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  • 简介:摘要目的探讨亚低温对脑缺血灌注损伤的治疗作用及其分子机制。方法30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和亚低温组,亚低温组大鼠采用头部亚低温(33 ℃~35 ℃)预处理3 h,假手术组和模型组不做处理。采用苏木精-伊红(HE)染色分析大鼠脑组织形态变化;采用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法分析梗死面积;采用原位缺口末端标记法(TUNEL)染色法测定大鼠脑组织细胞细胞凋亡;采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析自噬相关基因Beclin1、Atg7和Atg5表达水平;采用蛋白质印迹法(Western blot)分析自噬底物p63和LC3-Ⅱ表达水平。计量数据采用单因素方差分析。结果亚低温组大鼠神经功能评分[(1.90±0.74)分]明显低于模型组[(3.40±0.70)分],差异有统计学意义(t=4.666,P<0.05)。亚低温组大鼠运动功能评分[(6.40±0.97)分]明显低于模型组[(3.60±1.17)分],差异有统计学意义(t=5.846,P<0.05)。亚低温组大鼠脑组织梗死百分比[(24.79±2.57)%]明显低于模型组[(46.91±5.79)%],差异有统计学意义(t=4.855,P<0.05)。亚低温组大鼠脑组织细胞凋亡比例[(28.04±7.19)%]明显低于模型组[(63.76±5.79)%],差异有统计学意义(t=12.110,P<0.05)。亚低温组大鼠脑组织Beclin1和Atg7 mRNA表达水平(1.96±0.08;1.83±0.14)明显高于模型组(1.44±0.08;1.65±0.97),差异有统计学意义(t=14.550、9.849,P<0.05)。亚低温组大鼠脑组织p62和LC3-Ⅱ相对表达水平(1.40±0.09、1.39±0.11)明显低于模型组(0.84±0.04、0.88±0.07),差异有统计学意义(t=18.200、12.210,P<0.05)。结论亚低温处理可显著促进脑组织细胞自噬基因表达,促进细胞自噬,对脑缺血灌注损伤起到保护作用。

  • 标签: 亚低温 脑缺血再灌注损伤 凋亡 自噬
  • 简介:摘要目的探讨基质相互作用分子1(STIM1)对脑缺血灌注损伤后小胶质/巨噬细胞M1型活化的影响及机制。方法(1)动物实验:采用随机数字表法将20只雄性C57BL/6J小鼠分为假手术组、大脑中动脉缺血灌注(MCAO/R)组、MCAO/R+si-Ctrl组及MCAO/R+si-STIM1组,后3组小鼠建立MCAO/R模型,MCAO/R+si-Ctrl组及MCAO/R+si-STIM1组小鼠分别转染空载体对照病毒和STIM1基因敲除慢病毒。观察STIM1转染效率及各组小鼠中小胶质/巨噬细胞M1型活化标记物分化抗原86(CD86)的表达情况。(2)细胞实验:将原代小胶质细胞分为Ctrl组、氧糖剥夺/复氧(OGD/R)组、OGD/R+si-Ctrl组、OGD/R+si-STIM1组、OGD/R+溶媒组及OGD/R+4-苯基丁酸(4-PBA)组。后5组细胞构建OGD/R模型,OGD/R+si-Ctrl组、OGD/R+si-STIM1组细胞分别转染空载体对照病毒和STIM1基因敲除慢病毒;OGD/R+4-PBA组细胞在OGD/R造模前24 h使用1 mmol/L预处理1 h以抑制内质网应激(ERS),OGD/R+溶媒组细胞同时间使用0.5%二甲基亚砜(DMSO)预处理1 h。采用Western blotting、ELISA、RT-qPCR等方法检测细胞模型中小胶质/巨噬细胞M1型活化标记物CD86、炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α) mRNA、IL-1β及ERS相关蛋白[转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)、活化转录因子4(ATF4)]的表达情况。结果(1)动物实验:MCAO/R+si-STIM1组STIM1表达水平较假手术组、MACO/R组及MCAO/R+si-Ctrl组均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与MCAO/R组及MCAO/R+si-Ctrl组比较,MCAO/R+si-STIM1组小鼠缺血灶周围CD86与Iba-1共表达的小胶质/巨噬细胞数显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)细胞实验:与OGD/R组及OGD/R+si-Ctrl组相比,OGD/R+si-STIM1组细胞STIM1、CD86、TNF-α mRNA表达水平及上清液中IL-1β含量均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。同样地,与OGD/R组及OGD/R+si-Ctrl组相比,OGD/R+si-STIM1组细胞ERS相关蛋白ATF4、CHOP表达水平亦显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。此外,与OGD/R组及OGD/R+溶媒组相比,OGD/R+4-PBA组细胞中CD86表达水平、TNF-α mRNA表达水平及IL-1β含量均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论STIM1通过调控ERS水平影响脑缺血灌注损伤后小胶质/巨噬细胞的M1型活化。

  • 标签: 小胶质/巨噬细胞 内质网应激 缺血性脑卒中 基质相互作用分子1
  • 简介:摘要:现代公路桥梁工程建设规模持续扩大,为适应复杂的野外岩土工程地质环境,桩基础钻孔灌注桩施工技术的应用尤为重要。钻孔灌注桩施工技术的使用优势非常明显,具有施工操作流程简单、施工效率快、承载力强等多方面优势,可以有效提高公路桥梁基础结构的承载能力和稳定性。基于此,本文对公路桥梁工程建设钻孔灌注桩技术特点展开分析,提出钻孔灌注桩施工关键问题,做好每个施工环节的技术把控工作,提高钻孔灌注桩成型质量和效果,延长公路桥梁的使用寿命,使项目工程建设单位实现更高的社会、经济效益。

  • 标签: 公路桥梁 桩基础 钻孔灌注桩 技术 研究
  • 简介:摘要目的评价针灸治疗膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)疗效和安全性的系统评价/meta分析的方法学质量和结局指标证据质量。方法检索中国知识资源总库(CNKI)、中文科技期刊数据库(维普网)、中国学术期刊数据库(万方数据)、中国生物医学文献数据库(CBM)、PubMed、Cochrane Library、Embase数据库,收集已发表的有关针灸治疗KOA的系统评价/meta分析,检索时间均为建库至2020年12月15日。采用AMSTAR2量表评价纳入文献的方法学质量,采用GRADE系统对结局指标进行质量分级。结果共纳入11篇系统评价,包含44个结局指标。使用AMSTAR2量表进行方法学评价显示:11篇文献均为极低质量;使用GRADE系统评价工具进行质量分级显示:中级证据13个,低级证据12个,极低级证据19个。结论现有系统评价的结果显示,针灸治疗膝骨关节炎具有一定的疗效,但纳入研究的方法学和证据等级较低,因此该结论尚需更多高质量研究予以验证。

  • 标签: 骨关节炎,膝 针灸 疗效 Meta分析 系统评价再评价