简介：目的：通过在大肠杆菌中分段表达禽流感病毒聚合酶酸性蛋白（PA蛋白）,探索PA基因中可能影响表达的区域。方法：构建分段缺失的PA蛋白突变体,用IPTG在大肠杆菌RosettaGamiB（DE3）中诱导表达,比较各突变体的表达效率。结果：N端缺失长度在143～408个氨基酸残基之间的9个突变体在大肠杆菌中的表达水平较高;而突变体PA/K（Δ1-40aa）、PA/M（Δ1-56aa）、PA/N（Δ41-56aa）和PA/P（Δ57-75aa）的表达水平很低;全长PA蛋白和缺失N端20个氨基酸残基的突变体PA/L则检测不到表达。结论：PA基因的61～225bp和325～426bp可能是影响PA蛋白表达的2个重要区域,为下一步表达全长PA蛋白奠定了基础。

简介：目的：建立实时定量检测口腔内变形链球菌的实时定量聚合酶螺旋反应（PSR）方法。方法：针对变形链球菌的gtfB基因设计4套引物，通过实时浊度法和显色法两种方法判断结果。结果：从4套引物中筛选出最佳引物，并确定最佳温度为65％；进一步实验表明采用最佳引物能特异性地检测变形链球菌，与13种其他病原核酸无交叉反应，敏感性达10拷贝／μL。结论：建立了实时定量检测变形链球菌的PSR方法，该方法具有简单快速、特异性强、敏感性高的特点，为实时定量检测变形链球菌提供了新技术。

简介：目的：对传统酶联免疫吸附测定法（ELISA）进行优化改进，以提高其检测灵敏度，拓展应用范围。方法：通过在传统ELISA方法中引入原子转移自由基聚合反应（ATRP）和纳米金颗粒（GNPs），并将大量辣根过氧化物酶（HRP）与二抗结合，提高了HRP与抗原的结合比例，进而实现了对待检测物的信号放大。结果：优化后的ELISA方法在对β淀粉样蛋白的检测中，检测限（LOD）降低为原来的1／81。结论：改进后的ELISA方法性能稳定，灵敏度大幅提高，能够用于对痕量目标检测物的检测。