简介：摘要目的采用1-溴丙烷(1-bromopropane，1-BP)诱导大鼠认知功能障碍，探讨神经炎性反应在1-BP致中枢神经毒性中的作用。方法60只清洁级雄性Wistar大鼠按照随机数字表法分为对照组(Control组)、1-BP组、吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamate，PDTC)组(PDTC组)和PDTC+1-BP组，每组15只。1-BP组和1-BP+PDTC组大鼠灌胃800 mg/kg的1-BP，Control组和PDTC组大鼠给予等体积玉米油，1次/d，连续灌胃12 d；PDTC组和PDTC+1-BP组在灌胃30 min后腹腔注射100 mg/kg的PDTC，Control组和1-BP组注射等体积生理盐水，1次/d，连续干预12 d。实验第7~12天每组随机取10只大鼠采用Morris水迷宫检测大鼠神经行为学指标，定位航行实验检测大鼠的学习记忆能力，空间探索实验评价大鼠对空间位置的记忆能力。行为学实验结束后，每组随机选取10只大鼠处死，分离大脑前额叶皮质，采用Western blot检测NF-κB的激活情况，qRT-PCR检测TNF-α及IL-1β mRNA水平；每组剩余5只大鼠经体内灌注固定后，取大脑制作冷冻切片，采用免疫组化染色和尼氏染色观察胶质细胞激活及神经元损伤情况。采用SPSS 20.0对实验数据进行统计学处理，游泳总距离和逃避潜伏期数据采用重复测量方差分析，穿越平台次数及其他数据采用单因素方差分析，进一步两两比较采用Turkey’s检验。结果Morris水迷宫结果显示，各组大鼠游泳总距离的组别和训练时间交互作用显著(F＝3.762，P<0.05)。简单效应分析显示，1-BP组大鼠第1~4天的游泳总距离均长于Control组(均P<0.05)，而PDTC+1-BP组大鼠第1~4天的游泳总距离均短于1-BP组(均P<0.05)。各组大鼠逃避潜伏期的组别和训练时间交互作用显著(F＝6.541，P<0.01)。简单效应分析显示，与正常Control组相比，1-BP组大鼠的逃避潜伏期在第1~4天均长于Control组(均P<0.05)，而PDTC+1-BP组的逃避潜伏期在第1~4天均短于1-BP组(均P<0.05)。空间探索实验结果显示，四组大鼠的穿越平台次数差异有统计学意义(F＝75.333，P<0.01)。1-BP组大鼠穿越平台次数[(1.08±0.29)次]低于Control组[(3.35±0.05)次](P<0.01)。PDTC+1-BP组大鼠的穿越平台次数[(1.95±0.26)次]则高于1-BP组(P<0.01)。四组大鼠脑组织NF-κB在细胞质和细胞核中的表达水平均差异有统计学意义(F＝20.865，23.877，均P<0.01)。1-BP组大鼠细胞质与细胞核中NF-κB表达水平均高于Control组[细胞质：(177.3±32.1)%，(100.0±8.4)%，P<0.01；细胞核：(173.2±27.1)%，(100.0±8.4)%, P<0.01]。而1-BP+PDTC组细胞质与细胞核中的NF-κB表达水平则均低于1-BP组[细胞质：(148.7±22.0)%，(177.3±32.1)%, P<0.01；细胞核：(149.7±18.8)%，(173.2±27.1)%, P<0.01]。qRT-PCR结果显示，四组大鼠前额叶皮质TNF-α及IL-1β的mRNA水平均差异有统计学意义(F＝17.464，17.382，均P<0.01)。1-BP组大鼠TNF-α及IL-1β mRNA水平均高于Control组(均P<0.05)，PDTC+1-BP组TNF-α及IL-1β mRNA水平均低于1-BP组(均P<0.05)。免疫组化结果显示，与Control组相比，1-BP组大鼠小胶质细胞和星形胶质细胞数量增加[小胶质细胞：(158.30±9.68)个，(110.20±16.30)个，P<0.05；星形胶质细胞：(122.76±4.35)，(80.24±6.96)，P<0.05]，形态上也表现为激活状态，神经元尼氏体着色浅、数量减少；PDTC+1-BP组小胶质细胞和星形胶质细胞数量均低于1-BP组[小胶质细胞：(131.70±14.67)个，(158.30±9.68)个，P<0.05；星形胶质细胞：(101.54±4.55)个，(122.76±4.35)个，P<0.05]，神经元尼氏体着色明显加深。结论NF-κB信号通路可能是介导1-BP中枢神经毒性的关键机制，PDTC干预明显减轻1-BP染毒大鼠神经炎性反应及改善行为学障碍。