简介:摘要:历史是中考的必考科目之一,中考历史复习的成效,直接影响着学生的升学与发展。而且,通过对近年来中考历史试题的命题走势与考查导向研究可以发现,淡化知识识记、注重能力测评已成为新时代中考历史的基本趋势。基于此,教师在落实中考历史复习指导时,应该加强对考纲与课标的研读,并学生实际、考纲要求、教材内容等科学规划复习方案,既要关注学生的复习细节,又要明确知识的框架与体系,构建出更为科学、高效、深入的复习方案,将其渗透至中考历史复习的方方面面、各个环节,促使每一个学生在不遗漏知识要点的基础上逐步提升自己的应考能力与综合素养,为确保中考历史复习实效提升,推动学生取得优异成绩而给予保证。
简介:
简介:
简介:摘要:本文从多方面分析了我国传媒行业整合的现状、存在的一系列问题,并就其中一些较为典型的问题深入浅出地探讨了相应的解决方案,进而围绕新时代记者队伍的培养进行了分析和研究,以期在融媒体时代能推陈出新地找到更合适的媒体人培养模式。
简介:摘要目的构建并拯救增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)标记的EGFP-EV-A71重组病毒。方法利用重叠PCR技术,以pMD19T-SDLY107全长质粒为模板,将2A蛋白酶识别序列加入到结构蛋白VP4的5′端;以pEGFP-N1质粒作为模板,扩增获得EGFP目的片段,将其插入到上述重组质粒中,得到重组质粒pMD19T-107-EGFP。经酶切和体外转录后,转染横纹肌细胞肉瘤(RD),拯救获得重组病毒EGFP-EV-A71。采用Karber法计算细胞培养半数感染量(CCID50)以测定病毒滴度。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测不同时间点的病毒复制水平,并绘制病毒复制曲线,比较重组病毒与母本病毒的复制力有无差异。乳酸脱氢酶(LDH)和细胞增殖(CCK-8)实验分别测定被感染细胞的细胞损伤率和存活率。结果包含EGFP的重组EV-A71感染性cDNA克隆被成功构建;转染RD细胞后,出现典型的细胞病变并且表达出较强的绿色荧光;重组病毒与母本病毒具有相似的复制动力学特征和致细胞病变效应。结论成功拯救了EGFP标记的重组病毒EGFP-EV-A71。