简介:目的建立胆管内灌注胶原酶分离胰岛与适宜孔径滤网过筛相结合的快速纯化胰岛细胞的方法并评估这种方法的效果。方法清洁级8~12周龄Sprague-Dawley大鼠胆总管内灌注胶原酶消化、分离胰岛,分别采用Ficoll不连续密度梯度离心法和两次经不同孔径滤网过滤的两步过筛法纯化胰岛细胞,行双硫腙(dithizone,DTZ)染色、吖啶橙/碘丙啶(acridineorange/propidiumiodide,AO/PI)双色荧光染色法分析分离胰岛的纯度与活率;行葡萄糖刺激—胰岛素释放试验检测细胞活性;采用免疫组化荧光染色法观察胰岛细胞胰岛素的合成功能。结果大鼠两步过筛法和胰岛密度梯度离心法胰岛细胞收获量分别782±115胰岛当量(IEQ)和598±135IEQ,差异有统计学意义(P〈0.01);纯度分别为90%~100%和65%~85%,活率分别为〉95%和85%~95%。两步过筛法分离的胰岛葡萄糖刺激—胰岛素释放试验显示培养24h后,高糖实验组胰岛素浓度(76.9±6.1μg/L)显著高于刚分离纯化后即加入高糖刺激时的浓度(49.4±3.9μg/L),差异有统计学意义(P〈0.01)。结论两步过筛法分离纯化大鼠胰岛可获得纯度高、活率高且活性好的大鼠胰岛细胞。
简介:摘要过去几十年来,我国都是在计划经济的大环境下,采用的是定额计价,这种在计划经济下形成的由政府定价的行为显然已经不能适应当前社会的需要,急需建立一个适应市场经济条件下的计价方式。因此,跳出传统的工程预算定额编制,及预算计价方式,编制适用于工程量计算计价办法的计价规律是十分必要的,由此工程量清单计价诞生了。
简介:摘要目的比较全自动分离机和传统手工制备的洗涤红细胞的质量。方法将24袋的1U(200ml)红细胞悬液随机分为两组进行洗涤制备全自动血液分离机洗涤组和传统手工法洗涤组,对制备的洗涤红细胞的血红蛋白含量、储存期末溶血率、上清蛋白含量进行检测作比较。结果全自动血液分离机法与传统手工法制备的洗涤红细胞的血红蛋白含量无显著性差异(P>0.05),但全自动血液分离机洗涤法储存期末溶血率和上清蛋白含量低于传统手工洗涤法,其二者存在显著性差异(P<0.05),且制备效率提高。结论CompomatG4全自动血液分离机制备洗涤的红细胞比传统手工制备的洗涤红细胞的质量好,可以替代手工法制备洗涤红细胞。