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8 个结果
  • 简介:由于广西一些养殖场频繁发生以母猪流产、死胎、木乃伊、仔猪呼吸道症状等为特征的流行性传染病,怀疑为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染所致.广西大学动物科学技术学院黄伟坚等从病猪中采集材料,经RT—PCR检测为硝、性后,接种于Marc-145细胞,经过六代盲传,发现典型的细胞病理变化(CPE),经鉴定为PRRSV,命名为GXA,其毒价为105.33TCID50/mL.参考VR-2332和CH-la基因序列,设计了3对特异性引物。分别对GXA的E、M、N基因同时进行了RT—PCR扩增、克隆和测序.应用DNAstar生物学软件拼接得到GX丸的E,M和N3个基因片段共长为1473bp.同源性分析表明。GXA与VR-233、MLV和RJ-4的同源性为99.7%-100%,而与欧洲型代袭LV的同源性只有66.4%.表明GXA与VR-233、MLV和RJ-4亲缘关系比较密切;与欧洲代表LV亲缘关系较最远。属于美洲型毒,有可能来源于疫苗

  • 标签: 序列分析 结构基因 猪繁殖与呼吸综合征病毒 克隆 细胞病理变化 同源性分析
  • 简介:猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒属动脉炎病毒科动脉炎病毒属,是引起母猪繁殖障碍的重要病原之一。本研究以出现繁殖障碍的母猪并通过ELISA检测为抗体阳性者的血清为材料,于2000年首次从重庆地区分离出PRRS病毒。母猪血清接种Marc-145单层细胞,经盲传至第四代时出现典型的细胞痛变效应(CPE);细胞培养物经电镜观察,发现其中有球形的病毒粒子,粒子大小为40~80nm,核心直径为20-40nm;病毒TCID50为10—4.46/0.05mL;用抗PRRSV特异性抗体能特异地中和病毒,中和指数为100,并将该地方分离命名为PRRSV—SCQ。根据Genbank中PRRSV北美洲ATCCVR-2332的序列设计一对特异性引物,以PRRSV—SCQRNA为模板,通过RT—PCR扩增其GP5基因片段.并将该片段插入克隆载体pMD18一T的EcoRV住点;测序结果表明该GP5基因序列与PRRSV—VR2332、LV的GP5基因核苷酸序列同源性分别为99.34%和62.14%,GP5蛋白氨基酸推导序列的同源性分别为97.51%和54.37%,揭示SCQ地方分离与VR2332在基因型上更为接近,应属于美洲型。

  • 标签: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 SCQ地方分离株 分离鉴定 基因型
  • 简介:在新疆维吾尔自治区某养殖场取患病虹鳟Oncorhynchusmykiss组织样本,进行传染性造血器官坏死病毒(Infectioushematopoieticnecrosisvirus,IHNV)分离鉴定、电镜观察、回归感染及遗传进化分析研究。细胞培养结果显示:患病虹鳟组织样本能够感染鲤Cyprinuscarpio上皮细胞(carpepithelialcell,EPC)产生典型细胞病变(cytopathiceffect,CPE),收集病毒悬液命名为XJ-13。滴度测定实验表明:该病毒为10-(6.15)TCID_(50)/mL。回归感染实验表明:该分离在浓度为10-5PFU/尾的剂量使体质量5g的虹鳟死亡率达87.5%。通过透射电镜观察发现患病虹鳟组织悬液感染的EPC细胞内存在大量的子弹状病毒粒子,PCR鉴定结果表明该病毒为IHNV。XJ-13的糖蛋白氨基酸序列的聚类分析结果显示,该病毒与我国IHNV-Sn1203具有最高的同源性(99%),与美国参考WRAC的同源性为94.6%。结果表明:IHNVXJ-13是造成该养殖场虹鳟大量死亡的病原。

  • 标签: 传染性造血器官坏死病毒 糖蛋白 进化分析 鲤上皮细胞(EPC) 虹鳟
  • 简介:在温度为25±1℃,盐度为28条件下,用F/2培养基对19海洋金藻进行一次培养,在指数生长末期收获。测定其收获时细胞密度、生物量、总脂含量、脂肪酸组成。结果显示:金藻脂肪酸组成差异较大,大部分金藻多不饱和脂肪酸(PUFA)含量较高,占总脂肪酸的27.2%~57.6%,而且许多金22:6(n-3)(DHA)含量较高。

  • 标签: 海洋金藻 脂肪酸 含量 组成 贝类育苗 开口饵料
  • 简介:设计合成两对覆盖PCV2基因组奎长的引物,对PCV2分离S2、P11、L进行全基因测序。将所测序列与GenBank上已公布的PCV2毒序列进行同泺性比较,并绘制系统发育进化树。结果显示。所测毒与其它地城的24PCV2分离的基因组序列同源性很高。3个分离之问的奎基因核苷酸同源性在95.4%-99.3%。序列分析表明欧洲分离和美洲分离分别构成PCV2的两个夫的分支:欧洲系和美洲系。S2、P11属于欧洲系,L属于美洲系。

  • 标签: 猪圆环病毒 克隆 序列测定与分析
  • 简介:从黑龙江莱猪场疑似猪流行性腹泻猪的粪便中提取总RNA,采用RT-RCR方法扩增,首次荻得中国地方流行PEDVM全基因序列,将其克隆到pMD18-T载体中进行测序,克隆的M基因核苷酸序烈由681个核苷酸组成,含有一个完整的开放阅读框架,编码226个氨基酸。与国外已发表的其他毒进行基因进化分析,GenBank中的6PEDV形成的基因进化树具有3个分支。其中分离LJB/03形成一个独立的分支,说明LJB/03的M基因序列与其他毒相比,发生了一定的变异

  • 标签: 猪流行性腹泻病毒 M基因 流行株 序列分析 克隆 中国
  • 简介:从急性患病异育银鲫Carassiusauratusgibelio肝胰脏中分离到一优势菌。对该菌株进行了显微和超微结构观察、生理生化表型鉴定、16SrRNA和毒力基因分析及人工感染实验。结果显示:分离菌呈短杆状、两头钝圆、端生鞭毛,为革兰氏阴性菌;发酵葡萄糖产酸,氧化酶、触酶试验阳性,高盐浓度不生长;16SrRNA序列与气单胞菌属Aeromonas的基因相似性为98%以上,系统发育分析进一步表明该菌为维氏气单胞菌A.veronii,在该菌中可检测到肠毒素基因,且回接感染能导致健康银鲫发病,表明该菌具有致病性。

  • 标签: 异育银鲫 系统性出血 维氏气单胞菌 分离鉴定 致病性