简介：目的：探索ISSR分子标记技术对玉竹的主要栽培品种、野生种及易混淆品黄精进行鉴定的新方法。方法：采用优化的ISSR-PCR体系，筛选出能扩增明显多态性条带的引物对样品进行扩增和凝胶电泳分析，并依遗传距离构建分子聚类图。结果：10个引物共扩增出125个DNA片段，其中116个片段呈现多态性，多态带百分率为92．9％。玉竹品种间存在较大的遗传多样性，栽培品种与野生种及易混淆品黄精易于区分。结论：本实验所建立的ISSR分子标记方法可用于玉竹的品种鉴定和良种选育研究。

简介：分析鉴定ApoCⅢ转基因阳性小型猪.从仔猪尾中提取基因组DNA,通过PCR和Southernblotting等手段进行鉴定;从仔猪肝、小肠、心、肾、肺、脾、胃以及皮肤等冰冻组织以Trizol法提取RNA,以RT-PCR手段进行检测分析.经过对18头仔猪进行PCR分析,显示其中的15头含有人ApoCⅢ基因,随后的测序和Southernblotting亦证实,猪的基因组中已经整合有人ApoCⅢ基因.RT-PCR证实人apoCⅢ基因已经在转基因小型猪的肝脏和小肠中进行了翻译.本研究成功制备了人ApoCⅢ转基因小型猪,可作为高脂血症与动脉粥样硬化疾病之间关系很有价值的研究模型.

简介：目的:分析大花红景天Rhodiolacrenulata与长鞭红景天R.fastigiata、云南红景天R.yunnanensis等云南常见药用红景天及景天属的长丝景天Sedumbergeri的核糖体内转录间隔区(ITS)基因序列,为药用红景天分子鉴定提供依据.方法:用PCR产物直接测序法测定其核糖体内转录间隔区序列并作同源性分析.结果:构建了大花红景天11个地方居群、长鞭红景天9个地方居群、云南红景天1个地方居群及长丝景天1个地方居群的ITS基因片段序列数据库.序列比较的结果表明红景天属样品的ITS序列与长丝景天有显著差别;红景天属内各种序列差异虽小,却存在显著而稳定的差别,能准确鉴定出各种药用红景天植物.结论:根据rRNAITS区碱基序列差异,能准确鉴别大花红景天及其近源植物及药材.

简介：随着国际贸易活动的日趋频繁及其复杂化,实蝇类害虫的传播扩散机率越来越大,直接威胁农业生产安全,成为影响果蔬等进出口贸易的重要检疫问题之一.因此,实蝇的准确识别与快速鉴定受到了世界各国的高度重视.本文主要对目前已经被用于实蝇鉴定的分子生物学技术的原理、优缺点及其研究进展进行概述;同时,根据BOLDSystems现有的数据,汇总了截至2014年10月22日实蝇DNA条形码的种类、已公布研究的记录数及涉及的实蝇种类.结果表明：目前应用于实蝇鉴定的DNA条形码有COⅠ-5P、COⅠ-3P、COⅡ、COⅢ、CYTB、atp6、28S等7种;其中以COⅠ标记为主,已公布的记录数为4540,是其他5种DNA标记的113.5倍,COⅠ-5P标记研究的实蝇科种类有315种,COⅠ-3P标记的有116种;目前研究较多的为果实蝇属、寡鬃实蝇属、腊实蝇属.本文对今后选用分子生物学技术鉴定实蝇种属具有重要的理论意义.

简介：摘要目的以核糖体转录间隔区(rDNAITS)序列为分子标记，对1种产自贵州安顺的华钩藤植物进行遗传分析与分子鉴定。方法通过改良CTAB法提取样品总DNA，利用通用引物对rDNAITS序列进行PCR扩增，经克隆、测序后，运用ClustalX、BioEdit和PAUP等软件进行序列分析和构建系统发育树。结果测序得到样品的rDNAITS区序列长度为719bp，序列分析结果显示其与Genbank中已有的华钩藤Uncariasinensi(Oliv.)Havil.rDNAITS区序列之间相似性达99.8%，并且在系统发育树中并排聚类成1支。结论基于rDNAITS区序列的测序分析和系统发育树构建的分子生物学方法，能够对华钩藤植物进行准确的分子鉴定，为钩藤属中药材的种类鉴定和种间分类提供分子生物学理论依据。

简介：摘要目的探讨ABO亚型B(A)的血型鉴定方法及其分子机制。方法选择2015年7月，于山东省泰安市中心医院因ABO血型正反定型不符，拟行进一步血型鉴定的1例患者为先证者；以先证者、先证者丈夫及其2个儿子为研究对象。本例先证者为女性，45岁。采用常规血清学方法鉴定受试者的ABO血型。采用序列特异性引物(SSP)-PCR法对受试者ABO基因第6、7外显子进行直接测序，并且根据测序结果确定其ABO基因型。本研究遵循的程序符合山东省泰安市中心医院人体试验委员会制定的标准，经过该伦理委员会批准(批准文号：2015-018)，并与所有受试者签署临床研究知情同意书。结果① ABO血型正反定型检测结果显示，先证者及其长子ABO血型为B(A)亚型，先证者丈夫和次子为O型。吸收放散试验结果显示，先证者与其长子血清标本中检测出A抗原，其丈夫与次子未检测出A抗原。② ABO基因测序结果显示，先证者及其长子均检出O02等位基因，ABO基因第7外显子存在c.640A>G突变，符合B(A)04等位基因的特征，其基因型均为B(A)04/O02；先证者丈夫和次子基因型为O01/O02。先证者长子的B(A)04等位基因来源于先证者，B(A)04等位基因的遗传方式为顺式遗传。结论分子生物学方法是鉴定罕见ABO亚型的必要方法。ABO基因第7外显子c.640A>G突变是形成B(A)04等位基因的分子遗传学基础之一。

简介：【摘要】淫羊藿是重要的中药材之一，自古以来在我国众多中药典籍中都有所记载。然而淫羊藿种类较多，在全国范围内的分布较为广阔，中国黔东南、中部、西北、东北以及安徽浙江等地都有着广泛的分布。而分布在不同地区、在不同地域环境下生长的淫羊藿在性状、理化性质等多方面有所差异。而为了有效针对中药材淫羊藿进行鉴定，采用DNA分子鉴定技术能够有效规避淫羊藿在鉴定过程中受自然环境和生物体生长所产生的不确定性而带来的影响，本研究将结合中药材淫羊藿的DNA分子鉴定技术进行总结，综述DNA分子鉴定技术鉴定中药材淫羊藿的方法。

简介：【摘要】淫羊藿是重要的中药材之一，自古以来在我国众多中药典籍中都有所记载。然而淫羊藿种类较多，在全国范围内的分布较为广阔，中国黔东南、中部、西北、东北以及安徽浙江等地都有着广泛的分布。而分布在不同地区、在不同地域环境下生长的淫羊藿在性状、理化性质等多方面有所差异。而为了有效针对中药材淫羊藿进行鉴定，采用DNA分子鉴定技术能够有效规避淫羊藿在鉴定过程中受自然环境和生物体生长所产生的不确定性而带来的影响，本研究将结合中药材淫羊藿的DNA分子鉴定技术进行总结，综述DNA分子鉴定技术鉴定中药材淫羊藿的方法。

简介：目的:为了制备足量、高纯度的供血吸虫保护性免疫力研究的多价分子疫苗。方法:通过制备型SDS-PAGE和电渗析方法从日本血吸虫成虫分离纯化出28kD、31/32kD及97kD蛋白。并检测其蛋白含量,蛋白纯度和分子量及其抗原活性。结果:此三种纯化蛋白经SDS-PAGE检测均为单一条带并与所分离的蛋白分子量相符;其蛋白含量分别为0.35mg/ml、0.4mg/ml和0.3mg/ml;Westem-blot均为单一反应区带;ELISA反应滴度分别为1:640、1:1280和1:320。结论:所制备的日本血吸虫成虫28kD、31/32kD及97kD蛋白多价分子疫苗,具有纯度高、制备快、回收率高等优点,而且不影响所纯化的抗原活性。

简介：随着不同转基因生物(GMO)制品的不断商业化,转基因成分检测技术也需不断更新。由于甘蔗红糖为甘蔗汁经高温熬煮浓缩而成,红糖中残留的DNA降解严重、含量低、片段短,且蛋白及糖分杂质含量高,所以甘蔗红糖DNA是比较难以收集并进行分子检测的。为了在转基因甘蔗红糖商业化前建立起转基因甘蔗红糖DNA的提取及分子鉴定技术,本研究以转基因甘蔗和非转基因甘蔗为材料,模仿传统的红糖制作工艺,分别获得了转基因甘蔗红糖与非转基因甘蔗红糖。通过对DNA提取方法进行改进,设计不同扩增片段长度的引物,并对传统PCR与荧光定量PCR进行比较,建立了稳定的甘蔗红糖DNA的提取方法及外源基因分子鉴定技术该技术对转基因甘蔗红糖与非转基因甘蔗红糖进行准确鉴别,为今后转基因甘蔗红糖的商业化所需的转基因食品鉴定提供技术支持,也为后面更为重要的转基因甘蔗白糖DNA的提取及分子鉴定提供借鉴。

简介：摘要DNA分子标记包括以分子杂交（southern杂交）为基础的DNA分子标记技术、以PCR为基础的DNA分子标记技术和以DNA序列为基础的分子标记技术和DNA序列测定技术。本文概述了常用DNA分子标记技术的特点，对近年来DNA分子标记在中药鉴定中的应用进行了综述。

简介：【背景】相似穿孔线虫是一种重要的检疫性有害生物，其寄主范围广，危害具有毁灭性，已给我国农业生产造成潜在威胁。由于目前大多化学杀线剂毒性较高，筛选获得对相似穿孔线虫具有拮抗活性的微生物菌株对线虫防控具有重要意义。【方法】广泛从染病香蕉植株根际采集土壤样本，运用等比稀释涂布平板法分离菌株；采用摇瓶发酵法制备拮抗菌株上清液和发酵液。通过室内生物测定和盆栽试验，筛选出对相似穿孔线虫具有拮抗作用的细菌菌株，并通过16SrDNA的PCR扩增和序列分析，对拮抗菌株进行种类鉴定。【结果】获得5株对相似穿孔线虫具有较理想拮抗活性的细菌菌株。其中，菌株HD-86的作用效果最好，其发酵上清液处理24h后的相似穿孔线虫死亡率达100%。盆栽试验表明，菌株HD-86发酵液处理42和70d后对相似穿孔线虫的相对防效分别为77.34%和90.51%，均优于对照药剂阿维菌素。【结论与意义】菌株HD-86对相似穿孔线虫具有很强的拮抗作用，将其鉴定为洋葱伯克氏菌Burkholderiacepacia。本研究可为相似穿孔线虫生防制剂的研发和病害的防控提供依据。

简介：为了明确江西瑞昌山药炭疽病病原菌种类归属,本文从当地采集呈典型症状的炭疽病叶片进行了病原菌分离鉴定。通过组织分离获得8个在培养性状和分生孢子形态大小均一致且均具有致病性的分离株,8个分离株在PDA平板上菌落初为白色,后变为灰色至深灰色,菌落中央产生橘红色黏质分生孢子团。分生孢子无色,长椭圆形至纺锤形,单胞,大小为(15.6~18.0)μm×(3.6~6.0)μm。对其中之一的分离株YRRC-1进行rDNA-ITS区段扩增和序列测定,获得长度为536bp的rDNA-ITS序列,该序列与胶孢炭疽菌(Colletotrichumgloeosporioides)的对应序列同源性达100%。根据分离病菌的培养特征、形态大小和序列鉴定结果,认为瑞昌山药炭疽病菌属于胶孢炭疽菌(C.gloeosporioides)。

简介：摘要 :本文采用 PCR法对白粉病的分子生物学进行了解析，并提取病原菌的总基因组 DNA，用此方法 扩增其核糖体基因内转录间隔区的保守序列并测量序号，利用聚类和 MEAG软件建立系统发育 树 ，推引出系统发生关系，运用分子来判定该菌株，并与其它白粉病菌株做了亲缘对比。从结果中可以看出，本研究所测序的姜黄的序列与土耳其菊芋的序列将近全部相似。本实验的创新之处在于对白粉病进行鉴定，并从分子水平解析其进化关系。

简介：泳道3～8所用模板来自蛇粗毒（模板用量为5μl,泳道4、5所用模板来自蛇粗毒（模板用量为35μl,并以之为模板进行PCR扩增、测序和序列分析

简介：摘要本文对医药上使用的马勃药品，根据形态差异分为2类，分别进行了rDNA-ITS序列分析及系统发育研究。rDNA-ITS序列分析结果表明马勃属（Calvatia）、灰包属（Lycoperdon）和灰球菌属（Bovista）分别在3个分支上；2类样品分别与龟裂秃马勃Lycoperdonutniform和大秃马勃Calvatiagigantea的支持率为100%；利用rDNA-ITS序列分析方法是能鉴定不同种。

简介：随着科学技术的快速发展，人们对于中药的重要功能也越来越重视起来。在发扬和传承中药的过程中，利用分子生物技术已经非常的普遍，而且，通过分子生物技术对于中药材的质量分析，能够有效的监测中药材的药效、质量，做到全程监管，保证重要品质。本文根据分子生物技术在重要鉴定中的实际应用情况进行分析，从而有效的反映出分子生物技术在中药中的关键作用。

简介：皮肤癣菌（Dermatophytes）是浅部真菌病的主要致病菌种，是一群浅在寄生性真菌，侵犯皮肤、毛发和指（趾）甲，寄生或腐生于表皮角质、毛发和甲板的角蛋白组织中。在生物分类学上，皮肤癣菌的有性时代属于子囊菌亚门，其无性阶段属于半知菌亚门、丝孢菌纲、丝孢菌目、丛梗孢科，根据大分生孢子的特征可将皮肤癣菌的3个属加以区分。

简介：利用虹鳟Oncorhyncusmykiss的引物,采用PCR及胶回收测序的方法找到一种高效区分白斑红点鲑Salvelinusleucomaenis和美洲红点鲑Salvelinusfontinalis的简单、快速、可靠的分子鉴定方法。采用该方法对无直接亲缘关系的白斑红点鲑、美洲红点鲑和虹鳟进行鉴定,结果发现：AF346686引物扩增的分子标记可以准确迅速地鉴别白斑红点鲑、美洲红点鲑和虹鳟。

简介：应用刚果红鉴定培养基,从土壤中筛选出两种分解纤维素能力较强的真菌,分别命名为NY01和NY02.滤纸条降解度分析显示,NY01的降解能力高于NY02.应用分子生物学手段,对两株菌rDNA的ITS区域序列分析显示,NY01与木霉的相似性高达99%,NY02与毛霉的相似性高达99%,暗示NY01可能是木霉的一个种,NY02可能是毛霉的一个种.培养基中碳氮比例对两株真菌纤维素降解酶活性的研究显示,在N/C比值较低和较高时,CMC酶和FPA酶活性都低,N/C比值在1∶8时酶活性最高,说明两株真菌降解纤维素的最佳N/C比值是1∶8.