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兵器科学与技术
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葡萄球菌肠毒素B在大肠杆菌中的表达

简介：应用DNA重组技术，构建了金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)的原核表达载体pET22b(+)-SEB，在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。经终浓度为0．4mmol／LIPTG的诱导作用，可获得分子量约为29KD的表达蛋白。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析结果表明，重组表达的SEB主要以可溶的形式存在于细胞周质中，表达SEB的量约占菌体总蛋白的30％左右。重组表达的SEB经HiTrap^TMchelatingHP柱纯化能达到SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳纯。ELISA试验表明纯化的重组SEB与抗天然野生型SEB单克隆抗体呈现明显的阳性免疫反应。
标签： SEB 重组表达金黄色葡萄球菌肠毒素B SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 ELISA试验 ET

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海蛇神经毒素Erabutoxin（Eb）的基因在大肠杆菌中的表达研究

简介：为满足科研和医学应用上的需要，用基因工程的方法制备海蛇神经毒素。首先人工合成海蛇神经毒素Erabutoxin（Eb）的基因，重组到T载体。通过PCR扩增Eb基因，用限制性内切酶把基因片段酶切成黏性末端，然后将目标基因插入表达载体pPET22b（＋），电转重组质粒到宿主菌BL21（DE3），在25℃0．5mmol／LIPTG诱导培养8h收获培养物，SDS-PAGE电泳检测目标蛋白大部分存在于包涵体中，用8mol／L尿素溶解后，利用C末端的His-6与Ni^2＋离子亲和层析纯化，得到单一的电泳蛋白带。
标签：海蛇神经毒素 DNA克隆基因表达包涵体亲和层析

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担子菌对芥子气的降解作用

简介：用两种担子菌的培养液可实现芥子气的完全降解。在每种真菌对芥子气的降解过程中都可发现有两条不同的代谢途径。其主要途径为通过非酶水解作用生成二羟二乙硫醚。次要途径为通过硫醚键断裂发生水解脱氯反应，产生氯乙醇和氯巯基乙烷。最后达到完全的代谢。
标签：担子菌芥子气降解作用化学武器

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