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  • 简介:κ-银环蛇毒素(κ-bungarotoxin,κ-BGT)属于突触后神经毒素,能选择性的识别α3β2亚型的神经元烟碱乙酰胆碱受体,可作为药理学研究的工具药。由于κ—BGT分离提取比较困难,难于从自然界中大量获取,无法满足各项研究的需要,所以本文探讨在大肠杆菌和毕赤酵母表达体系中表达κ—BGT及其在实验室规模生产的可行性。

  • 标签: 表达 银环蛇毒素 乙酰胆碱受体 药理学研究 亚型 基因
  • 简介:槲寄生(Viscumcoloratum(Komar.)Nakai)为桑寄生科槲寄生属半寄生常绿小灌木,分布于中国大部分省区,是一种传统中药材。其叶和小枝可入药,能治疗风湿麻痹、腰膝酸软、高血压、肝癌等症。实验研究的槲寄生样品采自吉林柳河,寄主为杨树,经鉴定为Viscumcoloratum(Komar.)Nakai。此前,国内对这种药材中的蛋白类活性成分鲜有研究,也未见有关槲寄生多肽的研究报道。论文较系统地开展了槲寄生水溶液提取物中多肽和蛋白质两类活性成分的提取、分离、纯化、结构鉴定以及活性评价等方面的工作,从中获得具有肿瘤细胞杀伤活性的槲寄生多肽,

  • 标签: 槲寄生 多肽 治疗 活性成分 麻痹 杀伤活性
  • 简介:为制备β-BGTA1链重组蛋白并进一步开展β-BGT的生物活性研究,在大肠杆菌中克隆了D—BGTA1链基因,从银环蛇毒腺中提取总RNA,经反转录PCR获得银环蛇毒素cDNA.根据β-BGTA链基因的保守序列设计引物,以银环蛇毒素cDNA为模板进行PCR扩增,将PCR产物连接到克隆载体pUCm-T,转入层coilTop10感受态细胞中,经蓝白斑筛选,PCR鉴定为阳性克隆后测序.测序证明获得了β-BGTA1链基因.测序获得的D—BGTA1链基因序列与文献报道的D—BGTA1链的基因序列一致.

  • 标签: PCR 蓝白斑筛选 阳性克隆 大肠杆菌 β-银环蛇毒素 A1链重组蛋白
  • 简介:为满足科研和医学应用上的需要,用基因工程的方法制备海蛇神经毒素。首先人工合成海蛇神经毒素Erabutoxin(Eb)的基因,重组到T载体。通过PCR扩增Eb基因,用限制性内切酶把基因片段酶切成黏性末端,然后将目标基因插入表达载体pPET22b(+),电转重组质粒到宿主菌BL21(DE3),在25℃0.5mmol/LIPTG诱导培养8h收获培养物,SDS-PAGE电泳检测目标蛋白大部分存在于包涵体中,用8mol/L尿素溶解后,利用C末端的His-6与Ni^2+离子亲和层析纯化,得到单一的电泳蛋白带。

  • 标签: 海蛇神经毒素 DNA克隆 基因表达 包涵体 亲和层析
  • 简介:对从一种水生贝类软体动物中分离的3种单一成分抗肿瘤糖蛋白T,V,Y3进行了体外抗肿瘤活性,等电点,氨基酸组成和糖苷键类型分析,结果表明T,V的抗肿瘤活性,等电点,氨基酸组成比较相似,而3则与T,V有较大的差异,T,V由O-型糖苷键构成,而Y3可能由N-型糖苷键构成;糖苷键类型的差异与三者在等电点,氨基酸组成,层析行为所表现的差异类似;蛋白质糖苷化修饰形成糖蛋白蛋白质中的丝氨酸,苏氨酸,天冬酰胺含量有密切的关系,但糖苷键类型不取决于丝氨酸,苏氨酸与天冬酰胺的相对比例。

  • 标签: 抗肿瘤糖蛋白 氨基酸组成 糖苷键构型 体外抗肿瘤活性
  • 简介:利用毛细管电色谱方法研究了在固定化人工膜基质上、不同pH值条件下电渗流的变化规律。考察了不同电压条件下,几种不同性质蛋白质的保留时间的变化规律。研究表明电驱动方式为蛋白质的分离提供了新的选择性。

  • 标签: 毛细管电色谱 固定化人工膜 蛋白质分离
  • 简介:根据知识经济的特点,阐述核心竞争力理论对防化R&D的适用性。阐述了从科学决策出发规划防化R&D的制高点,设想以建立各种创新平台等模式,实行重点突破,不断提高防化R&D核心竞争力.

  • 标签: 核心竞争力 科学管理 化学防护 实验创新