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  • 简介:本研究旨在探讨正常人骨髓干细胞(bonemarrowmesenchymalstemcells,BMMSC)分泌的(exosome)免疫调节功能及支持血管形成能力。收集第4—6代BMMSC上清液提取,应用透射电镜观察其形态,蛋白印迹法检测其表面特异标志CD9,bicinchoninicacid(BCA)方法定量检测分泌量;与正常人外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcells,PBMNC)作用72h后用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测PBMNC分泌的γ-干扰素(IFN-γ);实时定量PCR检测体内免疫相关microRNA表达;共聚焦显微镜观察与人脐带静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVEC)的作用方式,与HUVEC共培养后观察其网状结构形成;应用裸鼠体内试验检测对血管形成能力的作用。结果表明,正常人骨髓干细胞分泌的近似圆形,直径在40—160nm之间,表达表面标志CD9,其分泌量与接种细胞数呈线性关系,可抑制PBMNC分泌IFN-γ(P〈0.01),内含有免疫相关microRNA如miR301、miR22和miR-let-7a等,能促进HUVEC网状结构形成和血管形成(P〈0.01)。结论:BMMSC分泌具有免疫调节功能与支持血管形成作用。

  • 标签: 骨髓间充质干细胞外泌体 免疫调节 血管形成
  • 简介:摘要目的探讨SD鼠骨髓干细胞(BMSCs)来源(Exos)修复骺板缺损的相关机制。方法通过超离心提取鼠BMSCs来源的Exos,制备聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)负载的Exos(PLGA-Exos)支架,扫描电镜对支架进行表征。提取鼠软骨细胞,探究PLGA-Exos/RAW264.7细胞/软骨细胞共培养体系中巨噬细胞及软骨细胞相关基因的表达。将24只SD大鼠随机均分为A、B、C 3组,构建胫骨近端骺板缺损模型,将PLGA负载的BMSCs-Exos缓释棒(A组)及无Exos负载的PLGA棒(B组)分别填塞于骺板缺损区,C组为对照组(无填塞)。术后6周获取鼠胫骨标本,通过影像学X线分析、苏木精-伊红(HE)染色、甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色及巨噬细胞表型蛋白[M1型:诱导型一氧化氮合酶(iNOS);M2型:Arg-1]染色,评估骺板缺损的修复效果。两组比较采用独立样本t检验。结果PLGAs支架为三维多孔结构,孔隙分布均匀,具有较高的连通性。Exos被成功加载至PLGA中。PCR结果发现,在炎症微环境中,与对照组比较,BMSCs-Exos调控巨噬细胞高表达M2表型蛋白Arg-1(7.12±1.01比1.00±0.03,t=10.47,P<0.01),且促进软骨细胞COL-2及Sox9基因mRNA表达(8.25±0.74比1.00±0.12,t=16.84,P<0.01;4.64±0.16比1.00±0.01,t=38.64,P<0.01)。术后6周胫骨标本影像学及组织学分析显示,A组骺板缺损区可见结构致密、与正常骺板结构及功能相似新生透明软骨组织,B组骺板缺损区新生组织由大量的纤维组织及少量的透明软骨组成,C组骺板缺损区骨桥形成。骺板损伤区巨噬细胞相关的表型蛋白免疫组织化学染色显示,A组M2型巨噬细胞表型蛋白Arg-1染色呈阳性显色反应,M1型巨噬细胞表型蛋白iNOS染色为阴性;B组少量细胞基质被Arg-1抗体染为弱阳性,iNOS染色为阴性;C组Arg-1抗体染色为阴性,而iNOS染色呈阳性反应。结论在炎症微环境中,BMSCs-Exos调控巨噬细胞向M2型编程,促进骺板缺损修复。

  • 标签: 骨髓间充质干细胞 外泌体 巨噬细胞 骺板 修复
  • 简介:摘要干细胞(MSCs)是一种来自于中胚层的多能干细胞,具有高度的自我更新及多向分化潜能,并在适宜的条件下具有诱导分化为肌细胞、软骨细胞、成骨细胞、成脂细胞等多种细胞的能力。MSCs不仅具有多向分化潜能,而且还具有免疫调节功能,可抑制多种免疫细胞的性能,调节免疫应答。近年来,研究发现,来源于MSCs的(MSCs-Exo)具有与MSCs相似的组织损伤修复和再生功能。(exosome)是多种细胞分泌的膜小囊泡,直径30 ~ 200 nm,可以转运核酸、脂和蛋白质,参与细胞的信息交流。与MSCs相比,体用于临床疾病的治疗更加稳定,体内同种异体给药后免疫排斥反应的可能性较低,并可为各种疾病提供替代疗法。MSCs-Exo逐渐成为新的研究热点,本文将对MSCs-Exo的生物学特性、免疫调节作用和在临床疾病治疗中的研究进行综述。

  • 标签: 间充质干细胞 外泌体 免疫调节
  • 简介:摘要:近年来,研究发现,来源于MSCs的(MSCs-Exo)具有与MSCs相似的组织损伤修复和再生功能。(exosome)是多种细胞分泌的膜小囊泡,直径30~200nm,可以转运核酸、脂和蛋白质,参与细胞的信息交流。与MSCs相比,体用于临床疾病的治疗更加稳定,体内同种异体给药后免疫排斥反应的可能性较低,并可为各种疾病提供替代疗法。MSCs-Exo逐渐成为新的研究热点,本文将对MSCs-Exo的生物学特性、免疫调节作用和在临床疾病治疗中的研究进行综述。

  • 标签: 间充质干细胞 外泌体 研究
  • 简介:摘要体能够通过运送核酸、蛋白质和脂等多种活性物质介导细胞的相互作用。干细胞(MSCs)来源体能够通过其携带的活性物质发挥促进肝脏修复再生、抑制肝脏炎症和肝纤维化、调控肿瘤进展等重要作用,为临床肝病的治疗提供新策略。现就MSCs来源在肝脏疾病中的研究进展进行综述。

  • 标签: 肝疾病 间充质干细胞 外泌体 生物学特性 功能
  • 简介:摘要目的探讨人脐带干细胞(hUC-MSCs)分泌的对损伤后肌腱细胞修复的影响及其机制。方法组织块贴壁法分离并纯化筛选出能稳定传代培养的hUC-MSCs,倒置荧光显微镜观察细胞形态,通过流式细胞术检测hUC-MSCs的免疫表型。应用诱导培养基诱导hUC-MSCs向成骨细胞、成软骨细胞和脂肪细胞分化并进行鉴定。运用高速离心法提取MSCs的分泌物外(MSCs),用Western blot技术和电镜检测,用PKH67染色荧光法检测膜融合能力。40只Wistar鼠按随机数字表法分为肌腱损伤组和正常组,每组20只。肌腱损伤组:切断跟腱1周后用100 mg/kg戊巴比妥钠处死,取跟腱组织用胰蛋白酶消化得到损伤肌腱细胞。正常组:不做任何处理直接处死,与损伤组并行处理得到正常肌腱细胞。将与体外培养的肌腱细胞共培养,12,24,48,72 h后通过细胞计数CCK-8检测肌腱细胞增殖情况。hUC-MSCs处理细胞24 h后,采用Western blot、qPCR、免疫荧光方法检测对肌腱细胞转化生长因子-β(TGF-β)、骨形态发生蛋白(BMP)、血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)和炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。结果鉴定了hUC-MSCs,并成功分离hUC-MSCs。分离培养的MSCs呈梭形,丙氨酸氨肽酶(CD13)、整联蛋白β-1(CD29)、ecto-5'-核苷酸酶(CD73)、胸腺细胞表面抗原(CD90)和内皮素(CD105)呈阳性,人类白细胞DR抗原(HLA-DR)、造血祖细胞抗原(CD34)、白细胞共同抗原(CD45)呈阴性。分离出的经PKH67染色鉴定证实,在电镜下呈直径30~100 nm的圆盘、内部凹陷结构,Western blot检测高表达移动相关蛋白-1(CD9)和溶酶体相关膜蛋白3(CD63)。处理肌腱细胞后,CCK-8检测12,24,48,72 h细胞活性,结果表明肌腱损伤组显著高于正常组(P < 0.01),qPCR结果表明肌腱损伤组TGF-β(1.850 ± 0.127)、BMP(2.133 ± 0.398)、FGF(1.610 ± 0.223)、VEGF(2.207 ± 0.059)的mRNA表达显著高于正常组TGF-β(1.004 ± 0.105)、BMP(1.007 ± 0.145)、FGF(1.007 ± 0.140)、VEGF(1.001 ± 0.065)(P < 0.05),而肌腱损伤组IL-1β(0.102 ± 0.009)、TNF-α(0.130 ± 0.013)的表达显著低于正常组IL-1β(1.004 ± 0.113)、TNF-α(1.006 ± 0.134)(P < 0.01)。Western blot检测结果与qPCR检测趋势一致。结论hUC-MSCs分泌的通过上调生长因子TGF-β、BMP、VEGF、FGF的表达,抑制炎性因子IL-1β、TNF-α的表达,促进肌腱细胞生长,促进肌腱细胞损伤修复。

  • 标签: 间质干细胞 外泌体 细胞因子类 肌腱细胞
  • 简介:摘要是来自细胞旁分泌的一种细胞囊泡,因其含有多种生物活性因子,在细胞通讯、诱导细胞分化中起重要作用。干细胞来源体能够影响骨组织细胞增殖、通过信号通路调控诱导成骨、减少免疫炎性反应来促进骨缺损再生。近年来,与骨缺损再生之间的关系引起研究者的注意。本文对此方面的研究进展进行综述。

  • 标签: 骨缺损 骨再生 间充质干细胞 外泌体
  • 简介:摘要干细胞(MSCs)是一种具有自我更新及多向分化能力的多能干细胞,MSCs来源(MSC-EXOs)运载各种生物活性成分,如蛋白质、脂、信使RNA(mRNA)、微小RNA(miRNA,miR)、长链非编码RNA(lncRNA)、环状RNA(circRNA)、DNA等,这些物质可以作用于邻周或远处的细胞,从而介导细胞各种生物学作用,如通过影响血管内皮细胞诱导血管再生。本文就干细胞来源的生物发生和在各组织中促进血管再生的研究现状进行综述。

  • 标签: 间充质干细胞 外泌体 血管再生
  • 简介:摘要干细胞(MSCs)具有免疫调节和促血管生成的特性,在细胞治疗中具有广泛的应用前景。是一类具有脂双分子层结构的纳米级小囊泡。近年研究表明,具有与MSCs类似的生物学功能,可替代MSCs用于多种疾病的治疗。干细胞来源(MSCs-exo)被广泛应用于包括葡萄膜炎、青光眼、视网膜和眼表疾病在内多种眼科疾病的治疗研究。然而,MSCs-exo内容物复杂,功能多样,为避免被免疫系统快速清除、提升靶向细胞特异性、减少不良反应,需要对外进行不同策略修饰。如MSCs-exo内容物修饰后,使治疗因子过度表达,可最大限度地发挥其对特定眼病治疗的潜力和疗效,有望成为眼病治疗的新选择。本文重点阐述MSCs-exo应用和修饰的策略和现状,并探讨MSCs-exo修饰在眼病治疗中的潜在应用前景。

  • 标签: 间充质干细胞来源外泌体 外泌体修饰 眼科 综述
  • 简介:摘要子痫前期是妊娠期常见并发症,严重威胁母婴健康,目前临床上尚无有效治疗方法。干细胞来源(mesenchymal stem cell-derived exosomes,MSC-exos)是纳米级别微粒子,携带有蛋白质、脂和核酸等生物活性物质,是细胞通讯的媒介。MSC-exos可参与免疫调节、促进细胞增殖与迁移、促进血管生成等多种重要生理过程,在组织修复和疾病治疗中发挥重要作用。近年来MSC-exos在治疗缺血性疾病、免疫功能障碍、炎性疾病等领域已逐渐成为研究热点。本文从MSC-exos的生物学功能出发,针对子痫前期重要发病机制如滋养细胞和内皮细胞功能障碍、母胎界面免疫失衡及氧化应激,阐述其治疗子痫前期的可行性,并归纳了近年来MSC-exos治疗子痫前期的动物实验研究进展。最后总结展望了MSC-exos作为一种新型无细胞治疗策略的优势与挑战。

  • 标签: 子痫前期 间质干细胞 外泌体 可行性研究
  • 简介:摘要干细胞(MSCs)是一种具有自我更新与多向分化潜能的祖细胞,在特定条件下可分化成各种成体细胞,是再生医学研究中应用范围最广的细胞源。随着研究的不断深入,MSCs在组织修复与再生中的相关机制可能与其旁分泌活性有关,尤其是具有关键调控作用的(exosomes),而外下、细胞囊泡释放的多种生物活性物质可能是MSCs发挥各项生理功能的核心要素之一。本文将对MSCs来源在皮肤修复与再生中的研究进展进行综述,总结提高皮肤损伤修复速度与质量的机制与潜能。

  • 标签: 间充质干细胞 外泌体 旁分泌
  • 简介:摘要:经过该技术扩增的干细胞仍保留干细胞表面标志物以及成脂、成骨和成软骨分化的多向分化潜能。移植人脐带干细胞可以促进小鼠背部皮肤创面愈合。此项技术的建立为干细胞生物学和再生医学研究和应用提供了充足的具有可比性的种子细胞来源。本次对人脐带干细胞来源在皮肤老化方面的作用策略进行综述。

  • 标签: 皮肤老化 人脐带间充质干细胞来源的外泌体 作用
  • 简介:【摘要】目的 干细胞来源促进皮肤损伤创面修复的作用及机制研究。方法 抽取2022年1月-2022年12月参与企业研究的的皮肤损伤患者60例为观察对象,依据数字表法分为观察组、对照组,各30例。对照组应用磺胺嘧啶银乳膏,观察组在对照组基础上应用干细胞。比较临床疗效。结果 观察组创面面积改善情况、创面愈合时间优于对照组(P〈0.05)。结论 干细胞来源可以改善创面环境,促进患者创面愈合。

  • 标签: 间充质干细胞来源外泌体 皮肤损伤 创面修复 作用机制
  • 简介:本研究观察人树突状细胞(dendriticcells,DC)来源(DC—derivedexosome,DCex)对人骨髓干细胞(mesenchymalstemcells,MSC)成骨分化的影响。采用超速离心法从树突状细胞培养上清中获取DCex,应用电子显微镜观察DCex形态并通过流式细胞术检测和鉴定其细胞来源。取第3代MSC,设3组培养诱导体系:①对照组:d—MEM基础培养液组;②实验组:d—MEM基础培养液+DCex(10μg/m1)组;③α-MEM基础培养液+标准诱导剂组。采用荧光实时定量PCR、琼脂糖凝胶电泳检测各组成骨分化转录因子Runx2mRNA的表达情况,并进行碱性磷酸酶(ALP)活性检测。另外,荧光染料DiI标记DCex,应用共聚焦显微镜观察DCex进入MSC的过程。结果显示,在电子显微镜下DCex呈典型的圆形或椭圆形膜层结构,直径为40—100nm,并表达DC细胞的标志物CD83,CD86,CD80和HLA—DR。在DCex处理MSC后6h时,可在共聚焦显微镜下观察到进入到MSC胞内的DCex,随着作用时间延长,细胞荧光强度增加。按组培养第7天,DCex实验组Runx2表达较对照组增高,差异有统计学显著性(P〈0.05);MSC培养第14天,DCex组ALP含量OD值与对应蛋白比为2.22±0.27,显著高于阴性对照组(1.20±0.21)(P〈0.01),但低于标准诱导组(3.22±0.24)(P〈0.05)。结论:DCex可以促进MSC向成骨细胞分化,其且机制仍需讲一步研穷证实.

  • 标签: 树突状细胞 外泌体 间充质干细胞 成骨分化
  • 简介:摘要干细胞移植在缺血性卒中的治疗领域颇具潜力,尤以骨髓干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)研究最为广泛。研究表明,BMSCs主要以旁分泌方式发挥其功能,其释放的体表现出类似BMSCs的生物活性。BMSCs作为无细胞疗法,在缺血性卒中的研究领域已取得诸多进展。文章就BMSCs治疗缺血性卒中的研究进展进行了综述。

  • 标签: 卒中 脑缺血 骨髓细胞 间充质干细胞 外泌体
  • 简介:摘要:MSC-EXOs是一种具有多种信号的细胞,携带着脂、蛋白和核酸,它们在细胞负责通讯、免疫调节和血管再生中起着重要的作用。MSC-EXO可以调节肺动脉高压、肺纤维化等多种信号通路,降低细胞炎性反应,调节免疫细胞功能,改善线粒体功能,改善肺血管重构,促进肺血管重建,强肺组织的机能,治疗肺病,为以后的临床治疗提供新的思路。

  • 标签: 间充质干细胞 外泌体 肺部疾病
  • 简介:摘要:MSC-EXOs是一种具有多种信号的细胞,携带着脂、蛋白和核酸,它们在细胞负责通讯、免疫调节和血管再生中起着重要的作用。MSC-EXO可以调节肺动脉高压、肺纤维化等多种信号通路,降低细胞炎性反应,调节免疫细胞功能,改善线粒体功能,改善肺血管重构,促进肺血管重建,强肺组织的机能,治疗肺病,为以后的临床治疗提供新的思路。

  • 标签: 间充质干细胞 外泌体 肺部疾病
  • 简介:摘要卵巢癌的发病率位居女性恶性肿瘤第三位。干细胞(MSC)是肿瘤微环境中的重要组成部分,研究表明MSC可通过分泌多种细胞因子,促进上皮-间质转化(EMT)并增加肿瘤干细胞的比例等抑制或促进卵巢癌细胞增殖、侵袭和转移;MSC能够产生大量,其分泌的具有与MSC相似的生物学功能,是介导细胞信息交流及传递的重要因素,但MSC来源对肿瘤的作用及机制仍不清楚。因此研究卵巢癌、MSC及其外之间相互作用的机制可能会揭示治疗卵巢癌的新方法。

  • 标签: 卵巢肿瘤 外泌体 间质干细胞
  • 简介:摘要骨关节炎作为常见的关节慢性退行性病变,致残率随人口老龄化、肥胖率的上升及不合理锻炼等原因逐年升高。以干细胞为种子细胞的软骨组织工程是目前治疗骨关节炎最具潜力的方法。越来越多的研究表明,干细胞分泌的是其能够介导软骨修复及再生的主要原因。本文主要对干细胞的产生、生物学特征及在软骨修复、再生中的作用做一总结,以期更好的阐明干细胞治疗骨关节炎的机制。

  • 标签: 骨关节炎 间充质干细胞 外泌体
  • 简介:摘要尽管围生医学和新生儿医学已经取得了较大进展,但早产儿相关并发症的发病率及死亡率仍较高。目前支气管肺发育不良、脑损伤、坏死性小肠结肠炎、早产儿视网膜病变等早产儿相关并发症的防治仍是临床难点。在实验水平上,基于干细胞的再生医学已经被证明是治疗这些疾病有前景的方法,但是其存在致瘤性、免疫排斥等潜在的风险。研究表明,干细胞发挥作用的关键介质。因此,近年来,体已经成为治疗早产儿相关并发症的新选择。现对干细胞来源治疗早产儿并发症的研究进展作一综述。

  • 标签: 外泌体 间充质干细胞 早产 支气管肺发育不良 脑损伤 坏死性小肠结肠炎 早产儿视网膜病变