简介：天冬氨酸蛋白酶是主要的蛋白水解酶之一,广泛存在于细菌、真菌、动物和植物中。近年来,对植物天冬氨酸蛋白酶的结构及功能研究有了一些进展。本文简要总结了植物天冬氨酸蛋白酶的结构,典型的植物天冬氨酸蛋白酶的加工产生成熟过程,植物天冬氨酸蛋白酶在植物生物胁迫、非生物胁迫、种子萌发、有性生殖过程及植物衰老等方面的功能。

简介：目的：探讨血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（cystatinC）和同型半胱氨酸（Hey）浓度与冠心病（CHD）的关系。方法：选择经冠状动脉造影检查的患者共162例．分为对照组（60例）、稳定型心绞痛组（50组）和急性冠脉综合征组（52例）三组，采用双抗夹心ELISA法检测血清cystatinC和Hcy的浓度，并进行统计学分析。结果：①冠心病患者血清cystatinC水平明显低于对照组，而Hcy含量显著高于对照组，且二者均与病情严重程度相关（P均〈0.01）；②冠心病患者血清cystatinC水平与Hcy呈负相关（r=～0．444，P〈0.01）；③冠心病患者的左室射血分数（LVEF）、二尖瓣环收缩期运动峰值速度（Sm）明显降低，且ACS组的降低较SAP组的更为明显（P〈0．01）；④冠心病患者血清cystatinC浓度与LVEF、Sm呈正相关（r=0．213～0．280，P〈0.05～〈0.01），反之，Hcy与LVEF、Sm呈负相关（r=-0．347～-0．403，P〈0.01）。结论：CystatinC、Hcy与冠心病的发生有密切关系，可以间接反映冠心病患者的病情程度及心脏功能；CystatinC对冠心病患者有一定的保护作用。

简介：摘要念珠菌是人体常见的机会性致病菌，在社会进步、医疗手段提高等多种因素综合作用下，侵袭性念珠菌病的发病率逐渐增高。目前临床上致病真菌耐药性日趋严重，亟需研发新的抗真菌药物。分泌型天冬氨酸蛋白酶在多种致病性念珠菌中都有发现，不仅参与念珠菌病的发生、发展过程，在其耐药过程中也发挥重要作用，该酶的抑制剂有望发展成为新型抗真菌药物，解决目前抗真菌治疗的难点。

简介：摘要蛋白质-L-异天冬氨酸(D-天冬氨酸)-甲基转移酶(PCMT1)是一种修复酶，在人体组织中广泛表达，可以催化异构化的天冬氨酸残基转化为正常结构。PCMT1具有双重细胞功能，可作为RNA高甲基化酶和转录辅因子，参与信号转导和转录调控等重要的生物学过程。PCMT1基因的多态性亦与多种疾病有关。PCMT1可抑制神经元细胞和心肌细胞凋亡，参与调节代谢，并且与胚胎发育和衰老相关。此外，PCMT1在多种肿瘤组织中高表达，是多种肿瘤性疾病的不利预后因素，其可抑制肿瘤细胞的凋亡，协助肿瘤细胞的侵袭和转移，调节肿瘤血管的生成，并且可促进耐药性的产生。未来PCMT1可能作为若干疾病诊断和治疗的新靶点。

简介：继与德国吕贝克大学RolfHilgenfeld教授课题组合作解析出恶性疟原虫半胱氨酸蛋白酶falcipain-2的晶体结构后fJournalofBiologicalChemistry，2006，281：25425-25437），中国科学院上海药物研究所蒋华良课题组与华东理工大学药学院李洪林、李剑和德国吕贝克大学RolfHilgenfeld教授等合作，综合运用计算药物设计、药物化学和分子生物学方法和技术。发现了20余个活性及多样性较好的falcipain-2非肽类小分子抑制剂。

简介：无

简介：摘要半胱氨酸蛋白酶抑制剂C是由有核细胞产生的蛋白酶抑制剂,随着医学上对血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的深入研究,发现其不仅在肾脏疾病方面有临床价值,而且在肝脏疾病、糖尿病、肿瘤等方面也具有一定的价值.本文旨在研究血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的测定方法及临床应用。

简介：摘要目的观察叔丁基对苯二酚对脑缺血再灌注后大鼠线粒体通路第2个天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶激活物（Smac）和凋亡抑制蛋白（XIAP）表达的影响。方法2019年3-12月选取45只健康雄性SD大鼠，对大鼠进行随机编号并采用随机数表法分为假手术组、模型组与叔丁基对苯二酚组。通过结扎大鼠左颈动脉法建立脑缺血再灌注模型，并检测各组大鼠神经功能评分，剔除造模失败大鼠，每组各保留10只大鼠。分别于大鼠脑缺血再灌注后0.5 h、12 h对各组大鼠进行药物灌胃治疗，叔丁基对苯二酚组采用12.5 mg/kg叔丁基对苯二酚灌胃，假手术组与模型组采用等体积0.9%氯化钠注射液灌胃。再灌注24 h后，检测各组大鼠神经功能评分，之后处死大鼠，断头取脑。通过TUNEL法检测各组大鼠神经细胞凋亡情况；采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠脑组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）表达水平；通过免疫组化法与蛋白质印迹法（Western blot）分别检测大鼠XIAP、Smac阳性细胞计数与蛋白表达水平。结果叔丁基对苯二酚组大鼠神经功能评分为（1.36±0.49）分，明显低于模型组的（3.73±0.97）分（t=6.896，P<0.001），缺血侧皮质区仍可见大量神经细胞凋亡，但数量少于模型组。模型组大鼠脑组织SOD水平明显低于假手术组，MDA、TNF-α、IL-1β水平明显高于假手术组［SOD：（51.94±3.46）U/mg<（70.68±2.67）U/mg，t=13.560，P<0.001；MDA：（5.69±0.78）nmol/mg>（1.20±0.96）nmol/mg，t=11.479，P<0.001；TNF-α：（89.36±9.84）pg/mg>（40.53±4.35）pg/mg，t=14.353，P<0.001；IL-1β：（41.35±6.79）pg/mg>（17.22±2.31）pg/mg，t=10.639，P<0.001］。叔丁基对苯二酚组大鼠脑组织SOD水平相对模型组明显上调，MDA、TNF-α、IL-1β水平明显下降［SOD：（51.94±3.46）U/mg<（68.84±5.03）U/mg，t=8.754，P<0.001；MDA：（5.69±0.78）nmol/mg>（2.46±0.48）nmol/mg，t=11.153，P<0.001；TNF-α：（89.36±9.84）pg/mg>（57.64±6.22）pg/mg，t=8.617，P<0.001；IL-1β：（41.35±6.79）pg/mg>（23.84±5.48）pg/mg，t=6.346，P<0.001］；模型组大鼠XIAP、Smac阳性细胞计数及表达水平均明显高于假手术组［阳性细胞计数：XIAP：（22.63±4.37）>（12.39±3.18），t=5.992，P<0.001；Smac：（47.58±6.94）>（5.64±1.35），t=18.759，P<0.001，蛋白表达量：XIAP：（0.53±0.08）>（0.24±0.05），t=9.721，P<0.001；Smac：（0.92±0.15）>（0.36±0.05），t=11.200，P<0.001］，叔丁基对苯二酚组大鼠XIAP阳性细胞计数及表达水平均明显高于模型组，Smac阳性细胞计数及表达水平均明显低于模型组［阳性细胞计数：XIAP：（36.78±5.26）>（22.63±4.37），t=6.543，P<0.001；Smac：（31.74±4.26）<（47.58±6.94），t=6.151，P<0.001，蛋白表达量：XIAP：（0.79±0.10）>（0.53±0.08），t=6.420，P<0.001；Smac：（0.70±0.09）<（0.92±0.15），t=3.977，P<0.001］。结论叔丁基对苯二酚能够有效减少脑缺血再灌注后神经细胞凋亡，降低脑组织氧化应激及炎性反应，其作用可能与调节XIAP、Smac信号通路有关。

简介：摘要目的探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体、炎性因子、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)与烧伤合并吸入性损伤的预后相关性。方法回顾性分析2015年3月至2019年12月北海市人民医院烧伤外科收治的47例烧伤合并吸入性损伤患者的临床资料。根据患者住院期间病情恢复情况分为预后良好组(n＝19)和预后不良组(n＝28)。收集2组患者的临床资料，包括患者性别、年龄、烧伤后入院时间、烧伤面积、烧伤深度；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法分别检测血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及外周血单个核细胞中NLRP3炎性小体mRNA、Caspase-1 mRNA水平。数据行t检验、χ2检验或Fisher确切概率法、多因素Logistic回归分析及Pearson相关性分析。结果2组患者性别、年龄、烧伤后入院时间、烧伤面积、烧伤深度、IL-6比较，差异均无统计学意义(P值均大于0.05)。预后良好组患者IL-1β、IL-18、NLRP3炎性小体mRNA、Caspase-1 mRNA表达水平分别为(37.28±6.54) pg/mL、(38.26±8.79) pg/mL、1.75±0.35、1.15±0.27，预后不良组患者IL-1β、IL-18、NLRP3炎性小体mRNA、Caspase-1 mRNA表达水平分别为(49.46±8.87) pg/mL、(76.83±10.58) pg/mL、2.23±0.41、1.94±0.36, 2组比较差异均有统计学意义(t＝5.11、13.10、4.17、8.13，P值均小于0.05)；多因素Logistic回归分析显示，IL-1β、IL-18、NLRP3炎性小体mRNA、Caspase-1 mRNA表达水平是导致烧伤合吸入性损伤预后不良的独立危险因素(β＝1.56、0.87、1.05、1.11，P值均小于0.05)。经Pearson相关分析显示，IL-1β、IL-18、NLRP3炎性小体mRNA、Caspase-1 mRNA水平与烧伤合并吸入性损伤预后不良呈正相关(r＝0.42、0.39、0.52、0.56，P值均小于0.05)。结论IL-1β、IL-18、NLRP3炎性小体、Caspase-1的水平异常升高可作为烧伤合并吸入性损伤患者预后不良的特征指标，可根据上述指标指导临床进行早期救治，有助于降低烧伤合并吸入性损伤患者的病死率。

简介：摘要目的探讨血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cysc-C)在糖尿病肾病(DN)早期临床价值。方法对75例正常者和87例糖尿病进行血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C测定。结果糖尿病肾病患者血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C明显高于健康者,两组比较差异有非常显著性(p<0.01)。结论检测血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C是诊断糖尿病早期肾脏损害程度灵敏指标,可作为临床早期诊断可靠依据。

简介：目的通过动物实验验证广谱半胱氨酸蛋白酶抑制剂（ZVAD）是否可以保护耳蜗毛细胞免受噪声损害。方法选取三月龄健康小鼠，分为无噪声暴露组（DMSO）、单纯噪声暴露组（DMSO±Noise）及噪音±zVAD（zVAD±N0ise）组。依照动物体重计算，按照1．5mg／kg，噪音±ZVAD动物经腹腔注射ZVAD五次，其余组动物相同时间点腹腔注射DMSO作为对照。动物经噪声暴露后，于噪声暴露后一小时处死取耳蜗基底膜铺片，在激光共聚焦显微镜下照片，检测活性半胱氨酸蛋白酶8（caspase8）和caspase9的表达，或于噪声暴露后两周行听力检测，观察ZVAD对噪声所致耳聋的影响。结果噪音暴露后耳蜗外毛细胞中活性caspase8和caspase9的表达明显增强，腹腔注射ZVAD可明显抑制两种活性caspase的表达增强。同时对于噪声引起的小鼠听力下降（ABR阈移16KHz：52．5±6．1dB和32KHz：51．8±6．9dB），腹腔注射ZVAD有一定的保护作用（ABR阈移16KHz：37．3±9．8dB和32KHz：39．5±10．5dB），ABR检测注射ZVAD的噪音暴露小鼠18KHz及32KHz听力阈移均较单纯噪音暴露组明显减小（P〈0．05）。结论ZVAD对噪声所致小鼠听力下降有一定的保护作用。

简介：目的本文通过多中心病例．对照研究，拟探讨CystatinC基因启动子区多态性位点rs2897119（-177C／T）和rs6114208（-1704C／G）与中国人脑卒中和血浆中半胱氨酸水平的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）分析技术，检测脑卒中组520例（血栓性脑梗塞组211例，腔隙性脑梗塞组145例，脑出血组164例），和非脑卒中对照组630例CystatinC基因多态性的分布。用高效液相色谱仪和荧光检测仪测定血浆总Hey水平。结果脑卒中组和对照组CystatinC基因rs2897119和rs6114208多态性基因型频数分布符合Hardy-Weinber平衡。两组rs2897119和rs6114208多态性基因型和等位基因型分布差异无明显统计学意义。各亚型组与对照组的基因型和等位基因型相比差异也均无显著统计学意义。两组多态性基因型与相应血浆同型半胱氨酸的水平也无显著统计学意义。结论CystatinC基因多肽位点rs2897119（-177C／T）和rs6114208（-1704C／G）与中国人脑卒中和血浆同型半胱氨酸的水平不存在关联关系。CystatinC基因多肽位点rs2897119和rs6114208可能不是中国人脑卒中的遗传影响因素。

简介：摘要：目前，具有高度生物相容性的氨基酸作为添加剂与氢氧化钙结合生成的氨基酸钙螯合物已得到广泛的关注和研究。Hua等发现Asp通过提高成核速率和抑制晶体生长而得到了晶型完美的氨基酸钙。Manoli F.等在氢氧化钙中添加谷氨酸，对其成核、结晶过程进行了详细研究和追踪报道。Hood等发现结构不同的氨基酸对无机钙盐的晶核生长的作用大相径庭，并且经过分析比较发现天冬氨酸对强氧化钙的稳定性是最好的，谷氨酸次之，亮氨酸的效果最差。Guo等选用三种不同的氨基酸：缬氨酸、丝氨酸、精氨酸，与无机钙盐混合反应，制备出了三种结构完全不同的氨基酸钙，这表明了无机钙可以与多种氨基酸发生络合反应。经过以上的研究总结，我们发现天冬氨酸与氢氧化钙的螯合物-天冬氨酸钙稳定性最好。天冬氨酸钙作为有机钙中的一员，不仅生物活性很好，而且它的化学结构十分稳定、水溶性好、易于被动物体吸收、利用率很高，几乎无毒副作用,且生物学价值明显高于无机钙盐, 对促进生物体的生长和提高机体免疫力等作用十分显著。因此，为了适应人体对钙元素的大量需求和国内广阔的市场，对于天冬氨酸钙合成与提纯进行进一步的研究是目前迫在眉睫的任务，本研究以L-天冬氨酸和氢氧化钙为原料，合成一种纯度高的天冬氨酸钙。

简介：摘要目的探讨血清半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白C（CysC）、血清和糖皮质激素调节激酶1（SGK1）、同型半胱氨酸（Hcy）与肺癌患者术后淋巴结转移的相关性及预测价值。方法前瞻性选择2016年11月至2018年6月眉山市中医医院收治的行肿瘤切除、系统性淋巴结清扫术治疗的131例Ⅰ~ⅢA期非小细胞肺癌（NSCLC）患者，术后随访3年，按照随访期是否发生淋巴结转移分为转移组（42例）和未转移组（89例）。术后次日检测患者血清CysC、SGK1、Hcy水平，比较不同TNM分期、分化程度、组织学类型患者CysC、SGK1、Hcy水平，比较术后是否转移组间临床病理特征及3个指标水平的差异；采用Spearman法分析3个指标与患者临床病理特征的关系；采用多因素logisitic回归模型分析术后淋巴结转移的影响因素（CysC、SGK1、Hcy以中位水平为临界值，>中位水平为水平高）；以病理检查结果为金标准，应用受试者工作特征（ROC）曲线分析3个指标水平单独及联合对术后淋巴结转移的预测价值。结果TNM分期ⅢA期患者血清CysC、SGK1、Hcy水平均高于Ⅰ~Ⅱ期患者，肿瘤低分化患者均高于中高分化患者，非鳞状细胞癌患者均高于鳞状细胞癌患者，差异均有统计学意义（均P<0.05）。Spearman相关性分析显示，血清CysC、SGK1、Hcy水平与患者TNM分期（r值分别为0.454、0.672、0.645）、分化程度（r值分别为-0.399、-0.403、-0.451）、组织学类型（r值分别为0.528、0.760、0.611）有相关性（均P<0.001）。转移组血清CysC[（1.37±0.30）mg/L比（1.16±0.25）mg/L]、SGK1[（53±4）pg/ml比（41±3）pg/ml]、Hcy[（18.3±2.3）μmol/L比（15.4±1.8）μmol/L]水平均高于未转移组（均P<0.001）。多因素logistic回归分析显示，TNM分期ⅢA期（OR＝2.944，95% CI 1.556~6.847，P＝0.004）及CysC水平高（>1.23 mg/L，OR＝2.431，95% CI 1.402~5.226，P＝0.008）、SGK1水平高（>50 pg/ml，OR＝4.010，95% CI 1.815~11.748，P＝0.004）、Hcy水平高（>16.8 μmol/L，OR＝3.742，95% CI 1.747~9.142，P＝0.001）是术后淋巴结转移的独立危险因素。ROC曲线分析显示，血清CysC、SGK1及Hcy水平单独预测术后淋巴结转移的曲线下面积（AUC）分别为0.769、0.808、0.816，CysC+Hcy、CysC+SGK1、Hcy+SGK1预测的AUC分别为0.889、0.890、0.910，3个指标联合预测的AUC为0.936。结论NSCLC术后转移患者血清CysC、SGK1及Hcy水平均高于未转移患者；三者的水平与患者TNM分期、组织学类型正相关，与分化程度负相关；三者联合检测对NSCLC患者术后淋巴结转移具有较好的预测价值。

简介：目的：以L－半胱氨酸和吲哚为底物，利用色氨酸酶基因工程菌WW－11酶法合成L－色氨酸。方法：以IPTG诱导基因工程菌色氨酸酶表达，将酶活最高时的工程菌游离细胞作为转化反应的酶源，通过纸层析和氨基酸自动分析仪分析并测定转化液中L－色氨酸的含量，结果：80mL反应液（L－半胱氨酸0．75g,吲哚75g)37℃反应48h，可积累L－色氨酸1．18g,L-半腕氨酸转化率为93．2％，吲哚转化率为90．1％，经分离纯化所得的L－色氨酸晶体，在熔点，旋光性和红外吸收光谱等方面与标准品完全一致，结论：色氨酸酶基因工程菌能有效地催化L－半胱氨酸和吲哚合成L－色氨酸，这种酶合成法是工业化生产L－色氨酸较为有效的方法之一。

简介：摘要目的评价血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（CystatinC）在糖尿病肾病中的诊断价值。方法78例糖尿病患者按白蛋白排泄率（UAER）分为3组，正常蛋白尿组(Ⅰ组)21例，微量蛋白尿组(Ⅱ组)30例和大量蛋白尿组(Ⅲ组)27例，设立对照组(健康体检合格者)。测定各组CystatinC、血清肌酐（Scr）、肌酐清除率（Ccr）。进而对各指标使用SPSS11.0统计软件进行比较分析和相关性分析。结果在糖尿病患者中所测的CystatinC平均值高于对照组（P<0.05），而血清肌酐在Ⅰ组和Ⅱ组中所测的平均值并无明显差别，且CystatinC与Ccr的相关性较Scr与Ccr的相关性好。结论血CystatinC对2型糖尿病肾病的早期诊断较血清肌酐更敏感。

简介：目的探讨白假丝酵母菌分泌型天冬氨酸蛋白酶（SAP）与重症婴幼儿龋（S-ECC）的相关性。方法以S-ECC患儿和无龋儿童口腔内的白假丝酵母菌临床分离菌株共40株为研究对象,分别采用YNB-BSA琼脂平板法及以牛血清白蛋白为底物配合四甲基偶氮唑盐法对比测定SAP蛋白酶活力,比较两组间SAP水平的差异;并分析SAP水平与25SrDNA基因分型的相关性。结果全部白假丝酵母菌菌株均表现为SAP蛋白酶阳性,且两种检测方法均显示S-ECC组的SAP蛋白酶水平（0.36±0.03、1.59±0.92）高于无龋组者（0.39±0.05、0.79±0.26）,差异具有统计学意义（P=0.013、P〈0.001）;40株白假丝酵母菌25SrDNA基因型分为A、B、C三型,B型仅在S-ECC组出现,S-ECC组白假丝酵母菌A、B、C三型的SAP蛋白酶活力间差异无统计学意义（P=0.323、P=0.492）。结论白假丝酵母菌SAP表达水平升高可能与S-ECC的进展密切相关;但其酶活力高低与25SrDNA基因分型并无明显相关性。

简介：目的构建白假丝酵母菌天冬氨酸蛋白酶真核表达质粒pcDNA3．1／SAP2．为以其作为基因疫苗进行免疫动物实验奠定物质基础。方法从白假丝酵母菌中提取基因组DNA，以其为模板采用聚合酶链反应（PCR）法获取SAP2基因，将真核表达质粒pcDNA3．1（＋）myc-HisC和SAP2基因行EcoRI和XhoI双酶切，琼脂糖凝胶纯化，连接酶切产物，转化TOP10感受态细菌，筛选菌落和测序鉴定。结果经PCR扩增获得的目的基因分子量与预计相同，并定向插入真核表达载体pcDNA3．1（＋）myc-HisC，电泳获得预期的SAP2条带,测序证实为正确的SAP2序列。结论利用真核表达质粒pcDNA3．1（＋）myc-HisC可以方便而高效地构建pcDNA3．1／SAP2重组质粒，该质粒能直接激活抗原提呈细胞，可以使重组质粒具有较强的免疫原性和免疫反应性。

简介：肾小球滤过率（glomerularfiltrationrate，GFR）是反映肾脏功能的重要指标，临床上通常用血尿素氮（bloodureanitrogen．BUN）、血清肌酐serumcreatinine，Ser）和内生肌酐清除率（endogenouscreatinineclearancerate，Ccr）来反映GFR。目前认为，半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（cystatinC，Cys—C）是反映慢性肾脏病时GFR较为理想的内源性标志物。我们测定了103例不同肾功能损害患者的血清Cys—C浓度，以探讨血清CyS-C对肾小球滤过功能受损的意义。

简介：肾小球滤过率（GFR）是评价肾脏功能的重要指标，肾脏功能主要是通过肾小球的滤过及肾小管的重吸收和分泌，排出代谢产物，维持水、电解质、酸碱平衡。半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cys—C）可自由透过’肾小球基底膜，且披近曲小管吸收，同时无’肾小管的分泌，在所有组织中产生速率是恒定的，不受人体肌肉量、代谢、年龄、性别及炎症等因素的影响，是反映GFR的理想的内源性标志物。