瞬时受体电位类香草醛5和骨桥蛋白在泌尿系统结石患者中的表达及其与微小RNA-22-3p的关系

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摘要 摘要目的检测瞬时受体电位类香草醛5(TRPV5)和骨桥蛋白(OPN)在泌尿系统结石患者中的表达及其与微小核糖核酸-22-3p(miR-22-3p)的关系。方法荧光定量反转录-聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测健康体检者、非泌尿系统结石患者和泌尿系统结石血清TRPV5、OPN和miR-22-3p表达并分析其相关性。将模型+miR-con组(转染miR-con)、模型+miR-22-3p组(转染miR-22-3p)转染至HK-2细胞并草酸钙结石晶体溶液(100 mg/L)处理。流式细胞仪检测细胞凋亡;蛋白质印迹法(Western blot)检测抗裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 (cleaved Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)和bcl-2相关X蛋白(bax)表达。两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析联合SNK-q检验。采用Pearson相关性分析法分析相关性。结果与健康体检者或非泌尿系统结石患者比较,泌尿系统结石患者血清TRPV5和miR-22-3p表达显著降低(TRPV5分别为0.66±0.15、1.06±0.26、0.77±0.21,miR-22-3p分别为0.62±0.18、1.00±0.23、0.83±0.19),OPN表达显著升高(2.78±0.49、1.07±0.21、1.60±0.20),差异有统计学意义(F=43.908、300.788、41.410,P<0.05)。泌尿系统结石患者血清中miR-22-3p的表达量与TRPV5的表达呈正相关(r=0.52,P<0.05),与OPN的表达呈负相关(r=-0.69,P<0.05)。与对照组比较,模型组HK-2细胞中TRPV5和miR-22-3p表达显著降低(TRPV5为0.43±0.07比0.98±0.10,miR-22-3p为0.72±0.16比1.01±0.13),OPN表达显著升高(3.24±0.36比1.02±0.12),差异有统计学意义(t=13.517、75.794和17.551,P<0.05),细胞凋亡率[(17.37±2.09)%比(3.78±0.49)%]、cleaved Caspase-3(0.42±0.06比0.19±0.05)和bax(0.68±0.07比0.28±0.06)蛋白质表达均显著升高,bcl-2蛋白表达显著降低(0.14±0.03比0.31±0.05),差异有统计学意义(t=21.431、17.233、13.655、31.782,P<0.05)。与模型+miR-con组比较,模型+miR-22-3p组细胞上述检测指标均发生显著的负向调控。结论TRPV5和OPN在泌尿系统结石患者中的表达与miR-22-3p存在明显的相关性。
出处 《中华实验外科杂志》 2022年01期
出版日期 2022年12月13日(中国期刊网平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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