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4 个结果
  • 简介:摘要目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-151-5p在骨折愈合方面的作用。方法建立标准的大鼠股骨干骨折愈合模型(郑州大学动物中心),基因芯片分析血浆miRNA的表达。应用生物信息学方法模拟miRNA与靶基因配对,并寻找相关的靶通路。细胞实验验证miR-151-5p对成骨细胞(大鼠颅骨提取)的影响。最后,再次建立骨折愈合模型,给予miR-151-5p模仿物和抑制物,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测转化生长因子-β(TGF-β)通路主要蛋白的表达。正态分布数据应用student-t检验,miRNA数据应用Benjamini & Hochberg方法进行比对。结果在大鼠骨折模型血浆结果显示miR-151-5p在骨折愈合7 d时显著高于对照组(对照比7 d为58.16±8.17比201.40±7.23,F=25.09,P<0.01),GSE93083数据集中骨折患者miRNA-151-5p表达量较健康组明显升高(骨折患者比健康人为12.25±0.17比12.00±0.19,t=2.446,P<0.01)。通过生物信息学分析,miR-151-5p的靶基因参与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路,胰岛素信号通路,上皮细胞间质转型(EMT)信号通路,Ras信号通路以及TGF-β信号通路的调控。文献分析富集结果提示,miR-151-5p的靶基因主要参与TGF-β信号通路的调控。细胞实验提示miR-151-5p可以抑制成骨细胞增值活性,并抑制成骨细胞TGF-β通路表达。骨折愈合模型中,miR-151-5p模仿物PLCG1(miR-151-5p模仿物比抑制物组为3.99±2.06比10.36±2.87,q=4.596,P<0.05)和MAPK8(miR-151-5p模仿物比抑制物组为4.93±1.543比17.49±5.328,q=4.533,P<0.01)较抑制物组显著增高。结论miR-151-5p是通过TGF-β参与骨折愈合的早期调控过程。

  • 标签: 骨折愈合 微小RNA 转化生长因子-β信号通路
  • 简介:摘要目的探讨骨肉瘤的肿瘤微环境,以促进骨肉瘤免疫疗法的进展。方法从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中获取了119例骨肉瘤患者的mRNA表达数据,分析骨肉瘤的肿瘤微环境,通过一致性聚类将患者分为4个聚类,并将骨肉瘤组织依据是否为炎性组织分为冷肿瘤与热肿瘤,对比4个聚类免疫相关评分及免疫相关基因的表达水平,对冷、热肿瘤进行生存分析,最后进行聚合酶链反应(PCR)、基因敲除、细胞计数试剂盒(CCK-8)以及细胞凋亡实验进行验证。组间比较采用ANOVA分析。结果聚类4拥有较高的免疫评分与基质评分(P<0.01),其与热肿瘤特点相似,而CD276在聚类4中表达较低(P<0.01),是骨肉瘤治疗的潜在靶点。生存分析曲线显示热肿瘤有相对较好的预后,但其差异无统计学意义(P>0.05)。此外,在冷肿瘤中NPTX2的表达与CD8A、GZMB和IFNG的表达呈负相关,且NPTX2可抑制CCL4的分泌。最后,体外实验发现骨肉瘤细胞中NPTX2的敲减可抑制肿瘤生长并增加肿瘤细胞凋亡。结论本研究探索骨肉瘤中免疫细胞的浸润特征,为改善骨肉瘤患者的免疫治疗现状提供依据。

  • 标签: 骨肉瘤 免疫浸润 免疫疗法
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  • 简介:摘要目的探讨序贯悬吊法在腹腔镜Lich-Gregoir手术治疗儿童原发性膀胱输尿管反流(primary vesicoureteral reflux,VUR)中的安全性和有效性。方法回顾性分析电子科技大学医学院附属妇女儿童医院2017年4月至2018年4月采用序贯悬吊法辅助完成腹腔镜Lich-Gregoir手术治疗儿童原发性膀胱输尿管反流的14例患儿临床资料。14例患儿均因反复尿路感染入院,男5例,女9例;平均年龄36个月,范围9~72个月;右侧8例,左侧6例。术前Ⅲ级反流3例,Ⅳ级或Ⅴ级反流11例,肾图提示存在肾瘢痕。结果14例患儿均在腹腔镜下顺利完成手术,无中转开腹者。平均手术时间为45 min,范围40~63 min;术中平均出血量3.5 ml,范围2~8 ml。术后3个月复查排泄性尿路造影检查,仅1例为Ⅰ级反流,余均未见反流,术后6个月泌尿系超声造影检查、术后9个月排泄性膀胱尿道造影(voiding cystourethrography,VCUG)检查均未见有反流。术后6个月复查肾图未发现新的肾瘢痕出现。14例患儿随访至今无尿路感染发生。结论腹腔镜Lich-Gregoir手术操作中采用腹壁序贯悬吊法,能安全有效的暴露术野,并缩短切开膀胱浆肌层和包埋输尿管的操作时间。

  • 标签: 腹腔镜 膀胱输尿管反流 膀胱外黏膜下隧道法 序贯悬吊