简介：目的寻找一种在最短时间内能为假丝酵母菌的鉴定提供最多信息的简易培养方法。方法在同一个平板内用分区划线法、多点接种法及小培养对标本进行培养，分离假丝酵母菌。结果一个平板内同时使用三种方法接种培养。可从分区划线法、多点接种法观察到菌落的全貌（如颜色、质地、形态）、种类、数量及生长特性等。可用显微镜从小培养中看到假丝酵母菌的孢子和菌丝的结构。结论由于假丝酵母菌种类繁多导致假丝酵母菌临床感染表现不同，临床诊断和治疗在很大程度上依赖于实验室的检查结果，因此寻找快速有效的鉴定方法至关重要。一个平板内同时用三种方法接种标本进行培养，可大大提高假丝酵母菌的检出率及鉴定效率，并能判定分离出的假丝酵母菌是目的菌株还是污染菌。

简介：目的评价PCR结合反向斑点杂交法检测福尔马林固定、石蜡包埋组织中曲霉感染的可行性。方法选取39例病理证实曲霉感染的患者活检标本（21例为鼻窦感染标本、18例为尸检标本），以1对真菌特有的28SrRNA保守序列结构作为真菌通用引物，以临床常见的4个曲霉菌种：烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉、土曲霉的种特异性序列为种特异性探针，与扩增产物进行反向斑点杂交。结果尸检标本阳性率为55．6％（10／18），鼻窦标本阳性率为76．2％（16／21），特异性均为100％。在这些曲霉所致的系统性感染中，烟曲霉是主要的致病真菌。结论该方法能对临床无法培养的石蜡组织块进行回顾性病原学研究，并可以鉴定常见的曲霉菌种，有良好的特异性和敏感性，适用于临床曲霉感染的检测。

简介：电阻抗图谱（EIS）法作为测定植物抗寒性的一种方法,在农业、林业和园艺领域的应用正在不断扩大,本文以12个刺槐种质资源4年生试验林当年生枝条为材料,应用EIS法对各刺槐种质资源抗寒性进行了测定,对比分析了6个参数（τ、ψ、r、r1、re、ri）的数学意义,并与电导率法进行了对比。结果表明：在刺槐种质资源抗寒性研究中,胞外电阻率（re）是最适用的一个参数,能够较好反映出不同种质资源抗寒能力;采用EIS法测定不同种质资源抗寒性结果与传统的电导率法测定结果基本一致,但省时、不需温育,具有更大的优越性。

简介：目的探索一种结果更可靠的真菌直接镜检方法。方法对600例临床高度疑似真菌感染的标本分别采用荧光染色法和KOH湿片法进行真菌直接镜检。结果荧光染色法和KOH湿片法的真菌检出率分别为97%和88.5%。结论荧光染色法是一种适合临床的、快速有效的真菌镜检方法。

简介：目的用一种新制备的单克隆抗体MAb03．2Cl-C2鉴别生物学形态相近的白念珠菌和都柏林念珠菌。方法用小鼠体内诱导法制备抗白念珠菌芽管胞壁外膜单克隆抗体MAb03．2Cl-C2。用不完全RPMI1640培养液、L—DMEM、H—DMEM、完全1640液、小牛血清诱导白念珠菌和都柏林念珠菌芽管及菌丝形成，间接免疫荧光（IIF）方法检测都柏林念珠菌芽管或菌丝表面有无可与该单抗相结合的成分。收集临床口腔念珠菌病标本涂片，直接做IIF试验。结果用不完全RP-MI1640培养液37℃，6h可同时最高效率地诱导白念珠菌和都柏林念珠菌芽管或菌丝形成。单抗MAb03．2Cl-C2仅与白念珠菌芽管或菌丝特异性地结合，与都柏林念珠菌的孢子和菌丝不能结合。结论单抗MAh03．2Cl-C2可用于白念珠菌和都柏林念珠菌实验室的速鉴别。

简介：目的通过静脉内接种的方法，构建播散性白念珠菌感染的兔模型，并用PCR评价伊曲康唑注射液治疗播散性念珠菌病的疗效。方法在接种后24h，用伊曲康唑注射液5rag／kg对兔模型进行治疗，1次／d，共14d。在不同的时间段取兔模型的静脉血，进行血培养和真菌通用引物以及白念珠菌特异性引物的PCR检测，监测伊曲康唑注射液治疗播散性白念珠菌感染的疗效。结果在接种白念珠菌后1h、6h，外周血中用PCR方法就能检测到白念珠菌，且能持续到8—10d；实验兔外周血血培养1h后阳性，持续到18h。实验结束后解剖实验兔，治疗组较对照组内脏器官的组织培养阳性率及菌落数低。结论PCR是一种快速和敏感的检测播散性念珠菌病的方法，伊曲康唑注射液治疗播散性白念珠菌病有效，但是真菌的清除率特别是肾脏组织的真菌清除率并不理想，治疗结束7d后，组织匀浆真菌培养仍然阳性。

简介：肺部真菌感染的治疗以抗真菌药物治疗为主，在选择性病例可辅以手术治疗，而治疗基础病和调整免疫机能同样十分重要？

简介：以山东省41份小麦种质资源为材料,使用46对引物,通过SSR技术对其进行了DNA指纹数据库的构建。结果显示,所采用的46对引物在本试验材料中共检测到69个等位基因,有较好的多态性。利用NTSYS进行UPGMA聚类分析后,发现这41种材料在遗传相似系数0.68为阀值处可以分为3个类群。试验证明该方法能够分辨各个种质间的亲缘关系,能够较好满足小麦DNA指纹数据库的构建要求,对山东省小麦遗传资源的收集、保存、分类、评价、核心种质的建立等研究工作提供理论依据。

简介：萝卜是我国的主要蔬菜之一,其杂种优势十分明显,培育自交不亲和系是萝卜杂种优势育种的主要途径之一。本研究根据萝卜自交不亲和基因SLG6序列设计特异引物,以8个自交系为材料,其中自交不亲和系和自交亲和系各4个,扩增SLG6基因第232～711bp之间的单拷贝片段,8个材料均获得了一条480bp的特异片段。用限制性内切酶TaqⅠ对该片段进行酶切,自交不亲和系均产生约125bp和244bp的片段,其中,244bp的片段为自交不亲和系所特有,可作为SLG6基因的CAPS标记用于萝卜自交不亲和基因SLG6的检测;而自交亲和系则具有与自交不亲和系相同的125bp的片段和不同的多态性片段。

简介：目的从新生隐球菌的基因组中扩增出STE12α基因，并构建相应的表达载体，以进一步研究STE12α基因对隐球菌的生长特性及致病性的影响。方法采用PCR方法以及基因重组方法扩增并克隆新生隐球菌基因组中的STE12α基因，建立具有表达野生型STE12α基因的表达载体。结果从新生隐球菌的基因组获得STE12α全基因，建立重组子pUCm—STE12α／NovaBlue以及重组表达载体质粒pGAPZ—STE12α，实现了STE12α基因的转化并获得表达。结论成功地克隆了新生隐球菌STE12α基因并构建了可表达野生型STE12α基因的表达载体，为进一步研究STE12α基因功能打下了良好的基础。

简介：实时荧光定量PCR是目前基因表达量差异分析的首选方法之一。虽然其操作简单,但如何保证其定量结果的可信度一直是个难题,特别是针对只有20多个碱基的miRNA的定量分析。本研究以水稻miR408在不同组织中的表达差异为实例,系统地优化和阐述了有关荧光定量的新标准及要求。结果表明,引物的浓度对于荧光定量PCR体系的优化至关重要。

简介：荧光定量PCR(qRT-PCR)是研究分子生物学中基因表达的一种新型核酸定量技术,具备快速高效、特异性强、重复性好、灵敏度高和自动化程度高等优点,因而根据相应的实验材料选择适宜的内参基因对于提高qRT-PCR分析的准确性显得尤为重要。Actin基因表达范围广且表达稳定,常常作为内参基因应用于qRT-PCR表达分析中。前期利用转录组测序(RNA-seq)技术获得了西葫芦低温弱光转录组数据库,本研究从中筛选到1条长达2543bp的cDNA,并对其进行了序列分析。生物信息学分析结果表明,该序列包含1个开放读码框(ORF),大小为2064bp,预测编码氨基酸数为682个,理论分子大小约为79.67kD,蛋白质等电点为6.28。WolfPsort分析发现,CpActin蛋白亚细胞定位于细胞核中。MotifScan分析显示,CpActin蛋白质的氨基酸序列207~406位和558~682位分别为Actin的中端和C端保守区域。同源性分析表明,基因编码的蛋白质与同为南瓜属的中国南瓜和印度南瓜同源蛋白的相似性达到99%,具有高度的保守性。基于所获得的基因全长cDNA序列,设计了基因ORF全长引物对CpActin-F、CpActin-R,经PCR扩增得到一条特异、明亮的条带,经测序验证,序列与RNAseq数据库的cDNA序列一致,基因命名为CpActin,GenBank登录号为MH211008。在此基础上,设计了一对荧光定量PCR引物CpActin-Fq、CpActin-Rq,分析显示,该引物具有较高的特异性和扩增效率,且在西葫芦不同组织(根、茎、花和果)和不同胁迫处理[正常(25℃,300μmol/m^2·s)、低温处理(4℃,300μmol/m^2·s)、弱光处理(25℃,80μmol/m^2·s)、低温弱光处理(4℃,80μmol/m^2·s)、强光处理(25℃,2000μmol/m^2·s)和高温处理(38℃,300μmol/m^2·s)]叶片中均能稳定表达,适合在西葫芦基因qRT-PCR表达分析的研究中作为候选内参基因。

简介：目的评价肝移植术后曲霉气道的定植及其发生侵袭性感染的风险。方法回顾2003—2004年南京八一医院和上海长征医院56例肝移植患者进行的连续组织学检查和曲霉培养结果。结果24例患者被分离出曲霉，2例发生侵袭性烟曲霉感染。这2例患者在移植后6个月内都有烟曲霉的定植，并且都死亡，占所有移植后死亡的29％。无曲霉定植者都未发生侵袭性曲霉感染。结论肝移植术后的侵袭性曲霉感染较为少见，但常致死，曲霉定植常见但为一过性，由于气管侵袭性曲霉感染只发生在有烟曲霉定植的移植后6个月内的患者，所以在此期间进行预防性的治疗能否有效降低侵袭性曲霉感染值得研究。

简介：以11个转外源基因（Cry1Ac＋API-B）系为材料,受体亲本陆地棉品种鄂抗9号为对照,研究其在抗棉铃虫性、产量和纤维品质性状上的差异。结果表明：11个转基因系的抗棉铃虫效果明显,达到中抗和高抗水平;转基因系及其受体、转基因系之间在单铃重等10个性状上均存在极显著性差异;和受体亲本相比,各个转基因系变异方向比较一致的性状有：衣指、衣分降低;而株高、单株结铃数、单铃重、子指、皮棉产量、纤维长度、断裂比强度、马克隆值、伸长率等性状的变化方向不定。

简介：目的探讨Fonsecaeamonophora黑素的理化性质及其合成途径。方法通过化学分析、紫外光谱、红外光谱和电子顺磁共振波谱等明确F.monophora黑素的理化性质;通过比对F.monophora菌株在基础培养基（马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基、L-DOPAPDA培养基）和含黑素抑制剂培养基（DOPA黑素抑制剂培养基、DHN黑素抑制剂培养基）的菌落生长情况,采用BioTek酶标仪EON定量分析其黑素合成,以明确F.monophora的黑素合成途径。结果F.monophora黑素与合成L-DOPA黑素的理化性质相似;菌株在含L-DOPA培养基较PDA培养基产生更多的黑素,且在含DOPA黑素抑制剂叠氮化钠及DHN黑素抑制剂苯肽、三环唑培养基中其黑素合成均明显降低。结论F.monophora黑素主要为LDOPA黑素,可能共同存在DOPA黑素和DHN黑素合成途径。

简介：采用多样性指数分析了102份山东水稻地方品种抽穗期、株高、穗长等13个农艺性状和蛋白质含量、直链淀粉含量、胶稠度及RVA谱特征值等12个品质性状的多样性。结果表明,山东地方水稻品种农艺性状存在较高的多样性,多样性指数（H＇）范围为1.42～2.05,株高、穗颈长、每穗粒数的多样性指数较高,分别为2.01、2.02、2.05;品质性状的多样性指数范围为0.99～2.04,其中蛋白质含量、胶稠度、最高粘度、热浆粘度、崩解值的多样性指数分别为2.00、2.04、2.04、2.01、2.04。结果表明,山东地方水稻农艺性状与品质性状存在较为广泛的多样性,可为山东地方水稻品种的有效利用提供依据。

简介：中国现拥有燕麦种质资源约4000份,对它们的研究结果表明,中国燕麦具有比较丰富的多样性。本文综述了中国燕麦的物种多样性和普通栽培燕麦的遗传多样性,并建议对中国各地生长的野燕麦进行系统研究。

简介：采用形态学方法对采集于新疆野生的阿魏蘑标本进行分类鉴定，结果表明其形态学特征符合刺芹侧耳托里变种Pleurotuseryngiivar．tuoliensis的特征范围，它与欧洲已报道的Pleurotusnerbrodensis有明显差异。此外本研究还采用分子生物学方法对从该野生样品分离的菌株CCMSSC02514进行了rDNAITS序列分析，结果表明它与我国栽培白灵菇菌种CCMSSC00973、KH5和AFRL6002完全相同，以此构建系统发育树，将我国栽培白灵菇种质与意大利的P．nebrodensis、P．eryrtgiivar．ferulae以及来自荷兰的P．eryngii等分为两组。因此，形态学和rDNAITS序列分析结果支持我国栽培的白灵菇与欧洲的P．ne—brodensis为不同种，我国的白灵菇是刺芹侧耳独立进化的一个分支，其名称应该为刺芹侧耳托里变种P．eryngiivar．tuoliensis。

简介：目的评估AFLP-DNA指纹技术在新生隐球菌分类中应用情况。方法新生隐球菌基因组DNA用双酶酶切,双链接头连于其酶切末端,用与接头和酶切位点互补的引物扩增DNA片段,其产物在高分辨的变性聚丙酰胺凝胶上电泳分离,然后进行银染。结果分析来自5种血清型和临床分离株的18株新生隐球菌,可见有30多条大小在30～500bp的DNA-AFLP指纹,相同的血清型有不同的指纹图谱,来自同一患者不同病期的两株分离株和来自同一患者患者的不同部位的两株分离株都显示出相同的带型。结论显示了AFLP的高分辨率,是适用于新生隐球菌流行病学调查的有力工具。

简介：目前真菌感染，特别是免疫缺陷患者中侵入性真菌感染的发病率和死亡率在不断增加，但现有抗真菌药物可选择范围小、毒副作用大而且耐药情况日渐严重。联合用药这一概念的提出，给耐药株及严重性真菌感染提供了新的治疗途径，并且已在临床中广泛运用。该文对不同种类抗真菌药物联用的研究成果及作用机制做一综述。