简介：摘要目的评价组蛋白去甲基化酶(JMJD3)在小鼠药物相关性急性肾损伤(AKI)中的作用。方法雄性C57BL/6小鼠24只，8~10周龄，体重20~30 g，采用随机数字表法分为4组(n＝6)：对照组(C组)、AKI组、JMJD3抑制剂GSKJ4对照组(GSKJ4组)和GSKJ4-AKI组。腹腔注射叶酸250 mg/kg制备药物性相关AKI模型。GSKJ4-AKI组于AKI建模前1 h、GSKJ4组于相应时点，腹腔注射GSKJ4 20 mg/kg。AKI建模后72 h时，取血液标本，测定血清BUN和Cr浓度；随后处死小鼠，取肾组织，并采用HE与PAS染色法，检测肾组织病理学形态，进行肾小管损伤评分；采用TUNEL法检测肾组织凋亡细胞数，蛋白免疫印迹法检测JMJD3、Bax和cleaved caspase-3的表达，免疫组织化学法检测JMJD3、髓过氧化物酶(MPO)、F4/80、CD3的阳性细胞数及cleaved caspase-3、Bax表达，RT-PCR法检测IL-1β、IL-6、TNF-α和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的mRNA表达。结果与C组比较，AKI组血清BUN和Cr浓度、肾小管损伤评分升高，肾组织JMJD3、MPO、F4/80和CD3的阳性细胞数增多，凋亡细胞数增多，Bax、cleaved caspase-3、JMJD3、IL-1β mRNA、TNF-α mRNA、IL-6 mRNA和MCP-1 mRNA表达上调(P<0.05)，GSKJ4组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)；与AKI组比较，GSKJ4-AKI组血清BUN和Cr浓度、肾小管损伤评分降低，肾组织JMJD3、MPO、F4/80和CD3的阳性细胞数减少，凋亡细胞数减少，Bax、cleaved caspase-3、JMJD3、IL-1β mRNA、TNF-α mRNA、IL-6 mRNA和MCP-1 mRNA表达下调(P<0.05)。结论小鼠药物相关性AKI的发生机制可能与JMJD3表达上调，进而诱导细胞凋亡及炎症反应有关。

简介：摘要目的评价自然杀伤T细胞在急性肾损伤小鼠肾纤维化中的作用。方法清洁级健康雄性C57BL/6小鼠24只，8～10周龄，体重20～30 g，采用随机数字表法分为4组(n＝6)：对照组(C组)、急性肾损伤组(A组)、对照组+CD1d抗体组(C-MA组)和急性肾损伤+CD1d抗体组(A-MA组)。腹腔注射叶酸250 mg/kg制备急性肾损伤小鼠肾纤维化模型。C组尾静脉注射同型对照抗体20 mg/kg；AKI组造模前24 h时尾静脉注射同型对照抗体20 mg/kg；C-MA组尾静脉注射CD1d单克隆抗体20 mg/kg；A-MA组造模前24 h时尾静脉注射CD1d单克隆抗体20 mg/kg。注射叶酸后第14天时，眼球取血标本，检测血清BUN和Cr的浓度，然后处死小鼠，取肾组织，分别行天狼星红染色和HE染色，测定肾纤维化面积，并行肾损伤评分；采用免疫荧光法检测肾组织纤连蛋白(FN)、Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达，RT-PCR法检测肾组织IL-4、IL-13、精氨酸酶-1(Arg-1)和发现炎症区域1(FIZZ1)的mRNA表达。结果与C组比较，A组和A-MA组血清BUN、Cr浓度和肾损伤评分升高，肾纤维化面积增加，肾组织FN、Col-Ⅰ和α-SMA表达和IL-4、IL-13、Arg-1、FIZZ1的mRNA表达上调(P<0.05)，C-MA组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)；与A组比较，A-MA组血清BUN、Cr浓度和肾损伤评分降低，肾纤维化面积降低，肾组织FN、Col-Ⅰ和α-SMA表达和IL-4、IL-13、Arg-1、FIZZ1的mRNA表达下调(P<0.05)。结论自然杀伤T细胞激活参与了急性肾损伤小鼠肾纤维化的过程，其机制可能与促进Th2细胞因子释放，进而促进巨噬细胞M2极化有关。

简介：摘要目的评价含十字形结构域蛋白3(JMJD3)在顺铂致急性肾损伤小鼠肾纤维化中的作用。方法健康C57BL/6雄性小鼠48只，8~10周龄，体重20~30 g，采用随机数字表法分为4组(n＝12)：对照组(CON组)、对照+ JMJD3抑制剂组(CON-A组)、顺铂组(CIS组)和顺铂+ JMJD3抑制剂组(CIS-A组)。CIS组和CIS-A组分别于第1和14天时腹腔注射顺铂15 mg/kg，制备急性肾损伤小鼠肾纤维化模型；第4天时分别腹腔注射JMJD3抑制剂GSKJ4 10 mg/kg和等容量PBS，间隔3 d注射1次，共注射6次。CON组和CON-A组分别在相应时点腹腔注射等容量PBS和GSKJ4 10 mg/kg。每组取6只小鼠，于第1次注射顺铂后第3天，采集眼眶血检测血清Cr和BUN的浓度，然后处死取肾组织，行HE和PAS染色，光镜下进行观察并行肾损伤评分。第1次注射顺铂后第28天处死6只小鼠，取肾组织，行天狼星红和Masson染色，测定肾纤维化面积；采用免疫荧光法测定纤维连接蛋白、Ⅰ型胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平，免疫组化法行F4/80+细胞和CD3+细胞计数，RT-PCR法检测IL-6、TNF-α、趋化因子CXC配体16(CXCL16)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的mRNA表达水平。结果与CON组比较，CIS组血清BUN、Cr浓度和肾损伤评分升高，肾纤维化面积增加，肾组织纤维连接蛋白、Ⅰ型胶原蛋白和α-SMA表达上调，CD3+细胞和F4/80+细胞计数升高，IL-6、CXCL16、TNF-α、MCP-1的mRNA表达上调(P<0.05) ，CON-A组上述各指标比较差异无统计学意义(P>0.05)；与CON-A组比较，CIS-A组BUN、Cr浓度和肾小管评分升高，肾纤维化面积增加，肾组织纤维连接蛋白、Ⅰ型胶原蛋白和α-SMA表达上调，CD3+细胞和F4/80+细胞计数升高，IL-6、CXCL16、TNF-α、MCP-1的mRNA表达上调(P<0.05) ；与CIS组比较，CIS-A组血清BUN、Cr浓度和肾损伤评分降低，肾纤维化面积减少，肾组织纤维连接蛋白、Ⅰ型胶原蛋白和α-SMA表达下调，CD3+细胞和F4/80+细胞计数降低，IL-6、CXCL16、TNF-α、MCP-1的mRNA表达下调(P<0.05)。结论JMJD3参与了急性肾损伤小鼠肾纤维化的过程，其机制可能与促进炎症反应有关。