简介:摘要目的血管内皮细胞生长因子在血管再生和骨组织再生过程中起着重要的调节作用。观察hVEGF-165基因转染的兔骨髓间充质干细胞分泌VEGF的功能及转染后细胞的成骨活性。方法(1)体外分离、培养兔骨髓间充质干细胞,纯化并鉴定兔骨髓间充质干细胞;免疫荧光法检测细胞表面标志;传代培养后以1μgPcDNA3.1-hVEGF165∶3μL阳离子脂质体Lipofectamine的比例转染,通过ELISA和Western-blot检测转染后细胞中外源性VEGF的表达。(2)测定在正常条件培养和成骨条件培养下,转染后细胞上清中碱性磷酸酶、骨钙素的水平。结果(1)hVEGF165基因转染的骨髓间充质干细胞能成功分泌VEGF蛋白。(2)成骨条件培养下,基因转染组细胞碱性磷酸酶和骨钙素的分泌量明显高于未转染组(P<005);而在正常条件培养下,基因转染组细胞碱性磷酸酶和骨钙素的表达分泌量较低。结论(1)采用基因转染技术可将hVEGF165基因转染到骨髓间充质干细胞中并可有效表达具有生物活性的VEGF。(2)在成骨条件培养下,转染hVEGF165基因后骨髓间充质干细胞的成骨能力增强。
简介:摘要采用分子生物学手段对细菌耐药基因的检测,针对其编码基因的突变及其过度表达,对细菌同源性进行分析,控制细菌耐药流行播散发挥重要作用。
简介:摘要目的构建B-7.1基因真核表达载体并导入CAK-1肾细胞癌细胞表达,为进一步研究基因的功能做材料准备。方法采用RT-PCR方法,以正常肝脏组织cDNA为模板,扩增B-7.1基因全长读码框架,并构建到真核表达载体pCDNA3.1中,将其导入CAK-1肾细胞瘤细胞,对转染后的细胞进行RT-PCR和Westernblot分析。结果经过克隆测序结果证实,我们成功将B-7.1读码框架插入真核表达载体pCDNA3.1的相应位点,并且,与pCDNA3空载体转染对照细胞相比,pCDNA3-B-7载体转染的CAK-1细胞中B-7基因无论是mRNA水平还是蛋白水平均有明显升高。结论B-7.1转基因细胞株的成功构建和检测,为深入研究B-7.1蛋白的生物学功能奠定了材料基础。
简介:摘要目的监测伤寒沙门菌株对青霉素和其他抗生素的耐药情况。分析多重PCR基因扩增产物图谱与青霉素耐药性的相关性,分析血清型青霉素耐药菌株的脉冲电场凝胶电泳(PFGE)图型,初步了解耐药菌株分子流行病学上的特点。方法(1)抗生素药物敏感试验;(2)用聚合酶链反应(PCR)和限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)结果发现23株多重耐药鼠伤寒沙门菌,其中耐4~5种抗生素的9株(40%),耐6~9种抗生素的8株(35.13%),耐10种抗生素的6株(26.10%);可分为16个PFGE型,其中5个PFGE型的菌株数超过1株。结论伤寒沙门菌分离株的多重耐药性严重,PFGE分型方法对鼠伤寒沙门菌的分型能力较好。
简介:摘要目的研究高脂饲料诱导的胰岛素抵抗大鼠骨骼肌和肝脏脂联素受体(AdipoR)的表达。方法将20只SD大鼠随机分为胰岛素抵抗组(IR组)和对照组(NC组),分别饲以高脂饲料和普通饲料。12w后检测两组大鼠血糖(FPG)、脂联素(APN)、空腹胰岛素(FIns),计算胰岛素敏感性指数(ISI),检测骨骼肌和肝脏组织中AdipoRmRNA表达水平。结果IR组动物FIns水平升高,APN水平和ISI显著降低(P<0.05);骨骼肌中AdipoR1mRNA和肝脏组织中AdipoR2mRNA表达水平降低(0.74±0.25vs1.46±0.30,1.08±0.19vs1.52±0.21,P<0.05),差异有统计学意义。结论高脂饮食组的大鼠产生了胰岛素抵抗,AdipoRmRNA的表达量与胰岛素敏感性密切相关。
简介:摘要目的鼻咽癌是高转移和高侵袭性肿瘤,而且对现行的治疗方法有抵抗性。肿瘤转移相关基因MTA1是新近发现的肿瘤转移相关基因。本实验MTA1基因在人鼻咽癌细胞高低转移株5-8F和6-10B的表达水平以及低转移细胞株转染MTA1全长基因后侵袭能力的改变,探讨MTA1表达与鼻咽癌侵袭转移的相关性。方法两株细胞株中的MTA1表达通过半定量的RT-PCR进行检测,用细胞侵袭实验及细胞增值实验评价两株细胞株离体的增值及侵袭能力,并检测低转移株(6-10B)转染MTA1CDNA后MTA1的表达及侵袭能力的变化。结果高转移株5-8F中的MTA1的表达明显高于低转移株6-10B呈正相关,而且低转移株6-10B转染MTA1后其MTA1的表达及侵袭能力明显增加。结论在鼻咽癌细胞中MTA1同肿瘤的侵袭转移能力呈明显相关性,MTA1可以作为研究鼻咽癌转移及治疗的候选基因。
简介:摘要目的研究和提高妇科多功能射频治疗仪治疗子宫疾病的护理,让患者在微创、微痛或无痛治疗中得到高质量的护理服务。方法手术前有责任护士向患者讲解手术目的、好处、方法等,解除患着心理负担,术中有专职护士配合医生,确保手术高效、快捷,术后仍有责护负责患者的术后护理、出院指导、注意事项等。结果微创技术的开展既保证了手术质量,减轻了手术痛苦。
简介:摘要目的旨在探讨尼莫地平治疗血管性痴呆的临床疗效,及对血管性痴呆认知功能的影响。方法2008年1月~2009年5月共收治血管性痴呆患者60例,随机分为观察和对照组各30例,观察组口服尼莫地平30mg,每日3次,对照组口服吡拉西坦,3次/d,0.8mg/次,疗程3个月。观察比较两组的临床疗效,及两组治疗前后长谷川痴呆量表(HDS)、简易智能量表(MMSE)及日常生活能力量表(ADL)的评分变化情况。结果观察组的的总有效率(86.7%)明显高于对照组的总有效率(60.0%),两组总有效率经统计学分析,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组HDS、MMSE、ADL评分比较,差异无统计学意义,治疗后两组HDS、MMSE、ADL评分均较治疗前有明显提高,经统计学处理,差异有有统计学意义(P<0.05)。且两组间HDS、MMSE、ADL评分比较,经统计学处理,差异有显著性(P<0.05)。结论应用尼莫同治疗血管性痴呆疗效好,可以延缓病情恶化,减轻临床症状,改善记忆力、提高认知功能以及提高患者的日常生活能力,值得临床推广和应用。
简介:摘要目的探讨痛风患者不同糖代谢状态时的胰岛素抵抗(IR)与胰岛β细胞功能的演变,分析痛风合并糖代谢紊乱的代谢特征。方法2006年1月至2009年6月来我院就诊的96例痛风病人据75g口服葡萄糖耐量试验结果分为糖耐量正常组(NGT组,n=35)、糖调节受损组(IGR组,n=27)及糖尿病组(DM组,n=34)。测量身高、体重、血压,测定空腹血糖、空腹胰岛素、糖化血红蛋白(HbA1c)、血清尿酸、胆固醇、甘油三酯及C反应蛋白,计算体重指数(BMI)、稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-B)和胰岛素敏感指数(ISI)。结果DM组、IGR组和NGT组的BMI分别为(27.36±4.10)、(25.52±3.87)及(23.64±3.19)kg/m2、餐后2小时血糖(2hPG)分别为(18.25±7.03)、(10.12±085)及(6.75±0.45)mmol/L、空腹胰岛素分别为(17.58±6.35)、(14.92±5.72)及(8.51±4.56)IU/ml、HbA1c分别为(10.18±3.24)、(6.54±3.28)及(5.12±2.21)%、总胆固醇分别为(5.84±1.09)、(5.23±0.97)及(4.62±1.08)mmol/L、甘油三酯分别为(3.93±1.23)、(3.09±101)及(2.37±0.95)mmol/L、C反应蛋白分别为(4.98±2.02)、(3.79±1.29)及(3.07±1.26)mg/L、HOMA-IR分别为(1.22±0.21)、(1.12±0.20)及(0.93±0.14)比较,DM组和IGR组均高于NGT组,而DM组及IGR组ISI分别为(0.023±1.23)及(0.024±0.017)均低于NGT组(0052±0.026),差异有统计学意义(P<0.05)。NGT组、IGR组和DM组HOMA-B指数分别为(87.6±25.1)、(126.46±34.2)及(173.75±321)差异有统计学意义(F=11.892,P<0.05)。DM组糖尿病家族史阳性率(41.17%)高于NGT组(11.4%)。Logistic回归分析显示,年龄、BMI、SBP、甘油三酯、C反应蛋白、ISI与糖尿病独立相关,而尿酸与糖尿无相关性。结论痛风患者发生糖尿病表现为严重的胰岛素抵抗并β细胞功能缺陷,而痛风合并糖耐量异常(IGR)者主要表现为胰岛素抵抗,胰岛分泌功能受损较轻。重度胰岛素抵抗、胰岛β细胞分泌功能障碍、BMI增加、C反应蛋白增高、脂代谢异常、遗传易感性是痛风患者合并糖尿病的主要代谢特征。