摘要
摘要目的检测p53和DNA损伤调控基因1(PDRG1)在结直肠癌细胞中的表达，探讨PDRG1在结直肠癌细胞增殖、侵袭及迁移过程中的作用及其机制。方法实时定量反转录聚合酶链反应法(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测结肠癌(SW620)和正常结肠(NCM460)2种细胞中PDRG1 mRNA及蛋白的表达。转染PDRG1过表达载体和小干扰RNA(siRNA)感染序列至SW620细胞，实验分为3组，过表达转染组，阴性转染对照组，抑制组。Western blot检测PDRG1、锌指蛋白转录因子1(Snail1)、上皮型钙黏附蛋白(E-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)蛋白的表达。细胞计数试剂盒(CCK-8)，Transwell小室检测细胞增殖、迁移及侵袭能力。检测转染Snail1 siRNA感染序列对过表达PDRG1 SW620的影响。计数数据采用χ2检验或者Fisher′s精确检验，采用t检验比较各组间差异。结果PDRG1 mRNA和蛋白在SW620的相对表达量分别为1.853±0.118、1.563±0.064，明显高于NCM460中的1.00±0.00、1.00±0.00(t＝12.51、15.08，P<0.01)。SW620细胞转染PDRG1过表达载体后mRNA和蛋白的相对表达量较对照组(t＝20.073、16.842，P<0.01)明显升高，转染72 h后细胞增殖水平高于对照组(t＝4.857，P<0.01)，侵袭和迁移细胞数122.3±18.1、174.6±13.2，较对照组99.5±16.2、110.5±12.2明显增加(t＝2.956、11.271，P<0.01)。Snail1、Vimentin的表达明显升高(t＝9.756、10.950，P<0.01)，E-Cadherin的表达明显降低(t＝-6.060，P<0.01)。SW620细胞转染PDRG1 siRNA后mRNA和蛋白的表达较对照组明显降低(t＝8.072、12.704，P<0.01)，转染48、72 h后增殖水平低于对照组(t＝5.557、-4.782，P<0.01)，侵袭和迁移细胞数(30.8±8.6、37.5±8.9)，较对照组(117.6±12.8、126.9±11.9)明显降低(t＝-17.734、-18.873，P<0.01)。Snail1、Vimentin蛋白的表达明显降低(t＝-7.588、-7.187，P<0.01)，E-Cadherin的表达明显升高(t＝13.239，P<0.01)。转染Snail1 siRNA感染序列逆转了PDRG1调节的上皮-间充质化(EMT)过程和细胞迁移和侵袭。结论PDRG1可通过调控Snail1的表达来影响EMT过程，从而促进肿瘤细胞的增殖，侵袭和迁移。
出版日期
2021年12月19日（中国期刊网平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
