmetallogenicprospectsaremade.TheauthorextendstheKunlun-Qilian-QinlingtectonicbelttotheT-A-BsystemoftheRyukyuIslandsthroughtheNWdeepboundaryoftheHangzhouBay,andalsoproposesthefollowingbasicviews’themigrationandsuperpositionoftectonicenvironmentsledtotheformationofacompositemetallogenicsystem;thechangeinthetectonicenvironmentresulted