简介：摘要目的观察百草枯（PQ）诱导的帕金森病（PD）样小鼠脑干蓝斑核（LC）损伤的动态变化。方法于2019年10月，将36只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为染毒组和对照组，各18只。染毒组小鼠给予腹腔注射15 mg/kg PQ，对照组小鼠腹腔注射等容量0.9%生理盐水，每周2次，连续8周。分别于4周、6周、8周末次给药后，观察各组小鼠的神经行为学（爬杆、游泳、旷场、悬尾、高架十字迷宫及水迷宫实验）变化，评估小鼠的运动能力、情绪和认知功能变化。取小鼠脑组织，苏木素-伊红（HE）染色观察LC区病理变化；尼氏染色检测LC区神经元尼氏体数量变化；免疫组织化学（IHC）染色检测黑质（SN）区与LC区神经元标志物神经元核抗原（NeuN），多巴胺（DA）能神经元和去甲肾上腺素（NE）能神经元标志物酪氨酸羟化酶（TH），以及α突触核蛋白（α-syn）表达情况；蛋白免疫印迹（Western blotting）法检测中脑及脑干NeuN、TH、α-syn蛋白表达水平；TUNEL染色检测LC区神经元凋亡情况。结果与PQ染毒第4周组比较，随着染毒时间的进展，PQ染毒组小鼠爬杆时间、游泳不动时间逐渐增加，高架十字迷宫实验开放臂停留时间比和水迷宫实验小鼠穿越平台次数、平台象限停留时间逐渐减少（P<0.05）。HE与尼氏染色结果显示，随着染毒时间的进展，染毒组小鼠LC区神经元逐渐排列疏松，细胞核深染，胞质发生固缩，尼氏体数目逐渐减少（P<0.05）。IHC结果显示，随着染毒时间的进展，染毒组小鼠SN区与LC区神经元NeuN、TH阳性细胞数目逐渐减少，α-syn阳性表达量逐渐增多（P<0.05）。Western blotting结果显示，随着染毒时间的进展，染毒组小鼠中脑和脑干NeuN、TH表达水平逐渐降低，α-syn寡聚体表达水平逐渐升高（P<0.05）。TUNEL染色显示，随着染毒时间的进展，染毒组小鼠LC区神经元凋亡率逐渐升高（P<0.05）。结论PQ诱导PD样小鼠LC区出现渐进性损伤，可能是LC区出现病理性α-syn的异常聚集所引起的。

简介：摘要目的利用脑功能磁共振成像（functional magnetic resonance imaging, fMRI）技术研究失眠患者静息态下蓝斑的功能连接（functional connectivity, FC）变化。材料与方法前瞻性纳入59例失眠患者及30例健康对照者，对受试者进行匹兹堡睡眠量表（Pittsburgh Sleep Quality Index, PSQI）、汉密尔顿抑郁量表（Hamilton Depression Scale, HAMD）、汉密尔顿焦虑量表（Hamilton Anxiety Scale, HAMA）、过度觉醒量表（Hyperarousal Scale, HAS）评分，并采集静息态脑fMRI数据，以蓝斑为感兴趣区，计算与全脑所有体素的FC值，使用t检验比较两组间差异，提取有差异脑区的脑FC值，与临床量表评分进行相关性分析。结果失眠患者与健康对照组在年龄、性别及受教育年限上差异无统计学意义。与健康对照组相比，失眠患者蓝斑与右侧额中回的FC值升高（GRF校正，体素水平P＜0.001，团块水平P＜0.05），并与PSQI（r=0.40，P＜0.001）、HAMD（r=0.39，P＜0.001）、HAMA（r=0.39，P＜0.001）、HAS（r=0.46，P＜0.001）评分均呈正相关。结论失眠患者蓝斑与右侧额中回的FC增强可能与失眠患者过度觉醒状态有关，并且可能导致失眠患者的焦虑抑郁情绪，从而引发睡眠质量下降。该研究为失眠的过度觉醒假说提供了影像学依据，证明了蓝斑在睡眠觉醒过程的重要作用，进一步揭示了失眠的发病脑功能机制，为失眠治疗靶点的选择提供了新思路。

简介：摘要目的研究中枢蓝斑区促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)系统在IBS中的作用，探索影响其改变的分子机制。方法采用母婴分离联合出生后复合应激构建大鼠IBS模型，后采用脑核团微取样的方法获得大鼠蓝斑区的组织样本。应用实时荧光定量PCR技术检测对照组和IBS组大鼠蓝斑核内细胞癌基因Fos(c-Fos)，以及CRH和其相应受体促肾上腺皮质激素释放激素受体(CRHR)1、CRHR2的mRNA表达；同时检测DNA甲基转移酶(DNMT)1、DNMT3a和DNMT3b的mRNA表达；采用蛋白质印迹法检测组蛋白甲基转移酶——ASH2样蛋白(ASH2L)，以及SET核癌基因和MYND域2蛋白(SMYD2)的表达。统计学分析采用t检验。结果IBS组的直肠充气压低于对照组[(69.82±5.47) mmHg比(86.86±5.98) mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa)]，c-Fos基因的mRNA水平较对照组升高(2.11±0.44比1.00±0.19)，CRH的mRNA水平较对照组升高(1.99±0.35比1.00±0.13)，SMYD2的蛋白表达水平较对照组上调(1.04±0.21比0.61±0.12)，差异均有统计学意义(t＝6.215、2.321、2.797、4.451，P均<0.05)。IBS组大鼠CRHR1、CRHR2、DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的mRNA水平以及ASH2L的表达与对照组比较(分别为0.96±0.13比1.00±0.26、1.35±0.63比1.00±0.43、1.40±0.61比1.00±0.19、1.39±0.58比1.00±0.21、1.45±0.71比1.00±0.39和0.80±0.19比1.05±0.26)，差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论母婴分离联合出生后复合应激通过影响蓝斑核内Crh基因的转录进而造成CRH系统和去甲肾上腺能系统应激调控网络的激活，导致大鼠内脏敏感性增加。Crh基因转录异常可能与SMYD2介导的组蛋白H3K36的甲基化有密切关系，而与DNA的甲基化修饰无关。