简介:摘要:目的:建立大肠杆菌表达的重组蛋白外源性E.coli宿主残留DNA的检测方法用于生产过程以及最终产品的质量控制。方法:参考试剂盒相关说明书,样品加标回收了率无法达到2020版中国药典(Ch.P)第四部3407章节和美国药典(USP)1130章节的要求,通过对药物浓度、处理温度、糖原的蛋白酶K的使用量以及不同的加标量的优化,即将样品稀释10倍后,加30pg的E.coli标准品,20μl的蛋白酶K消化1h,选择15μl PCR反应体系。结果:回收率满足在50%~150%之间。结论:借助商品化的试剂盒,优化的外源性DNA提取条件满足法规要求、操作简便,非常适用于大肠杆菌表达的重组蛋白生产过程以及最终产品的外源性残留DNA的检测。
简介:摘要目的探讨丁酸钠(NaB)是否通过组蛋白丁酰化修饰改善糖尿病肾脏病(DKD)炎症和纤维化。方法无特定病原体(SPF)级C57BL/6雄性小鼠24只,8周龄、16~17 g。采用随机数字表法将其分为正常对照组(NC组)、高脂饮食联合链脲佐菌素(50 mg/kg)复制的DKD模型组(DKD组)、NaB溶液(每48小时40 mg/kg)腹腔注射干预组(DKD+NaB组),每组8只。体外培养肾系膜细胞,分为正常葡萄糖(NG)组(5.56 mmol/L葡萄糖)、高糖(HG)组(30 mmol/L葡萄糖)、HG+NaB组(30 mmol/L葡萄糖和1 mmol/L NaB)、HG+NaB+乙酰转移酶活性转录共激活因子(P300)抑制剂(A485)组(30 mmol/L葡萄糖、1 mmol/L NaB和10 μmol/L A485)。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组小鼠血清炎症因子[单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-6(IL-6)]水平,及尿微量白蛋白和尿肌酐,并计算尿微量白蛋白/肌酐比值(UACR),采用Western blotting法检测各组小鼠肾脏组织和肾系膜细胞IL-6、MCP-1和转化生长因子-β(TGF-β)、泛丁酰化、H3K9丁酰化的蛋白表达水平,采用qRT-PCR检测各组小鼠肾脏组织和肾系膜细胞TGF-β、纤连蛋白(Fn)、P300的mRNA表达水平。采用HE、Masson染色观察小鼠肾脏组织硬化及纤维化程度。采用单因素方差分析进行组间比较。结果体内实验结果表明,与DKD组比较,DKD+NaB组小鼠UACR、血清IL-6、MCP-1水平均下降,肾脏组织的TGF-β和Fn的蛋白、mRNA表达均下降,泛丁酰化修饰、H3K9丁酰化修饰以及P300的蛋白、mRNA表达均明显上调(均P<0.05);HE、Masson染色显示,小鼠肾脏组织硬化及纤维化程度改善。体外实验结果表明,NaB呈浓度依赖性上调肾系膜细胞泛丁酰化和H3K9丁酰化修饰水平;与HG组比较,HG+NaB组肾系膜细胞泛丁酰化和H3K9丁酰化修饰均明显上调,IL-6和TGF-β的蛋白表达均下调;与HG+NaB组相比,HG+NaB+A485组的肾系膜细胞泛丁酰化和H3K9丁酰化修饰均下调,MCP-1、IL-6的蛋白、TGF-β的蛋白及mRNA、Fn的mRNA表达均上调(均P<0.05)。结论NaB可能通过组蛋白丁酰化修饰途径,抑制肾脏炎症及纤维化基因表达,改善DKD肾脏损伤。
简介:摘要:探究同型半胱氨酸、糖化血红蛋白、C反应蛋白、尿微量白蛋白,这四项指标联合检测后对糖尿病肾病的病情判断研究。随机选定历城区人民医院就医者,随机选取2022年9月—2023年2月临床被诊断为糖尿病肾病的患者77例为糖尿病肾病组,统计被确诊为糖尿病的患者77例为单纯糖尿病组;随机选定同院同期相应的77例健康体检者设定为健康对照组。对三组患者均进行血清C反应蛋白、同型半胱氨酸、糖化血红蛋白、尿微量白蛋白四项指标的检测,三组数据进行对比分析,综合各项指标进行比较分析然后加以评定。经检测研究发现,单纯糖尿病组、糖尿病肾病组的血清C反应蛋白、同型半胱氨酸、糖化血红蛋白、尿微量白蛋白各项水平相对于健康对照组明显提升(P均<0.05)。健康对照组、单纯糖尿病组、糖尿病肾病组血清C反应蛋白、同型半胱氨酸、糖化血红蛋白、尿微量白蛋白水平相对提高,各组之间检测的生化指标水平比较差异具有统计学意义(P均<0.05)。同型半胱氨酸、C反应蛋白、糖化血红蛋白、尿微量白蛋白对以上四项指标共同检测对糖尿病肾病的诊断具有一定的价值研究。
简介:【摘要】 目的 评价低白蛋白血症患者输注人血白蛋白的临床效果。 方法 对我院2021年1月-2021年12月,收治的88例并发低白蛋白血症患者临床资料进行回顾性分析,分人血白蛋白输注组(n=44例)和对照组(n=44例)。两组患者均给予积极治疗原发病、常规对症及营养支持治疗。结果 对照组治疗后白蛋白水平高于人血白蛋白输注组,但两组比较无显著差异(P>0. 05);人血白蛋白输注组白蛋白升高值高于对照组,但两组比较无显著差异(P>0. 05);人血白蛋白输注组患者住院时间长于对照组,但无显著差异(P>0. 05)。结论 低白蛋白血症患者输注人血白蛋白临床效果不显著,应积极查找及处理低白蛋白的原因,减少盲目使用人血白蛋白,加强合理用药。
简介:摘要:目的:探讨尿蛋白和尿微量白蛋白在糖尿病肾病检验中的临床应用。方法:选取糖尿病(DM)患者98例为研究组,糖尿病病史均在10年以上,且确诊为糖尿病肾病(DN)。又将研究组分为两个亚组:早期DN组(58例)和显性DN组(40例)。另选择体检健康者60例为对照组。检测所有研究对象晨尿中的尿微量白蛋白(MAU)、α1-MGU、TRFU以及尿肌酐水平,并计算ACR。比较研究组与对照组以及早期DN组与显性DN组ACR、α1-MGU、TRFU水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析ACR、α1-MGU、TRFU检测对早期DN的诊断价值。结果:研究组ACR、α1-MGU、TRFU水平高于对照组(均P<0.05)。显性DN组ACR、α1-MGU、TRFU水平高于早期DN组(均P<0.05)。ROC曲线分析结果表明,ACR、α1-MGU、TRFU对早期DN均有一定的诊断价值,且三项联合检测的诊断价值更高(均P<0.05)。结论:尿微量白蛋白与尿小分子蛋白检测提高糖尿病肾病诊断效能,具有一定的应用价值。
简介:摘要:目的:探讨尿蛋白和尿微量白蛋白在糖尿病肾病检验中的临床应用效果。方法:研究对象为2022.2月至2023.2月我院收治的60例糖尿病肾病患者,将其作为观察组,另选同期我院60例健康体检者作为对照组,两组均接受尿蛋白和尿微量白蛋白检验,比较两组检验结果和阳性检出率。结果:观察组尿微量白蛋白水平及尿蛋白水平均明显高于对照组(P<0.05);观察组尿蛋白阳性检出率和尿微量白蛋白阳性检出率均明显高于对照组(P<0.05)。结论:对糖尿病肾病采用尿蛋白和尿微量白蛋白检验效果确切,能够为临床诊治提供依据,可作为早期检测的主要方法,值得临床应用。
简介:【摘要】 目的:研究早期肝肾综合征患者采用尿微量白蛋白、胱抑素C、α1微球蛋白、β2微球蛋白四项指标联合检测方式对病情实施诊断的临床价值。方法:选择2021年1月-2022年12月在我院接受治疗后证实为早期肝肾综合征的患者,及同期接受健康体检健康人资料各50例,分别将其定义为研究组和对照组。分别留取和采集研究对象的尿液和血液标本,采用我院现有仪器,通过免疫比浊法,对尿微量白蛋白、胱抑素C、α1微球蛋白、β2微球蛋白四项指标水平进行测定,对比检测结果及阳性率。结果:研究组研究对象尿微量白蛋白、胱抑素C、α1微球蛋白、β2微球蛋白四项指标检测结果均高于对照组,组间数据比较差异有统计学意义(P<0.05);研究组上述四项指标指标检测结果阳性率也均高于对照组,组间数据比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:早期肝肾综合征患者的尿微量白蛋白、胱抑素C、α1微球蛋白、β2微球蛋白四项指标水平,会明显异于正常健康人群,临床上可以将其作为,该类疾病诊断的重要参考依据,提高诊断准确性。