简介：摘要目的评估活性氧簇(ROS)响应型纳米药物对活体小鼠角膜新生血管(CNV)形成的影响。方法Michael加成反应合成含有缩硫酮键的载血管内皮生长因子小干扰RNA(siVEGF)的ROS响应型纳米药物(ROS-TK-5/siVEGF)。琼脂糖凝胶电泳测定纳米药物在高ROS环境中的siVEGF累计释放量。选取39只6～8周龄VEGFR2-luc-KI转基因荧光标记小鼠，采用随机数字表法将其中30只小鼠分为正常对照组、PBS对照组、ROS-TK-5/NC组、ROS-TK-5/siVEGF组和雷珠单抗组，每组6只，采用NaOH滤纸贴附角膜中央的方法构建小鼠右眼CNV模型，正常对照组不做处理；应用随机数字表法将另外9只小鼠分为正常对照组、建模后7 d组和建模后14 d组，每组3只小鼠，采用二氢乙啶(DHE)染色法测定小鼠角膜碱烧伤后角膜组织内ROS含量。裂隙灯显微镜眼前节照相与小动物活体成像系统(IVIS)观察小鼠角膜碱烧伤后7、14、21 d应用纳米药物对CNV形成的影响。结果在无ROS环境中，仅5%～10%的siVEGF从纳米复合物中释放出。与10 mmol/L H2O2共孵育10 h后，约70%的siVEGF从纳米药物中释放。建模后7 d和14 d，角膜基质层相对荧光强度分别为5.403±0.306和2.930±0.255，较正常对照组的1.003±0.015明显增加，差异均有统计学意义(均P<0.05)。各组建模后不同时间CNV面积比较，差异均有统计学意义(F分组＝49.855，P<0.01；F时间＝65.556，P<0.01)，其中建模后7 d和14 d，ROS-TK-5/siVEGF组和雷珠单抗组的CNV面积较PBS对照组和ROS-TK-5/NC组明显减小，ROS-TK-5/siVEGF组CNV面积较雷珠单抗组明显减小，差异均有统计学意义(均P<0.05)；建模后21 d，ROS-TK-5/siVEGF组和雷珠单抗组的CNV面积较PBS对照组及ROS-TK-5/NC组明显减小，差异均有统计学意义(均P<0.05)。各组小鼠建模后不同时间小鼠角膜的荧光信号强度比较，差异均有统计学意义(F分组＝27.193，P＝0.003；F时间＝51.062，P<0.01)，其中建模后7 d和14 d，ROS-TK-5/siVEGF组和雷珠单抗组的角膜荧光信号强度较PBS对照组及ROS-TK-5/NC组明显减弱，ROS-TK-5/siVEGF组角膜荧光信号强度较雷珠单抗组明显减弱，差异均有统计学意义(均P<0.05)；建模后21 d，ROS-TK-5/siVEGF组和雷珠单抗组的角膜荧光信号较PBS对照组及ROS-TK-5/NC组明显减弱，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论ROS-TK-5/siVEGF可以有效抑制小鼠碱烧伤后CNV生成，且早期治疗效果优于雷珠单抗。