简介：摘要目的探讨和建立稳定的大鼠股骨干骺端内H型微血管的观测方法。方法2019年3月至2019年9月，15只无特定病原体(SPF)级SD雄性大鼠，购自南方医科大学动物实验中心，简单随机抽样分5组：25 μm组(A组)，50 μm组(B组)，70 μm组(C组)，100 μm组(D组)，150 μm组(E组)。取后肢股骨，经固定、脱钙、脱水、包埋等，形成5组厚切片，免疫荧光特异性标记CD31显示微血管，比较不同厚度下股骨干骺端内微血管网血管平均面积占比、节点数目、血管总长度等指标，确立最佳观测厚度，在此基础上，CD31和Emcn双染观测H型微血管情况。应用Angio Tool软件分析骨内微血管网指标，SPSS 17.0软件行统计分析，计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示，组间比较采用方差分析，两两比较采用最小显著性差异法(LSD)分析。结果A～E组5组血管平均面积占比分别为(20.6±1.6)%、(31.0±1.4)%、(45.9±0.8)%、(31.8±1.1)%、(20.9±0.7)%，C组平均面积占比明显高于其余4组(F＝313.642，P<0.01)，差异有统计学意义。A～E组5组节点数目分别为(103±6)、(175±6)、(305±5)、(151±6)、(45±3)个，C组节点数目明显高于其余4组(F＝1 278.134，P<0.01)，差异有统计学意义。A～E组5组血管总长度分别为(14 300±956)、(19 215±439)、(24 492±565)、(19 071±893)、(12 799±561) μm，C组微血管总长度明显高于其余4组(F＝12.532，P<0.01)，差异有统计学意义。C组显示骨内完整微血管网，股骨干骺端骨CD31和Emcn双染标记显示特异性H型微血管。结论70 μm厚度下可满足微血管网的定量分析，实现对大鼠股骨干骺端H型微血管的准确观测。