简介:目的采用NASBA技术,建立国境口岸志贺氏菌的快速检测方法.方法根据志贺氏菌侵袭性质粒抗原ipaH基因设计引物,进行NASBA检测,并采用人工添加菌株污染样品进行验证.结果NASBA技术检测志贺氏菌特异性强,能够从污染样品中扩增出391bp的特异性片段,试验中未出现假阳性和假阴性结果,灵敏度高,检出限达到8.2pg/μL总RNA;且检测周期短,NASBA反应在42℃90min即可进行有效扩增,24h即可完成样品中目标菌的筛选.结论因NASBA技术具有特异性强,灵敏度高,检测周期短等优点,不仅适用于国境口岸现场快速检测志贺氏菌,而且随着该技术的不断发展,必将有更为广阔的应用空间.
简介:以痢疾志贺氏菌为抗原免疫产蛋母鸡.从鸡卵黄中提取免疫球蛋白.建立抗痢疾志贺氏菌的特异性IgY的效价检测方法.并研究母鸡的免疫应答性以及抗体的提取方法和体外抑菌效果。研究结果表明:用10^8cfu/mL和1^9cfu/mL剂量的抗原分别免疫的鸡的卵黄中.于初洗免疫后的第12天出现抗痢疾志贺氏菌IgY,两组效价均为1:3600。经加强免疫后效价迅速上升,至第48天低剂量免疫组达到最高效价1:28800;第60天高剂量免疫组达到最高效价1:57600。低剂量免疫组的效价维持了210d,高剂量免疫组的效价在免疫后360d时仍维持在1:7200水平。用水稀释法、硫酸铵溶液分级盐析、SephadexG-25凝胶过滤CA提取IgY,提纯后IgY的效价翻倍。SDS—PAGE鉴定抗体的纯度,电泳图谱中出现抗体的轻链和重链两条带。体外抑茼实验表明,IgY能抑制痢疾志贺氏菌的生长.
简介:目的了解2010-2014年上海市各区县医院139株福氏志贺菌的耐药性,探讨福氏志贺菌对喹诺酮类药物的耐药机制。方法用纸片扩散法测定菌株对14种抗菌药物的敏感性,用环丙沙星E试验条测定其最低抑菌浓度;采用PCR法检测DNA旋转酶A亚单位(gyrA)、拓扑异构酶IVC亚单位(parC)基因的喹诺酮类药物耐药决定区(QRDR),同时对质粒介导喹诺酮类耐药(PMQR)基因qnrA、qnrB、qnrS和氨基糖苷乙酰转移酶变异基因aac(6′)-Ib-cr进行筛选。扩增产物进行DNA测序。结果福氏志贺菌对氨苄西林、链霉素、四环素、萘啶酸的耐药率都达到了90%以上,对环丙沙星的耐药率达到了40.3%,同时有30.2%菌株对头孢吡肟产生了耐药。gyrA和parC基因的突变率分别为98.6%和97.8%。gyrA基因存在Ser83、Asp87和His2113个位点的突变,parC基因只检测到Ser801个位点的突变;共检测到9株qnrS和6株aac(6′)-Ib-cr喹诺酮耐药质粒。结论上海地区福氏志贺菌耐药情况严重。QRDR相关基因突变率高,Asp87的突变对喹诺酮类抗菌药物的耐药起着主导作用,而耐药质粒起着重要的辅助作用。
简介:摘要目的分析健康人群体检中肠道沙门氏菌属和志贺氏菌属的带菌情况。方法分别对我市2010~2014年共32866份健康人员体内肠道沙门氏菌属和志贺氏菌属进行常规检测,分析其带菌率各自的血清型群分布情况。结果32866份健康人员检测结果中以沙门氏菌属为主,带菌率为0.28%,而志贺氏菌属带菌率为0.04%;91株沙门氏菌分别分布于A、B、C、D、E5个血清群和19个血清型,以B血清群为主;13株沙门氏菌分别分布于A、B、C、D4个血清群和8个血清型,以B血清群为主。结论肠道沙门氏菌属和志贺氏菌在健康人体内广泛存在,尤其以沙门氏菌居多,因此在日常检测工作中应特别注意。
简介:目的了解拉萨地区近年来志贺氏菌属的菌型分布及其耐药情况,为防治志贺氏菌引起的细菌性痢疾和急性胃肠炎提供合理依据。方法采集腹泻病人的新鲜粪便在麦康凯培养基上培养,把分离出的志贺氏菌作血清学鉴定,并按K—B法作药敏试验。结果71株志贺氏菌基本上是福氏志贺氏菌,占95.8%;而福氏志贺氏菌又以福氏2a型为主,占94.1%。药敏结果显示全部菌株对头孢菌素类药物的耐药率较低,在10%以下,对阿莫西林的耐药率较高在85%左右,而对青霉素则完全耐药,耐药率为:100%。结论拉萨市5年来志贺氏菌属以福氏2a型为主要流行菌群。志贺氏菌的耐药性有所增加,提示医师应合理用药以减少耐药菌株的增加。
简介:摘要目的通过常规检测分析了解我地区健康人群中肠道沙门氏菌属和志贺氏菌属的带菌情况。方法随机选取2014年7月~2017年6月间我地区14089例健康人群作为受检对象,采集所有受检对象的肛拭子作为标本分别进行肠道沙门氏菌属和志贺氏菌属常规检测,并进一步对所检菌属行血清型群分布分析。结果14089例健康人群中共检出沙门氏菌属44株、志贺氏菌属3株,带菌率分别为0.31%、0.02%;其中44株沙门氏菌主要分布于A、B、C、D、E共五个血清群的15个血清型中,其中以B血清群分布居多,共28株,占比63.64%,其次为C血清群、E血清群、A血清群、D血清群,分别为9株(20.45%)、4株(9.09%)、2株(4.55%)、1株(2.27%);3株志贺氏菌分布于A、B两个血清群的3个血清型中,其中A血清群分布1株(33.33%),血清型为痢疾志贺氏菌,B血清群分布2株(66.67%),血清型为福氏志贺氏菌1a型、福氏志贺氏菌b型。结论我地区健康人群中普遍存在肠道沙门氏菌属和志贺氏菌属,尤以沙门氏菌属居多,二者血清型群分布均较广,应密切关注并加强健康体检,避免阳性漏检并做好相关防范措施。
简介:摘要目的对志贺氏菌显色培养基上的假阳性菌进行鉴定,为进一步鉴别志贺氏菌并改良显色培养基提供数据。方法将本实验室前期分离自自来水管网生物膜的52株志贺氏菌显色培养基上假阳性菌,通过生化方法进行进一步鉴定。结果经鉴定52株菌均为革兰阴性非志贺氏菌,分别为9个属假单胞菌属(48.08%)、埃希氏菌属(17.31%)、枸橼酸杆菌属(13.46%)、不动杆菌属(7.69%)、普罗菲登斯菌属(3.85%)、弧菌属(3.85%)、肠杆氏菌属(1.92%)、变形杆菌属(1.92%)、寡养单胞菌属(1.92%)。结论有多种菌可能干扰显色培养基对自来水管网生物膜样本中志贺菌的分离鉴定,假单胞菌属的干扰性最大,需针对这些假阳性菌与志贺氏菌的生理生化特性改良志贺氏菌显色培养基。